外泌体是科学研究的热点,可怎么才能追踪到外泌体在体内的踪迹呢?很多研究者都被这一点给难住了。尽管市面上已经有了许多追踪染料,但这些染料要么就是荧光信号太弱,要么就是背景太高,都存在很多不足。维思克思曾经也深受其害,经过长时间的沉淀与积累,我们终于带来由发明专利“一种pH敏感型探针分子及其应用、一种探针分子的合成方法”转化而来的示踪试剂盒!外泌体标记步骤:1试剂准备。使用时将WisTracker提前从-20℃取出,避光解冻后备用。2标记外泌体。将解冻后的WisTracker添加到外泌体溶液中,室温避光反应30min。3游离探针的去除。推荐用维思克思的WSR0015一步普通离心去除游离探针,得到纯净的荧光标记外泌体。外泌体示踪步骤:1接种细胞。取合适密度的细胞,接种于共聚焦平皿中置于合适条件下培养。2孵育外泌体。细胞计数,当细胞生长到70%时,加入荧光标记的外泌体于细胞培养条件下避光孵育2-4h。3清洗与染色。取出平皿,用PBS清洗3次,加入DAPI溶液,室温避光孵育10min,孵育完成后再用PBS清洗3次。4荧光检测。在激光共聚焦显微镜下观察细胞和外泌体,并拍照记录。外泌体研究工具高效分离技术,缩短实验周期,提升研究进度效率。细胞培养上清sEVs保存

外泌体定量和表征。研究外泌体的同行们(包括我)一直被外泌体的定量和表征所困扰,什么样的外泌体才是好的外泌体呢?是评估其活性?纯度?蛋白浓度?还是其他什么指标?或者说我们在做实验时,怎样对外泌体进行定量呢?这个可以说是进行外泌体实验的第一步,必须确定外泌体的量,才好判断实验变量是否影响外泌体的发生或者确定下游应用实验的给药剂量。你们是如何进行定量的呢?目前的外泌体定量方法有以下几种,分别是:纳米颗粒跟踪分析(NTA)、纳米流式、表面标志物的ELISA定量试剂盒、BCA或Bradford蛋白定量试剂盒。注:受认知所限,有没有涵盖的,欢迎补充。上述外泌体定量方法中,以BCA蛋白浓度测定应用的广,也容易得到(也就是可及性很高)。但是,但是我们分离的外泌体,因获取样本的不一致,每种样本中杂蛋白的含量不尽相同,同时分离方法也不一定相同,这就导致我们很难确定蛋白量与外泌体量的对应关系。所以,我们这些外泌体研究者就在两难之间不断横跳。为了解决这些困境,维思克思生物科技提供了整套外泌体鉴定技术服务、外泌体分离、示踪、保存、游离染料清qing除、蛋白定量、脂质定量、核酸定量等系列产品。脐带间充质胞外囊泡研究工具外泌体研究工具常温运输设计,无需冷链物流,降低运输成本与风险。

