外泌体研究常见问题解答105.外泌体研究,应选用血浆还是血清?血清是血液凝固之后收集的液体,所以其中少了纤维蛋白原,凝血因子,以及多了很多凝血产物。纤维蛋白原可转化为纤维蛋白,具有凝血功能。在凝血过程中血小板会分泌大量的外泌体,有研究发现血清中有接近50%的外泌体来自额外的分泌。血浆=血液-血细胞血清=血浆-纤维蛋白原-凝血因子所以一般实验选择血浆,在特殊情况下,如研究与血小板相关的疾病的时候,当然是血清更适合。6.外泌体血液样本提取需注意事项?全血在长时间放置,冷冻、离心等会发生溶血现象,此时不建议分离外泌体。7.细胞培养去除血清源外泌体?a.将细胞培养用的血清通过100000g超速离心10h,去除血清外泌体;b.选择无血清培养基进行细胞培养。c.使用商业化的无外泌体胎牛血清(WSC0020)8.如何提取组织细胞外泌体?将组织剪成小块,在无血清培养基中培养12h;转移至离心管中,4℃3000g离心20min去除培养液中杂质和细胞碎片,将上清液用0.45μm过滤,接着用0.2μm过滤,然后选择合适的外泌体分离方法。外泌体研究工具标准化操作流程,新手也能快速上手,降低培训成本。组织sEVsCRO

维思克思的外泌体浓缩方案01外泌体浓缩试剂。外泌体浓缩试剂可用于大体积外泌体样本的处理,可以高通量、快速实现大体积外泌体样本(如细胞培养上清、尿液等)的浓缩,浓缩后的样本后处理后可进行外泌体的分离纯化、RNA提取、蛋白提取等后续实验。该浓缩试剂不仅操作十分简便、节省时间,而且浓缩效果好,外泌体纯度高。常用于细胞培养上清与尿液的外泌体样本浓缩。一次可至少处理500ml样本。使用方法1.样本预处理样本离心处理三次,破碎去除细胞及大体积颗粒。2.大体积外泌体样本浓缩预处理后的样品按照体积比4:1的比例加入浓缩液(为保证后续实验效果,推荐样本体积不小于24ml),室温共孵育30min。离心,弃上清。3.外泌体样本重悬向上述沉淀中加入1ml无菌PBS,移液器轻柔吹打溶解后,可进行后续实验。产品特点操作简单直接混入外泌体样本即可,操作简便。浓缩倍数高可浓缩50倍。适用样本范围广兼容多种细胞培养上清和尿液样本。兼容下游应用广浓缩后的样本可进行外泌体的分离纯化、RNA提取、蛋白提取等后续实验。高效细胞外囊泡NTA粒径检测外泌体研究工具主要技术自主研发,持续迭代升级,提升研究价值。

外泌体研究常见问题解答47.外泌体中是否存在18SmRNA?通过测序和qPCR分析了外泌体RNA的含量,这些囊泡肯定包括一些18sRNA。早期的论文具有误导性,一个团队声称外泌体是miRNA和mRNA阴性的。事实上,外泌体包含核糖体RNA、tRNA和许多非编码RNA,并且很大一部分miRNA实际上与蛋白质(例如Ago2)相关,而不是外泌体。8.外泌体研究的困难是什么?(1)外泌体异质性,包括来源异质性、大小异质性、成分异质性等;(2)高纯度的外泌体获取;(3)外泌体鉴定表征;(4)外泌体保存。
外泌体研究常见问题解答22.外泌体形成的机制是什么?外泌体通常被描述为通过多囊泡体与质膜融合产生的内吞途径的囊泡,通过多泡体分泌到细胞外的小囊泡。它们是细胞分泌的一个更大的囊泡家族的一部分,包括微泡、外泌体和脱落颗粒,这些囊泡(除外泌体外)来源于质膜的直接出芽。由于这些实体的大小、密度和总体组成的相似性存在重叠,使用目前可用的技术和仪器将其分离是极具挑战性的。3.外泌体和微囊泡的区别是什么?外泌体和微囊泡的区别在于其产生的方式不同。从晚期胞内体分泌的细胞外囊泡称为外泌体,从细胞膜直接出芽产生的细胞外囊泡称为微囊泡。二者的大小也有所不同,外泌体的粒子直径约40-100nm,微囊泡的粒子直径约100-1000nm,但有报道发现也存在小直径的微囊泡,所以无法从粒子大小来明确区分二者。4.外泌体是由什么组成的?外泌体是脂质膜包裹的,含有蛋白质、脂质、RNA和其他代谢物的微小囊泡(30–150nm)。外泌体的货物和表面蛋白可能有很大差异,不同的细胞类型可以分泌不同的外泌体。外泌体研究工具批量采购优惠政策,阶梯式价格体系,量大成本更优。

外泌体分离提取方法大全外泌体快速、简便、高纯度、高回收率的分离方法是在大规模应用的前提。维思克思编制了外泌体分离方法大全:亲和磁珠法分离(WSR0002-2)能特异性捕获外泌体,实现高纯度、高回收率外泌体分离。具有操作简便、高纯度和高回收率等优点,特别适用于血浆、血清等复杂样本中的外泌体分离。凝胶排阻色谱法分离(WSR0003)基于分子排阻色谱(SEC)原理,根据被分离组分分子大小差异进行外泌体的分离,可以获取分子大小均一、高纯度的外泌体。特别适用于大体积样本中的外泌体分离。SEC离心法分离(WSP0015/WSP0016)是离心柱式的外泌体分离产品,离心柱中装填的介质能无差别地吸附杂质而不结合外泌体,实现超快速、高收率的外泌体分离。沉淀法分离(WSR0026/WSR0037)是一款沉淀法外泌体分离试剂盒,可用于多种样本的外泌体分离,具有操作简便、分离速度快和外泌体回收率高等特点。离子交换法分离(WSR0031)适用于10-30mL细胞培养上清样本中外泌体的分离纯化,基于阴离子交换层析原理,特异性吸附样本中带负电的外泌体,然后高效洗脱,实现外泌体的浓缩和分离。外泌体研究工具区域化仓储配送,缩短到货时间,保障实验连续性。生姜EVs标准品
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