组织sEVs表征

外泌体研究常见问题解答91.外泌体的分离方法有哪些，哪种更好？分离是进行外泌体研究关键的一步，只有选择了合适的方法才能得到理想的实验结果。分离方法包括：超速离心、尺寸排阻、免疫磁珠、聚合物沉淀、亲和磁珠/膜等方法。根据外泌体的大小，密度和表面标志物的不同进行分离，不同提取外泌体方法优劣势比较，受限于篇幅，详细版请联系维思克思生物科技获取。2.细胞培养上清中死细胞对外泌体分离的影响？在细胞凋亡/死亡过程中会释放大量Evs，会混入活细胞分泌的外泌体中，而目前的外泌体分离方法并不能将两者区分开来。所以在收集细胞培养上清样本时，需要保证细胞活率应不小于95%。3.大体积的样本类型，如何分离外泌体？大体积样本，如细胞培养上清、尿液等，可以先浓缩样本（如超滤或外泌体浓缩试剂等），减少样本体积，再使用常规的外泌体分离方法。4.复杂的样本类型，如何分离得到高纯度的外泌体？复杂的样本类型如血清、血浆、奶制品、脑脊液等，含有很多与外泌体在尺寸和密度接近的杂质，常规的外泌体分离方法难以获取高纯度的外泌体，建议使用亲和的外泌体分离方法，如PS亲和、免疫亲和、膜亲和等外泌体分离试剂盒。外泌体研究工具批量采购优惠政策，阶梯式价格体系，量大成本更优。组织sEVs表征

外泌体表征与定量难在什么地方？又该怎么做？我们拜访过很多外泌体研究工作者，其中谈到多的是外泌体难以分离，分离后的外泌体不好定量，定量的外泌体数据是否准确等问题。03如何表征考虑到外泌体中其他杂质对定量检测的影响，建议先进行外泌体纯度表征，确保外泌体纯度在合理范围内，再进行外泌体定量。外泌体纯度表征可以用颗粒数/总蛋白、总蛋白/总脂质、颗粒数/总脂质、颗粒数/总核酸、总蛋白/总核酸等，从多个维度来评估外泌体纯度。04如何定量外泌体发挥功能与其所载货物相关，对外泌体定量可以考虑检测外泌体中某些分子来评估。如某些蛋白标志、脂质、核酸、糖类等分子。针对外泌体表征与定量此类问题，维思克思不断尝试，经多次验证终推出了外泌体表征与定量一系列产品。具体产品包括：BCA蛋白定量试剂盒、外泌体脂质定量试剂盒、外泌体核酸定量试剂盒、外泌体检测抗体、外泌体RNAQC试剂盒、外泌体RNA定量试剂盒。组织sEVs表征外泌体研究工具规模化生产储备，保障供应稳定，应对突发实验需求。

相信大家一直都被一个问题困扰，什么样的外泌体才是好的外泌体呢？采购外泌体时，如何判断外泌体质量？现在，我们对外泌体供应商-维思克思的外泌体WSR0014-1进行测评。咱们来看看高质量的外泌体到底长什么样？一、首先对外泌体进行鉴定。首先要证明是外泌体，那如何证明呢？一般从三大基础表征维度进行分析：形态、粒径分布、外泌体标志蛋白。二、确定外泌体颗粒数与纯度。还需另一重要表征维度外泌体的纯度。在做实验时，怎样考察纯度呢？不同来源的外泌体，因获取样本的不一致，每种样本中杂蛋白的含量不尽相同，同时分离方法也不一定相同，这可能导致不一致的实验结果。外泌体纯度表征可以用颗粒数/蛋白、颗粒数/RNA、蛋白/脂质、脂质/RNA等多个维度来评估外泌体纯度，避免mian单一方法的局限性。备注：脂质浓度用维思克思WSR0028-2测量；RNA浓度用维思克思WSR0039测量。三、评估外泌体的安全性。如果用来做细胞或动物实验，外泌体中含有影响细胞或动物的成分，实验的结果将会令人非常诅丧。这次测评将外泌体的安全性指标进行的评估，包括内外源病毒、细菌、支原体的检测，结果显示安全性指标全部合格。