外泌体表征系列产品线目前外泌体缺乏有效的定量和表征方法,单一的检测技术都有其局限性。维思克思全新系列产品—外泌体表征与定量试剂盒,该系列产品可对现有单一表征与定量方法进行补充,通过多维度对分离出的外泌体进行评估,使实验数据更加科学、准确。01BCA蛋白定量试剂盒(WSR0022),具有灵敏度高、显色速度快、线性范围广的优势,可高效快速实现蛋白定量。02脂质定量试剂盒(WSR0028/WSR0028-2),现有的脂质定量方法大都需要昂贵的仪器,本产品可代替大型仪器,实现小成本快速检测,具有灵敏度高、操作简便、线性范围广等优势。03外泌体RNAQC试剂盒(WSR0013-1),经大量研究分析,筛选出2个阳性外泌体RNA靶标和1个阴性靶标,用于表征RNA质量。04外泌体蛋白标志物鉴定试剂盒(WSR0030),针对外泌体标志蛋白CD9、CD81、TSG101、Calnexin检测而研发的一款方便高效的试剂盒产品,可监测实验体系并准确检测到外泌体中的以上蛋白。05外泌体RNA定量试剂盒(WSR0039),检测线性范围是0-25ng,比较低检测限可至0.2ng,灵敏度高。
外泌体RNA研究的正确打开方式外泌体中有许多货物,包含蛋白质、脂质、糖、代谢物和核酸等,从论文发表数量统计来看,外泌体发挥功能的分子机制研究中RNA占比是比较高的。然而外泌体与组织或细胞RNA相比,在提取和质控上差异较大,不能延用目前主流的产品和技术;同时,外泌体RNA质量控制等也缺乏统一的标准化方案,这些因素将阻碍外泌体RNA的研究。外泌体与细胞RNA相比,有一些差异:1.有来自供体细胞或周围环境RNA的污染;2.外泌体RNA非常微量;3.外泌体RNA中小RNA含量比较高;4.常规的RNA质控方法不适用。综上,对外泌体RNA研究人员,需要选择种高特异、高回收的外泌体分离或RNA提取方法,配合严谨的外泌体RNA质控方法,才能呈现出良好的、准确的、严谨的研究数据和科学结论。针对以上问题,维思克思推荐使用外泌体RNA提取试剂盒(WSR0004-3)、氯仿替代物(WZ13)、外泌体RNA质控试剂盒(WSR0013-1)、外泌体RNA定量试剂盒(WSR0039)。外泌体研究工具主要技术自主研发,持续迭代升级,提升研究价值。

外泌体表征与定量难在什么地方?又该怎么做?我们拜访过很多外泌体研究工作者,其中谈到多的是外泌体难以分离,分离后的外泌体不好定量,定量的外泌体数据是否准确等问题。03如何表征考虑到外泌体中其他杂质对定量检测的影响,建议先进行外泌体纯度表征,确保外泌体纯度在合理范围内,再进行外泌体定量。外泌体纯度表征可以用颗粒数/总蛋白、总蛋白/总脂质、颗粒数/总脂质、颗粒数/总核酸、总蛋白/总核酸等,从多个维度来评估外泌体纯度。04如何定量外泌体发挥功能与其所载货物相关,对外泌体定量可以考虑检测外泌体中某些分子来评估。如某些蛋白标志、脂质、核酸、糖类等分子。针对外泌体表征与定量此类问题,维思克思不断尝试,经多次验证终推出了外泌体表征与定量一系列产品。具体产品包括:BCA蛋白定量试剂盒、外泌体脂质定量试剂盒、外泌体核酸定量试剂盒、外泌体检测抗体、外泌体RNAQC试剂盒、外泌体RNA定量试剂盒。外泌体研究工具标准化操作流程,新手也能快速上手,降低培训成本。铁皮石斛Extracellular Vesicles标志物
外泌体研究工具自动化数据分析兼容,适配主流软件,提升分析效率。细胞培养上清sEVs保存
沉淀法外泌体分离试剂盒经典、操作简便的外泌体分离方法!假如你没有超速离心机,假如对提取出的外泌体中含有透明质酸等多糖而头疼不已,那你一定要来试试这款沉淀法分离试剂盒。WSR0026是一款沉淀法外泌体分离试剂盒,可用于多种样本的外泌体分离,具有操作简便、分离速度快和外泌体回收率高等特点。分离的外泌体可用于WB分析、NTA或纳米流式粒径分析、电镜检测、组学研究、细胞和动物功能研究等。使用方法:需要将沉淀试剂加入到样本中孵育,然后高速离心即可得到外泌体。产品优势:适用范围广,血浆、血清等复杂样本和细胞上清、尿液等简单样都适用;回收率高,相较于其他方法,获取的外泌体浓度高;操作简便,不需特殊设备,操作简便;高通量,可同时处理多个样本。产品信息:WisExoExosomeIsolationKit(Precipitation)(WSR0026)。细胞培养上清sEVs保存
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