高效胞外囊泡工程化

外泌体作为近几年的“科研新贵”，可谓是红极一时。由于它们具有独特的迁移、靶向和选择性内化进入特定细胞的能力，是非常有前途的递送载体。然而，目前在外泌体研究和应用上还存在以下痛点：痛点一：由于目前对这些内源性囊泡了解还不够深入，尤其是在体内行为方面上，将外泌体治zhi疗转诊至临床故而仍为一大难点。体内追踪外泌体可以提供有关其生物分布、迁移能力、毒性、生物学的重要知识角色，沟通能力和行动机制。痛点二：目前对于胞外囊泡的标记方法有很多种，包括亲脂性的染料(如PKH系列、Dil系列)，然而这些染料标记方法存在一些不足。维思克思的示踪探针基于两项发明专利，对比其他染色方法，该探针具有低背景、高效率、强耐酸的优势！发明名称：1.一种pH敏感型探针分子及其应用；2.一种探针分子的合成方法。WSR0001-2工作原理为共价方式嵌入外泌体膜结构。当染料结合外泌体膜后，可通过荧光显微镜准确观察到外泌体在细胞内运动与行踪。突出优势：特异性高，无背景干扰；标记效率高，该探针以共价的方式嵌入胞外囊泡的双层膜结构，优于亲脂性染料，避免自组装形成的纳米粒子造成信号干扰。在低pH（酸性）条件下也可显色。外泌体研究工具标准化操作流程，新手也能快速上手，降低培训成本。高效胞外囊泡工程化

外泌体的保存是否重要？在外泌体研究中，储存稳定性是一直困扰广大科研工作者的难题。目前外泌体一般在PBS中，置于-80℃分装冻存，但随着冻存时间和冻融次数的增加，将会严重影响外泌体的活性、完整性、货物含量等。针对上述难点，维思克思开发出外泌体的冻存保存液，直接混入外泌体样本中，置于-20℃、-80℃冻存，可明显改善储存样品的短期和长期稳定性。产品特点：操作简便，可直接混入外泌体样本中，无需过多操作。保护效果好，使用后外泌体生物活性稳定，多次冻融后外泌体颗粒数、表面标志物蛋白均无明显差异。适用样本范围广，可适用于所有外泌体样本（包括植物、动物、微生物、人来源外泌体）。产品信息：WisExoExosomeProtector（WSR0020）天然EVs分离方法外泌体研究工具完备验证数据，提供详细技术文档，减少方法验证时间。

需离心三次，这么方便的外泌体分离试剂盒你见过吗？为方便各位老师使用我司试剂盒，我司将持续更新各个试剂盒使用教程视频，请各位持续关注哦！维思克思的外泌体分离产品-SEC离心柱法外泌体分离试剂盒，只需要3次低速离心即可实现外泌体的高效分离，你见过吗？详情可联系客服。产品信息：SpinColumnExosomeIsolationKit（WSR0015）；ExoIsoSpinColumn（WSP0015）；ExoIsoSpinColumnPlus（WSP0016）。维思克思生物科技(武汉)有限公司

外泌体研究常见问题解答11.外泌体是什么？通常，外泌体被定义为约1.13-1.19g/mL的囊泡（基于密度梯度离心），预期尺寸为30–150nm（基于电镜分析）。由活细胞分泌到细胞外环境的膜性小囊泡，是细胞间信息传递的重要载体，参与细胞间相互作用。几乎所有类型的细胞，都可以产生并释放外泌体。根据不同生物来源分类，外泌体分为动物细胞外泌体、植物外泌体、微生物外泌体。动物细胞来源的外泌体也可以通过其表面蛋白标记物来定义和鉴定，这些标记物包括：四跨肽（CD63、CD81、CD9）和其他类似ALIX、TSG101等标记物。目前没有合适的工具，也没有足够的知识来对外泌体做出明确而简单的定义，将其与其他微/纳米囊泡区分开。外泌体研究工具多场景应用设计，覆盖基础研究到临床前，提升实用性。

外泌体表征与定量难在什么地方？又该怎么做？我们拜访过很多外泌体研究工作者，其中谈到多的是外泌体难以分离，分离后的外泌体不好定量，定量的外泌体数据是否准确等问题。很多人认为外泌体的分离难点在于样本差异、杂质类型或外泌体来源于细胞等，但业内人事认为，外泌体的分离之难，在于没有很好的方法去判定外泌体的纯度和活性。本文从外泌体定量和表征的角度来分析，什么样的外泌体才是高质量的，以及如何对外泌体进行计数。单一定量和表征方法的局限性对外泌体的鉴定方法，目前行业内基本上是一致的：通过形态、粒径范围、标志蛋白等定性检测。1.单一定量方法的局限性对外泌体的定量，使用较多的还是颗粒数。众所周知，外泌体被定义为30-150nm的小细胞外囊泡，比较大和小的外泌体表面积相差25倍、体积相差125倍。而外泌体发挥功能主要依赖其所载货物，比较大和小外泌体对受体细胞的效应也会有较大差异。同时颗粒数的检测方法包括NTA或纳米流式等，并不能分辨外泌体和其他具有相识粒径的其他杂质，在计算颗粒数时，不同纯度外泌体数据的可参考性也并不相同。所以通过颗粒数来对外泌体定量，可能有其局限性。外泌体研究工具专业技术支持，提供实验方案指导，降低技术门槛。脐带间充质干细胞EVs定制生产

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外泌体研究常见问题解答47.外泌体中是否存在18SmRNA？通过测序和qPCR分析了外泌体RNA的含量，这些囊泡肯定包括一些18sRNA。早期的论文具有误导性，一个团队声称外泌体是miRNA和mRNA阴性的。事实上，外泌体包含核糖体RNA、tRNA和许多非编码RNA，并且很大一部分miRNA实际上与蛋白质（例如Ago2）相关，而不是外泌体。8.外泌体研究的困难是什么？（1）外泌体异质性，包括来源异质性、大小异质性、成分异质性等；（2）高纯度的外泌体获取；（3）外泌体鉴定表征；（4）外泌体保存。高效胞外囊泡工程化

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