外泌体表征与定量难在什么地方?又该怎么做?我们拜访过很多外泌体研究工作者,其中谈到多的是外泌体难以分离,分离后的外泌体不好定量,定量的外泌体数据是否准确等问题。03如何表征考虑到外泌体中其他杂质对定量检测的影响,建议先进行外泌体纯度表征,确保外泌体纯度在合理范围内,再进行外泌体定量。外泌体纯度表征可以用颗粒数/总蛋白、总蛋白/总脂质、颗粒数/总脂质、颗粒数/总核酸、总蛋白/总核酸等,从多个维度来评估外泌体纯度。04如何定量外泌体发挥功能与其所载货物相关,对外泌体定量可以考虑检测外泌体中某些分子来评估。如某些蛋白标志、脂质、核酸、糖类等分子。针对外泌体表征与定量此类问题,维思克思不断尝试,经多次验证终推出了外泌体表征与定量一系列产品。具体产品包括:BCA蛋白定量试剂盒、外泌体脂质定量试剂盒、外泌体核酸定量试剂盒、外泌体检测抗体、外泌体RNAQC试剂盒、外泌体RNA定量试剂盒。外泌体研究工具一体化实验方案,从提取到分析全覆盖,降低综合投入。牛奶胞外囊泡研究工具

外泌体研究常见问题解答72.哪些标记物可用于外泌体表征?检测膜结合或膜相关蛋白,以验证膜的存在。许多外泌体中发现了CD63、CD81和CD9等。然而检测到至少2种不同细胞系释放CD9阴性的外泌体(Jurkat和几种B细胞淋巴瘤细胞)。通常检测CD9、CD81和CD63以验证我们的制剂中是否存在膜。同样重要的是需要确定来自细胞器的污染囊泡水平:ER:热休克蛋白90B1,钙内;高尔基:GM130;线粒体:细胞色素C;细胞核:组蛋白。外泌体分子组成因细胞来源而异。虽然这些单个分子类别的测量可用于估计外泌体丰度,但这些值不一定与外泌体浓度完全相关,也不存在跨EV源样本的普遍性;因此,不应将其作为的外泌体浓度测量方法。不同原理外泌体表征方法的测量值不太可能有相同偏差;例如,光学与非光学方法测量的外泌体直径。由于许多外泌体表征方法不是特异性的,就是无法检测所有的外泌体。植物和中草药囊泡目前公认的特异性蛋白标志物,据多篇文献报道TET-8很可能是植物囊泡的潜在蛋白标志物。细菌的特异性蛋白标志物,脂多糖(革兰氏阴性菌)、脂胞壁酸质(革兰氏阳性菌)和分枝杆菌脂质。积雪草胞外囊泡原料外泌体研究工具梯度规格选择,满足不同实验规模,成本可控性强。

外泌体研究常见问题解答11.外泌体是什么?通常,外泌体被定义为约1.13-1.19g/mL的囊泡(基于密度梯度离心),预期尺寸为30–150nm(基于电镜分析)。由活细胞分泌到细胞外环境的膜性小囊泡,是细胞间信息传递的重要载体,参与细胞间相互作用。几乎所有类型的细胞,都可以产生并释放外泌体。根据不同生物来源分类,外泌体分为动物细胞外泌体、植物外泌体、微生物外泌体。动物细胞来源的外泌体也可以通过其表面蛋白标记物来定义和鉴定,这些标记物包括:四跨肽(CD63、CD81、CD9)和其他类似ALIX、TSG101等标记物。目前没有合适的工具,也没有足够的知识来对外泌体做出明确而简单的定义,将其与其他微/纳米囊泡区分开。
外泌体研究常见问题解答47.外泌体中是否存在18SmRNA?通过测序和qPCR分析了外泌体RNA的含量,这些囊泡肯定包括一些18sRNA。早期的论文具有误导性,一个团队声称外泌体是miRNA和mRNA阴性的。事实上,外泌体包含核糖体RNA、tRNA和许多非编码RNA,并且很大一部分miRNA实际上与蛋白质(例如Ago2)相关,而不是外泌体。8.外泌体研究的困难是什么?(1)外泌体异质性,包括来源异质性、大小异质性、成分异质性等;(2)高纯度的外泌体获取;(3)外泌体鉴定表征;(4)外泌体保存。外泌体研究工具常温运输设计,无需冷链物流,降低运输成本与风险。

外泌体标记真的只能用PKH和DiR吗?外泌体作为近几年的“科研新贵”,可谓是红极一时。由于它们具有独特的迁移、靶向和选择性内化进入特定细胞的能力,是非常有前途的递送载体。然而,目前在外泌体的示踪研究和应用上还存在一些难点:难点一:目前对于胞外囊泡的标记方法有很多种,包括亲脂性的染料(如:PKH、Dil等),这些染料与外泌体膜不是共价结合,而是通过疏水相互作用短暂结合在一起的。在后续的细胞摄取时,会出现示踪染料在不同膜结构或脂溶性物质间发生不断解离和结合的现象,从而影响结果的准确性。ps:分离的外泌体中也会存在一些脂质,也会与示踪试剂结合。难点二:目前外泌体等胞外囊泡有一部分的归宿是在溶酶体,而溶酶体的酸性环境,绝大多数外泌体示踪染料发出的荧光都会淬灭,那么这一部分外泌体的去向就难以检测到。该外泌体示踪试剂盒来自维思克思生物科技,是该公司两项发明专利转化而来,对比其他染色方法,该探针具有低背景、高效率、强耐酸的优势!产品信息:ExosomeWisTracker-IIKit(WSR0001-2)。外泌体研究工具高效生产周期,快速响应订单,满足紧急实验需求。铁皮石斛Exosome厂家批发
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外泌体RNA定量试剂盒外泌体的组成复杂,不仅包含脂质和蛋白质,RNA也是其组成部分。从目前文献报道统计结果来看,RNA是外泌体发挥功能的主要物质。研究外泌体RNA组成和含量具有重要意义。从原理上来说,既然蛋白浓度可以一直作为外泌体定量和表征的重要指标。那么用RNA来对外泌体进行定量和表征也是非常可行的。外泌体中包含RNA分子,其在细胞通讯、疾病发展等方面具有重要的研究和应用价值。但目前外泌体缺乏有效的定量和表征方法,单一的检测技术都有其局限性。WSR0039不需提取外泌体RNA,直接检测微量RNA含量。具有操作简便,灵敏度高,线性范围广,易于检测等特点。该试剂盒的检测线性范围是0-25ng,比较低检测限可至0.2ng。应用范围:外泌体RNA定量、外泌体表征产品信息:ExosomalRNAQuantificationKit(Fluorometric)(WSR0039)。牛奶胞外囊泡研究工具
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