苹果EVs靶向修饰

外泌体研究常见问题解答122.做外泌体研究，需要多少量的蛋白质？不建议过多关注蛋白质浓度，我们的经验，蛋白质测量与制剂中外泌体的数量之间几乎没有相关性。蛋白量不应作为制剂中外泌体数量的估计。外泌体与蛋白量并不总是一个很好的相关性。我们主要使用细胞培养基和尿液作为起始样本，即使在这种“简单”的溶液中（至少与血浆/血清相比），相关性也不是很好。这就是为什么我们开始关注细胞培养生长条件，并标准化外泌体收获条件，以便在正确的时间收获并提高系统的可重复性。血浆和血清中蛋白质浓度和外泌体含量之间的相关性会更小。许多研究人员使用纳米颗粒跟踪分析（NTA）来测量囊泡的数量和大小分布，但这种方法不能提供相同大小范围内任何污染囊泡的信息。因此，电子显微镜应始终与这种方法相结合。检查污染囊泡存在的一种方法可能是进行蛋白质印迹以检测蛋白质，如gp96，一种ER相关蛋白。3.外泌体WB鉴定时，选择哪个内参蛋白？无内参蛋白。外泌体包裹的蛋白具有随机性，同时不同细胞分泌的外泌体具有异质性，所以外泌体中没有哪种蛋白含量是恒定的，也就没有所谓的内参蛋白了。目前的外泌体WB鉴定，只能用于定性检测。外泌体研究工具标准化套装，涵盖提取到检测全流程，提升实验效率。苹果EVs靶向修饰

大体积外泌体样本量分离方法总结大体积外泌体样本在浓缩后根据不同应用，需衔接不同的外泌体分离方法。维思克思总结出现在常用、简便、效果比较好的三种方法。SEC重力柱是基于分子排阻色谱原理，根据被分离组分分子大小差异进行外泌体的分离。具有操作简便、高纯度和高回收率等优点，特别适用于大体积样本中的外泌体分离。分离的外泌体可用于WB分析、NTA或纳米流式粒径分析、电镜检测、组学研究、细胞和动物功能研究等。（WSR0003）SEC离心柱是离心柱式的外泌体分离产品，离心柱中装填的介质能无差别的吸附杂质而不结合外泌体，实现超快速、高收率的外泌体分离。分离的外泌体可用于WB分析、NTA或纳米流式粒径分析、电镜检测、组学研究、细胞和动物功能研究等。（WSP0016）磁珠法外泌体分离试剂盒基于自主研发的均相液体磁珠，能特异性捕获外泌体，实现高纯度、高回收率外泌体分离。具有操作简便、高纯度和高回收率等优点，特别适用于血浆、血清等复杂样本中的外泌体分离。分离的外泌体可用于WB分析、NTA或纳米流式粒径分析、电镜检测、组学研究、细胞和动物功能研究等。（WSR0002-2）高通量Exosome冻干外泌体研究工具定制化组合方案，按需搭配组件，避免功能冗余浪费。

外泌体作为近几年的“科研新贵”，可谓是红极一时。由于它们具有独特的迁移、靶向和选择性内化进入特定细胞的能力，是非常有前途的递送载体。然而，目前在外泌体研究和应用上还存在以下痛点：痛点一：由于目前对这些内源性囊泡了解还不够深入，尤其是在体内行为方面上，将外泌体治zhi疗转诊至临床故而仍为一大难点。体内追踪外泌体可以提供有关其生物分布、迁移能力、毒性、生物学的重要知识角色，沟通能力和行动机制。痛点二：目前对于胞外囊泡的标记方法有很多种，包括亲脂性的染料(如PKH系列、Dil系列)，然而这些染料标记方法存在一些不足。维思克思的示踪探针基于两项发明专利，对比其他染色方法，该探针具有低背景、高效率、强耐酸的优势！发明名称：1.一种pH敏感型探针分子及其应用；2.一种探针分子的合成方法。WSR0001-2工作原理为共价方式嵌入外泌体膜结构。当染料结合外泌体膜后，可通过荧光显微镜准确观察到外泌体在细胞内运动与行踪。突出优势：特异性高，无背景干扰；标记效率高，该探针以共价的方式嵌入胞外囊泡的双层膜结构，优于亲脂性染料，避免自组装形成的纳米粒子造成信号干扰。在低pH（酸性）条件下也可显色。