磁珠法外泌体RNA提取试剂盒。开发一种在质量和得率上合格的外泌体RNA提取方法对外泌体研究非常重要，许多实验室已努力开发这种方法，采用了各种方法，均可供研究人员使用，具有不同程度的实用性。例如，使用基于大小的过滤器开发的试剂盒缺乏外泌体部分的特异性；与过滤器尺寸匹配的任何颗粒都将被其保留，包括细胞碎片、蛋白复合物，甚至血小板和淋巴细胞，这取决于过滤器的尺寸。基于聚合物的沉淀和使用离液盐的直接裂解也缺乏对囊泡的特异性。我们开发了一种基于磁珠的外泌体RNA提取方法，该方法可通过简单且可重复的工作流程分离外泌体并从血浆和血清等样本中提取RNA。与超速离心相比，这种方法可从血浆样本中捕获近100%RNA，RNA产量优于超速离心法。MicroExosomeTotalRNAExtractionKit（WSR0004）分离出的RNA纯度更高、收率相同或更多，对提取的外泌体RNA特异性高于非外泌体RNA。磁珠法能够处理更多的样本量，从而能够检测血清或血浆中的低丰度转录本。提供了一种更快、更标准化的方法来从血清和血浆等生物流体中的外泌体获得可靠的高质量RNA。外泌体研究工具小批量试用装供应，适合前期方法学验证，降低试错成本。

外泌体研究常见问题解答35.CD9或CD81等是否对外泌体起源具有特异性？目前，对于一般的外泌体标记物还没有达成共识。研究界目前的建议是结合检测许多膜结合或膜相关蛋白，以验证膜的存在。靶点CD63和CD81存在于许多不同的外泌体制剂中，CD9也是如此。然而，检测到至少2种不同的细胞系释放CD9阴性的外泌体（Jurkat细胞和几种B细胞淋巴瘤细胞）。同样重要的是，通过对已知在ER、高尔基体或细胞核等隔室中表达的标记物进行染色，来证明不存在污染性囊泡。同样重要的是，用相同的标记物来表征宿主细胞。6.外泌体中是否包含DNA？一般认为外泌体中不包含DNA，或包含少量线粒体DNA。因为外泌体在胞质中形成与包裹货物，而在胞质中存在少量降解的线粒体DNA。目前有一些研究发现，在外泌体的表面，称之为“corona”，中文叫“冠“或”晕“，在外泌体分泌到细胞外后，会吸附微量的游离DNA。外泌体研究工具自动化操作兼容，适配实验室自动化系统，提升工作效率。组织sEVs表征

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外泌体样本量太大怎么办？外泌体来源，几乎所有细胞都可以分泌外泌体。在科研中，如何处理大体积外泌体样本是众多研究者都觉得十分棘手的问题。目前，常用的分离手段包括超速离心法、尺寸排阻法、沉淀法以及免疫亲和法。然而这些分离方法要么只适用于小体积微量样本，要么就是对仪器要求高、操作复杂。与各位研究者分享维思克思的大体积样本处理经验，愿能为各位研究者提供思路。1.外泌体浓缩试剂。外泌体浓缩试剂可用于大体积外泌体样本的处理，可以高通量、快速实现大体积外泌体样本（如细胞培养上清、尿液等）的浓缩，浓缩后的样本后处理后可进行外泌体的分离纯化、RNA提取、蛋白提取等后续实验。2.超滤管超滤。超滤浓缩是一种常用的分离技术，利用超滤膜对组分进行分离。溶液通过超滤膜，利用膜孔的大小选择性，将分子量较大的物质过滤出来，而将分子量较小的物质通过膜孔。以上大体积外泌体样本处理工具，维思克思均有提供。外泌体浓缩试剂以及超滤管在处理大体积样本上具有突出优势。尤其是外泌体浓缩试剂，操作简便，浓缩倍数高，实验体验有较好的评价，推荐指数较高。浓缩后的外泌体分离纯化，维思克思产品线也非常齐全，包括磁珠法、SEC法等。组织sEVs表征

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