玫瑰细胞外囊泡功能研究

外泌体研究常见问题解答119.在分离过程中，外泌体含量会发生变化吗？准备的步骤越少，结果越好。很明显，即使你是一个非常熟练的操作员，将超离作为预富集步骤也会导致囊泡的损失。因此，即使囊泡的纯度很高，也无法控制哪些囊泡在处理过程中的丢失。10.为什么沉淀法或超速离心法提取的外泌体看不到沉淀？这种问题通常有三种可能性：1）使用的样本体积太小或外泌体含量太低。2）使用了不透明的超速离心管，一般来说外泌体产量都比较小，不透明管底很难见到明显沉淀的，可以当作有沉淀，继续往后操作即可。3）使用了粘附性低的耗材。部分角转管壁粘附性很低，沉淀很难富集或沉淀很容易滑落，请圆底离心管离心。11.外泌体和微囊泡可以分开提取吗？外泌体和微囊泡无法明确区分二者，所以无法完全分开。维思克思推荐使用下列简便方法：提取外泌体等粒子直径小的细胞外囊泡时，请选用10000g离心后的上清样品；提取含微囊泡在内的大粒子直径的细胞外囊泡时，首先要回收1200g离心的上清，然后将其10,000g离心分离获得的沉淀用PBS悬浮后作为样品使用。同时提取上述两种细胞外囊泡，请使用1200g离心分离的上清作为样品。外泌体研究工具批量订单快速交付，减少等待时间，保障研究进度。玫瑰细胞外囊泡功能研究

大体积外泌体样本量处理方案大体积外泌体样本在浓缩后根据不同应用，衔接不同的外泌体分离纯化方法，见下文。01外泌体分离纯化对于外泌体的分离纯化，市面上已有许多方法。维思克思总结出常用、简便、效果比较好的三种方法。SEC重力柱基于分子排阻色谱原理，根据被分离组分分子大小差异进行外泌体的分离。具有操作简便、高纯度和高回收率等优点，特别适用于大体积样本中的外泌体分离。SEC离心柱是离心柱式的外泌体分离产品，离心柱中装填的介质能无差别的吸附杂质而不结合外泌体，实现超快速、高收率的外泌体分离。磁珠法外泌体分离试剂盒能特异性捕获外泌体而不吸附杂质，实现高纯度、高回收率外泌体分离。具有操作简便、高纯度和高回收率等优点，特别适用于血浆、血清等复杂样本中的外泌体分离。02外泌体RNA提取在外泌体RNA提取步骤中，常用的是磁珠法和沉淀法。磁珠法外泌体总RNA提取试剂盒能特异性捕获外泌体，实现高纯度、高回收率提取，特别适用于血浆、血清等复杂样本RNA提取。沉淀法外泌体总RNA提取试剂盒，于外泌体微量RNA的提取，具有提取效率高、提取的RNA种类多、回收的miRNA含量高等特点。黄芪外泌体sEVsOEM外泌体研究工具适配多种检测设备，无需专门的仪器，降低设备投入。

外泌体定量与表征的又一有效补充！外泌体脂质脂质定量试剂盒（比色法）外泌体由磷脂双分子层包裹，包含脂质等代谢物。目前外泌体缺乏有效的定量和表征方法，单一的检测技术都有其局限性。维思克思的WSR0028可用于外泌体的脂质定量，既可测定外泌体的脂质含量，为脂质研究提供有力工具，又能作为外泌体定量和表征方法的有效补充。现有的脂质定量方法大都需要昂贵的仪器，例如HPLC仪器、光散射检测技术等。本产品可替代这些仪器，实现小成本快速检测！产品特点：灵敏度高，检测脂质浓度下限达到5μg/mL。操作简便，需三步即可检测出脂质含量，整个操作时间不超过40min，节约时间。线性范围广，5-1000μg/mL浓度范围内有较好的线性范围。产品信息：ExosomalLipidQuantificationKit(Colorimetric)（WSR0028）。

维思克思的外泌体浓缩方案-超滤管02超滤管超滤。超滤浓缩是一种常用的分离技术，利用超滤膜对组分进行分离。溶液通过超滤膜，利用膜孔的大小选择性，将分子量较大的物质过滤出来，而将分子量较小的物质通过膜孔。本产品基于低蛋白吸附的过滤膜，根据膜的大小规格以达到样本浓缩或分离的效果。具有操作简单，离心时间短，回收率高等特点。可用于生物样品浓缩，分离，蛋白除杂等领域。使用方法：1.样本澄清通过膜过滤样本，使样本澄清，去除杂质。2.超滤管平衡超滤管中加入适量PBS，在转子中离心。移去装置底部PBS。3.样品超滤向超滤管中加入5ml样品，离心。弃除收集管中液体，回收浓缩样品。外泌体研究工具稳定批次生产，确保实验重复性，降低结果波动风险。

外泌体作为近几年的“科研新贵”，可谓是红极一时。由于它们具有独特的迁移、靶向和选择性内化进入特定细胞的能力，是非常有前途的递送载体。然而，目前在外泌体研究和应用上还存在以下痛点：痛点一：由于目前对这些内源性囊泡了解还不够深入，尤其是在体内行为方面上，将外泌体治zhi疗转诊至临床故而仍为一大难点。体内追踪外泌体可以提供有关其生物分布、迁移能力、毒性、生物学的重要知识角色，沟通能力和行动机制。痛点二：目前对于胞外囊泡的标记方法有很多种，包括亲脂性的染料(如PKH系列、Dil系列)，然而这些染料标记方法存在一些不足。维思克思的示踪探针基于两项发明专利，对比其他染色方法，该探针具有低背景、高效率、强耐酸的优势！发明名称：1.一种pH敏感型探针分子及其应用；2.一种探针分子的合成方法。WSR0001-2工作原理为共价方式嵌入外泌体膜结构。当染料结合外泌体膜后，可通过荧光显微镜准确观察到外泌体在细胞内运动与行踪。突出优势：特异性高，无背景干扰；标记效率高，该探针以共价的方式嵌入胞外囊泡的双层膜结构，优于亲脂性染料，避免自组装形成的纳米粒子造成信号干扰。在低pH（酸性）条件下也可显色。外泌体研究工具常温保存设计，无需特殊冷藏设备，降低实验室储存成本。维思克思sEVs临床试验

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外泌体研究常见问题解答105.外泌体研究，应选用血浆还是血清？血清是血液凝固之后收集的液体，所以其中少了纤维蛋白原，凝血因子，以及多了很多凝血产物。纤维蛋白原可转化为纤维蛋白，具有凝血功能。在凝血过程中血小板会分泌大量的外泌体，有研究发现血清中有接近50%的外泌体来自额外的分泌。血浆=血液-血细胞血清=血浆-纤维蛋白原-凝血因子所以一般实验选择血浆，在特殊情况下，如研究与血小板相关的疾病的时候，当然是血清更适合。6.外泌体血液样本提取需注意事项？全血在长时间放置，冷冻、离心等会发生溶血现象，此时不建议分离外泌体。7.细胞培养去除血清源外泌体？a.将细胞培养用的血清通过100000g超速离心10h，去除血清外泌体；b.选择无血清培养基进行细胞培养。c.使用商业化的无外泌体胎牛血清（WSC0020）8.如何提取组织细胞外泌体？将组织剪成小块，在无血清培养基中培养12h；转移至离心管中，4℃3000g离心20min去除培养液中杂质和细胞碎片，将上清液用0.45μm过滤，接着用0.2μm过滤，然后选择合适的外泌体分离方法。玫瑰细胞外囊泡功能研究

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