河北病理实验外包实验室

病理实验外包，冰冻切片取样实验步骤：一、取材应尽可能快地采取新鲜的材料，防止组织发生死后变化。二、速冻1.将组织块平放于软塑瓶盖或特制小盒内（直径约2cm）。2.如组织块小可适量加OCT包埋剂浸没组织，然后将特制小盒缓缓平放入盛有液氮的小杯内。3.当盒底部接触液氮时即开始气化沸腾，此时小盒保持原位切勿浸入液氮中，大约10~20s组织即迅速冰结成块。4在制成冻块后，即可置入恒冷箱切片机冰冻切片。5.若需要保存，应快速以铝箔或塑料薄膜封包，立即置入-80℃冰箱贮存备用。三、固定1.样品托上涂一层OCT包埋胶，将速冻组织置于其上，4℃冰箱预冷5~10min让OCT胶浸透组织。2.取下组织置于锡箔或者玻片上，样品托速冻。3.组织置于样品托上，其上再添一层OCT胶，以完全覆盖为宜，速冻架（PE）上30min。南京英瀚斯，病理实验外包检测，只做真实实验。河北病理实验外包实验室

病理实验外包，染色常见染色介绍天狼星红染色：主要由天狼星红染色液、Mayer苏木素染色液组成，主要用于各种组织病变时对胶原纤维异常或纤维增生的研究中，在普通光学显微镜下心脏血管等组织的胶原纤维被染成红色，在偏振光镜下对各种纤维化病变的分型和分级研究有一定的帮助作用。采用免疫组化技术也可显示Ⅰ、Ⅲ型胶原纤维，但所用抗体昂贵，操作费时，而采用天狼星红染色试剂便宜，操作简单。天狼星红染色液操作步骤1、组织固定于10%福尔马林固定液，常规脱水包埋。2、切片厚6μm，常规脱蜡至水。3、天狼星红染色液滴染1h。4、流水稍冲洗，去除切片表面染液。5、Mayer苏木素染色液染细胞核8～10min。6、流水冲洗10min。7、常规脱水透明，中性树胶封固。天狼星红染色可用作肝纤维化以及肾纤维化模型的定性与胶原纤维沉积的半定量分析。南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。浙江病理实验外包实验室病理实验外包检测，实验经验丰富，认真负责，方便高效。

病理实验外包，病理染色HE染色常见问题：Q3：细胞核染色过浅，颜色暗淡答：切片在苏木素染液中停留过短，或苏木素过度氧化失效，或分化时间太长。对策：重新染色。将组织切片放入0.01%氢氧化钠、0.5%氨水、饱和的碳酸氢钠溶液、乙醇溶液，每个3-5min即可，接着重新染色。可以适当地组织的嗜碱性以增强核染色，如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氢钠溶液中3h，自来水冲洗5-10min染色，或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氢钠溶液中1h，自来水冲洗10min染色。Q4：细胞核染色过深，胞浆着蓝色答：切片在苏木素染液中停留过长；或切片太厚；或分化时间太短。这种情况首先镜下看看切片厚度(比较好厚度1-2层细胞核)，要么重新染色，要么重新制片。南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。

病理实验外包，病理染色胶原纤维染色法1.VanGieson（V.G）***-酸性品红法鲜红色：胶原纤维黄色：肌纤维、细胞质、红细胞蓝褐色：胞核2.天狼星红（Siriusred）***染色法红色：胶原纤维绿色：细胞核黄色：其他另：天狼星红***染色法：（偏光显微镜）Ⅰ型：强双折光性，呈黄色或红色纤维Ⅱ型：弱双折光，呈多种色彩疏网状分布Ⅲ型：弱双折光，呈绿色的细纤维Ⅳ型：弱双折光的基膜，呈淡黄色 公司自建有标准的细胞培养房，配备有生物安全柜、超净工作台、三气细胞培养箱、二氧化碳细胞培养箱、荧光倒置显微镜、体视镜、酶标仪、流式细胞仪等设备。南京英瀚斯，专业的病理实验外包服务平台。

病理实验外包，病理染色组织的取材和要求：知识点1：对送检组织标本的要求送检组织标本在手术切除或活检后应当立即放入4%中性缓冲甲醛溶液中固定。尸检标本应当尽量在死亡后尽早取材固定。送检组织需要全部取材的，应当在送检单上注明，有特殊要求（如细菌培养、解释道化学分析等）应当事先联系，并且在标本未固定前进行处理。知识点2：组织取材要求在对送检组织标本进行详细检查的基础上，根据诊断的需要，确定取材的部位和块数。切取的组织应当按照不同的部位分别给予不同的编号或标记，以便镜检时核对。另外，尽可能在取材前对有意义的标本的表面及剖面镜下摄影，并编号存档南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。病理实验外包所需样本如何保存。青海组织病理实验外包公司

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1.取材与固定固定剂同时具有硬化细胞组织的作用，使制片便于进行。2.洗涤与脱水洗涤是把深入组织中的固定剂洗去，防止染色中的结晶产生，驱除组织中的水分，利于透明和浸蜡。3.透明与浸蜡(透蜡)脱水后的组织中水分已被透明剂所代替，而有利于浸蜡。浸蜡的目的是使组织有一定的硬度而有利于切片和细胞组织保持一定的生活时状态。4.包埋与切片用石蜡和其他包埋剂(组织填充剂作包埋剂)包绕一定的形状以便于切片。将包埋好的组织块用切片机切成一定的厚度(厚度以um计)。5.贴片(展片、捞片)和染色将已且妥的切片在温水中展平整后用载玻片贴上，稍晾干后再烤片。染色可使细胞和组织被染上不同的颜色而产生一定的折射率，便于显微镜观察。6.切片染色后用胶类物质将其封固，便于长期保存。南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。河北病理实验外包实验室

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