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外泌体研究常见问题解答35.CD9或CD81等是否对外泌体起源具有特异性？目前，对于一般的外泌体标记物还没有达成共识。研究界目前的建议是结合检测许多膜结合或膜相关蛋白，以验证膜的存在。靶点CD63和CD81存在于许多不同的外泌体制剂中，CD9也是如此。然而，检测到至少2种不同的细胞系释放CD9阴性的外泌体（Jurkat细胞和几种B细胞淋巴瘤细胞）。同样重要的是，通过对已知在ER、高尔基体或细胞核等隔室中表达的标记物进行染色，来证明不存在污染性囊泡。同样重要的是，用相同的标记物来表征宿主细胞。6.外泌体中是否包含DNA？一般认为外泌体中不包含DNA，或包含少量线粒体DNA。因为外泌体在胞质中形成与包裹货物，而在胞质中存在少量降解的线粒体DNA。目前有一些研究发现，在外泌体的表面，称之为“corona”，中文叫“冠“或”晕“，在外泌体分泌到细胞外后，会吸附微量的游离DNA。外泌体研究工具浓缩型试剂配方，同等实验需求用量更少，降低长期使用成本。柠檬Extracellular Vesicles转录组

外泌体研究常见问题解答134.当我的Westerns似乎不起作用时，我该怎么办？这有几个典型的原因：（1）添加的样本量不足。外泌体可能含有相当少量的蛋白质货物。对于初始实验，我们建议添加尽可能多的样本。（2）抗体不是比较好的。我们建议测试2-3家制造商的抗体（如抗CD63或其他外泌体标记物），仔细检查推荐的浓度。此外，它们比较好是新鲜使用，并且需要妥善储存。（3）根据外泌体表面标记，某些凝胶条件可能对靶抗体更为优化（例如还原/非还原和变性/非变性）。我们建议与制造商和外泌体社区核实您所针对的特异性标记物和您所使用的特异性抗体的推荐条件。（4）一般Westerns技术。Western可能很棘手，我们建议使用阳性对照进行初步测试，以确保整个工作流程正常运行。任何蛋白质或抗体都可以使用，只要它们满足您需要的条件（例如变性与非变性）。此外，在挑选蛋白质时，尽量避开样本中浓度非常高或非常低的蛋白质，以防止印迹过载或完全没有信号。天然胞外囊泡贴牌外泌体研究工具优化生产工艺，降低能源消耗，提供绿色环保选择。

间充质干细胞外泌体培养基维思克思推出的重磅产品是什么呢？一句话总结优点:无血清、无异源动物成分、化学成分限定、细胞倍增时间短以及外泌体产量高。本品为化学成分限定培养基，不含血清和血清替代物，无动物源组分，使用过程中也无需添加血清或血清替代物；本品主要含有氨基酸、维生素、无机盐、白蛋白、胰岛素和微量元素等。可用于多种来源的人间充质干细胞传代培养，如骨髓间充质干细胞（BM-hMSC）、脐带间充质干细胞（UCM-hMSC）。产品优势：质量稳定，无外泌体成分影响，细胞培养和外泌体生产的重复性强；外泌体产量高，外泌体产量高达1E+13Particles/L（3D培养）；重复性好，培养基批次间一致性，成分明确，利于细胞培养过程外泌体研究；细胞倍增时间短，1:3传代，需2-3天即可进行下一次传代；研究范围广，用于多种干细胞外泌体规模生产，外泌体功能研究，外泌体改造等。产品信息：NovMSCsExosomeSFMediumV2（WSC0008-2）。

外泌体RNA质控解决方案当你小心翼翼将微量样本、花费大量时间提取出外泌体RNA后,还在苦恼RNA质量无法测定？好不容易进行定量检测时，你或许又会出现260/280值、260/230值较佳，但RNA浓度却又极低？拜托！下次请一定要试试这款RNA质控试剂盒！RNA质控原来如此简单！外泌体RNAQC试剂盒是全球、拥有自主知识产权、创新式外泌体表征方法的外泌体RNA质控试剂盒!本产品是将外泌体RNA反转后，再使用SYBRGreenI嵌合荧光法qPCR的外泌体RNA质控试剂盒。经过大量研究分析，筛选出2个阳性外泌体RNA靶标（QCAssayA和B是阳性RNA靶标的扩增引物）和1个阴性外泌体RNA靶标（QCAssayC是阴性RNA靶标的扩增引物），用于表征外泌体RNA的质量。本产品可以对扩增产物进行实时检测，显著提高了检测灵敏度，并省略了PCR反应后的电泳步骤，非常适合于外泌体RNA的检测。产品信息：ExosomalRNAQCKitV1（WSR0013-1）。外泌体研究工具成熟技术体系，快速解决实验难题，降低研发周期成本。

外泌体研究常见问题解答61.如何鉴定提取出来的外泌体？根据MISEV2023，鉴定外泌体首先需要通过WB来鉴定细胞外囊泡的标志蛋白是否存在于样品中，通过电子显微镜来观察样品中细胞外囊泡的形态特征，通过NTA等手段来分析样品中细胞外囊泡的群体特征（粒子浓度、直径分布等）。一般从外泌体形态、外泌体粒径和外泌体标志物来鉴定。（1）鉴定外泌体形态：通常使用透射电镜检测（TEM）；（2）鉴定外泌体粒径（大小）和浓度：可以使用纳米颗粒跟踪分析（NTA）、纳米流式、纳米库尔特粒度仪检测；（3）鉴定动物细胞外泌体标志物：通常使用WB检测外泌体标志蛋白（CD63、CD9、CD81、TSG101、Alix等），按国际细胞外囊泡协会的建议为检测3个阳性（一般选择2个表面标志，1个内部标志）和1个阴性指标（Calnexin或GM130）。外泌体研究工具原厂直供模式，省去中间商环节，保障产品质量稳定。高纯度ExosomeNTA粒径检测

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外泌体研究常见问题解答22.外泌体形成的机制是什么？外泌体通常被描述为通过多囊泡体与质膜融合产生的内吞途径的囊泡，通过多泡体分泌到细胞外的小囊泡。它们是细胞分泌的一个更大的囊泡家族的一部分，包括微泡、外泌体和脱落颗粒，这些囊泡（除外泌体外）来源于质膜的直接出芽。由于这些实体的大小、密度和总体组成的相似性存在重叠，使用目前可用的技术和仪器将其分离是极具挑战性的。3.外泌体和微囊泡的区别是什么？外泌体和微囊泡的区别在于其产生的方式不同。从晚期胞内体分泌的细胞外囊泡称为外泌体，从细胞膜直接出芽产生的细胞外囊泡称为微囊泡。二者的大小也有所不同，外泌体的粒子直径约40-100nm，微囊泡的粒子直径约100-1000nm，但有报道发现也存在小直径的微囊泡，所以无法从粒子大小来明确区分二者。4.外泌体是由什么组成的？外泌体是脂质膜包裹的，含有蛋白质、脂质、RNA和其他代谢物的微小囊泡（30–150nm）。外泌体的货物和表面蛋白可能有很大差异，不同的细胞类型可以分泌不同的外泌体。柠檬Extracellular Vesicles转录组

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