外泌体研究常见问题解答91.外泌体的分离方法有哪些，哪种更好？分离是进行外泌体研究关键的一步，只有选择了合适的方法才能得到理想的实验结果。分离方法包括：超速离心、尺寸排阻、免疫磁珠、聚合物沉淀、亲和磁珠/膜等方法。根据外泌体的大小，密度和表面标志物的不同进行分离，不同提取外泌体方法优劣势比较，受限于篇幅，详细版请联系维思克思生物科技获取。2.细胞培养上清中死细胞对外泌体分离的影响？在细胞凋亡/死亡过程中会释放大量Evs，会混入活细胞分泌的外泌体中，而目前的外泌体分离方法并不能将两者区分开来。所以在收集细胞培养上清样本时，需要保证细胞活率应不小于95%。3.大体积的样本类型，如何分离外泌体？大体积样本，如细胞培养上清、尿液等，可以先浓缩样本（如超滤或外泌体浓缩试剂等），减少样本体积，再使用常规的外泌体分离方法。4.复杂的样本类型，如何分离得到高纯度的外泌体？复杂的样本类型如血清、血浆、奶制品、脑脊液等，含有很多与外泌体在尺寸和密度接近的杂质，常规的外泌体分离方法难以获取高纯度的外泌体，建议使用亲和的外泌体分离方法，如PS亲和、免疫亲和、膜亲和等外泌体分离试剂盒。外泌体研究工具长期合作支持政策，持续技术服务，降低长期合作成本。

外泌体表征与定量难在什么地方？又该怎么做？我们拜访过很多外泌体研究工作者，其中谈到多的是外泌体难以分离，分离后的外泌体不好定量，定量的外泌体数据是否准确等问题。03如何表征考虑到外泌体中其他杂质对定量检测的影响，建议先进行外泌体纯度表征，确保外泌体纯度在合理范围内，再进行外泌体定量。外泌体纯度表征可以用颗粒数/总蛋白、总蛋白/总脂质、颗粒数/总脂质、颗粒数/总核酸、总蛋白/总核酸等，从多个维度来评估外泌体纯度。04如何定量外泌体发挥功能与其所载货物相关，对外泌体定量可以考虑检测外泌体中某些分子来评估。如某些蛋白标志、脂质、核酸、糖类等分子。针对外泌体表征与定量此类问题，维思克思不断尝试，经多次验证终推出了外泌体表征与定量一系列产品。具体产品包括：BCA蛋白定量试剂盒、外泌体脂质定量试剂盒、外泌体核酸定量试剂盒、外泌体检测抗体、外泌体RNAQC试剂盒、外泌体RNA定量试剂盒。外泌体研究工具常温运输设计，无需冷链物流，降低运输成本与风险。玫瑰sEVs荧光染料

外泌体研究工具浓缩型试剂配方，同等实验需求用量更少，降低长期使用成本。苹果EVs靶向修饰

外泌体分离提取方法大全外泌体快速、简便、高纯度、高回收率的分离方法是在大规模应用的前提。维思克思编制了外泌体分离方法大全：亲和磁珠法分离（WSR0002-2）能特异性捕获外泌体，实现高纯度、高回收率外泌体分离。具有操作简便、高纯度和高回收率等优点，特别适用于血浆、血清等复杂样本中的外泌体分离。凝胶排阻色谱法分离（WSR0003）基于分子排阻色谱（SEC）原理，根据被分离组分分子大小差异进行外泌体的分离，可以获取分子大小均一、高纯度的外泌体。特别适用于大体积样本中的外泌体分离。SEC离心法分离（WSP0015/WSP0016）是离心柱式的外泌体分离产品，离心柱中装填的介质能无差别地吸附杂质而不结合外泌体，实现超快速、高收率的外泌体分离。沉淀法分离（WSR0026/WSR0037）是一款沉淀法外泌体分离试剂盒，可用于多种样本的外泌体分离，具有操作简便、分离速度快和外泌体回收率高等特点。离子交换法分离（WSR0031）适用于10-30mL细胞培养上清样本中外泌体的分离纯化，基于阴离子交换层析原理，特异性吸附样本中带负电的外泌体，然后高效洗脱，实现外泌体的浓缩和分离。苹果EVs靶向修饰

维思克思生物科技(武汉)有限公司在同行业领域中，一直处在一个不断锐意进取，不断制造创新的市场高度，多年以来致力于发展富有创新价值理念的产品标准，在湖北省等地区的机械及行业设备中始终保持良好的商业口碑，成绩让我们喜悦，但不会让我们止步，残酷的市场磨炼了我们坚强不屈的意志，和谐温馨的工作环境，富有营养的公司土壤滋养着我们不断开拓创新，勇于进取的无限潜力，维思克思生物科技供应携手大家一起走向共同辉煌的未来，回首过去，我们不会因为取得了一点点成绩而沾沾自喜，相反的是面对竞争越来越激烈的市场氛围，我们更要明确自己的不足，做好迎接新挑战的准备，要不畏困难，激流勇进，以一个更崭新的精神面貌迎接大家，共同走向辉煌回来！