大体积外泌体样本量处理方案大体积外泌体样本在浓缩后根据不同应用,衔接不同的外泌体分离纯化方法,见下文。01外泌体分离纯化对于外泌体的分离纯化,市面上已有许多方法。维思克思总结出常用、简便、效果比较好的三种方法。SEC重力柱基于分子排阻色谱原理,根据被分离组分分子大小差异进行外泌体的分离。具有操作简便、高纯度和高回收率等优点,特别适用于大体积样本中的外泌体分离。SEC离心柱是离心柱式的外泌体分离产品,离心柱中装填的介质能无差别的吸附杂质而不结合外泌体,实现超快速、高收率的外泌体分离。磁珠法外泌体分离试剂盒能特异性捕获外泌体而不吸附杂质,实现高纯度、高回收率外泌体分离。具有操作简便、高纯度和高回收率等优点,特别适用于血浆、血清等复杂样本中的外泌体分离。02外泌体RNA提取在外泌体RNA提取步骤中,常用的是磁珠法和沉淀法。磁珠法外泌体总RNA提取试剂盒能特异性捕获外泌体,实现高纯度、高回收率提取,特别适用于血浆、血清等复杂样本RNA提取。沉淀法外泌体总RNA提取试剂盒,于外泌体微量RNA的提取,具有提取效率高、提取的RNA种类多、回收的miRNA含量高等特点。外泌体研究工具主要技术自主研发,持续迭代升级,提升研究价值。中药ExosomeCRO

外泌体样本量太大怎么办?外泌体来源,几乎所有细胞都可以分泌外泌体。在科研中,如何处理大体积外泌体样本是众多研究者都觉得十分棘手的问题。目前,常用的分离手段包括超速离心法、尺寸排阻法、沉淀法以及免疫亲和法。然而这些分离方法要么只适用于小体积微量样本,要么就是对仪器要求高、操作复杂。与各位研究者分享维思克思的大体积样本处理经验,愿能为各位研究者提供思路。1.外泌体浓缩试剂。外泌体浓缩试剂可用于大体积外泌体样本的处理,可以高通量、快速实现大体积外泌体样本(如细胞培养上清、尿液等)的浓缩,浓缩后的样本后处理后可进行外泌体的分离纯化、RNA提取、蛋白提取等后续实验。2.超滤管超滤。超滤浓缩是一种常用的分离技术,利用超滤膜对组分进行分离。溶液通过超滤膜,利用膜孔的大小选择性,将分子量较大的物质过滤出来,而将分子量较小的物质通过膜孔。以上大体积外泌体样本处理工具,维思克思均有提供。外泌体浓缩试剂以及超滤管在处理大体积样本上具有突出优势。尤其是外泌体浓缩试剂,操作简便,浓缩倍数高,实验体验有较好的评价,推荐指数较高。浓缩后的外泌体分离纯化,维思克思产品线也非常齐全,包括磁珠法、SEC法等。生姜细胞外囊泡功能研究外泌体研究工具通用型适配设计,兼容多种实验平台,降低设备投入成本。

间充质干细胞外泌体培养基维思克思推出的重磅产品是什么呢?一句话总结优点:无血清、无异源动物成分、化学成分限定、细胞倍增时间短以及外泌体产量高。本品为化学成分限定培养基,不含血清和血清替代物,无动物源组分,使用过程中也无需添加血清或血清替代物;本品主要含有氨基酸、维生素、无机盐、白蛋白、胰岛素和微量元素等。可用于多种来源的人间充质干细胞传代培养,如骨髓间充质干细胞(BM-hMSC)、脐带间充质干细胞(UCM-hMSC)。产品优势:质量稳定,无外泌体成分影响,细胞培养和外泌体生产的重复性强;外泌体产量高,外泌体产量高达1E+13Particles/L(3D培养);重复性好,培养基批次间一致性,成分明确,利于细胞培养过程外泌体研究;细胞倍增时间短,1:3传代,需2-3天即可进行下一次传代;研究范围广,用于多种干细胞外泌体规模生产,外泌体功能研究,外泌体改造等。产品信息:NovMSCsExosomeSFMediumV2(WSC0008-2)。
相信大家一直都被一个问题困扰,什么样的外泌体才是好的外泌体呢?采购外泌体时,如何判断外泌体质量?现在,我们对外泌体供应商-维思克思的外泌体WSR0014-1进行测评。咱们来看看高质量的外泌体到底长什么样?一、首先对外泌体进行鉴定。首先要证明是外泌体,那如何证明呢?一般从三大基础表征维度进行分析:形态、粒径分布、外泌体标志蛋白。二、确定外泌体颗粒数与纯度。还需另一重要表征维度外泌体的纯度。在做实验时,怎样考察纯度呢?不同来源的外泌体,因获取样本的不一致,每种样本中杂蛋白的含量不尽相同,同时分离方法也不一定相同,这可能导致不一致的实验结果。外泌体纯度表征可以用颗粒数/蛋白、颗粒数/RNA、蛋白/脂质、脂质/RNA等多个维度来评估外泌体纯度,避免mian单一方法的局限性。备注:脂质浓度用维思克思WSR0028-2测量;RNA浓度用维思克思WSR0039测量。三、评估外泌体的安全性。如果用来做细胞或动物实验,外泌体中含有影响细胞或动物的成分,实验的结果将会令人非常诅丧。这次测评将外泌体的安全性指标进行的评估,包括内外源病毒、细菌、支原体的检测,结果显示安全性指标全部合格。外泌体研究工具高灵敏度检测试剂,微量样本即可分析,减少样本用量需求。

外泌体分离提取方法大全外泌体快速、简便、高纯度、高回收率的分离方法是在大规模应用的前提。维思克思编制了外泌体分离方法大全:亲和磁珠法分离(WSR0002-2)能特异性捕获外泌体,实现高纯度、高回收率外泌体分离。具有操作简便、高纯度和高回收率等优点,特别适用于血浆、血清等复杂样本中的外泌体分离。凝胶排阻色谱法分离(WSR0003)基于分子排阻色谱(SEC)原理,根据被分离组分分子大小差异进行外泌体的分离,可以获取分子大小均一、高纯度的外泌体。特别适用于大体积样本中的外泌体分离。SEC离心法分离(WSP0015/WSP0016)是离心柱式的外泌体分离产品,离心柱中装填的介质能无差别地吸附杂质而不结合外泌体,实现超快速、高收率的外泌体分离。沉淀法分离(WSR0026/WSR0037)是一款沉淀法外泌体分离试剂盒,可用于多种样本的外泌体分离,具有操作简便、分离速度快和外泌体回收率高等特点。离子交换法分离(WSR0031)适用于10-30mL细胞培养上清样本中外泌体的分离纯化,基于阴离子交换层析原理,特异性吸附样本中带负电的外泌体,然后高效洗脱,实现外泌体的浓缩和分离。外泌体研究工具适配多种检测设备,无需专门的仪器,降低设备投入。工程化Exosome表征
外泌体研究工具自动化操作兼容,适配实验室自动化系统,提升工作效率。中药ExosomeCRO
外泌体表征与定量难在什么地方?又该怎么做?我们拜访过很多外泌体研究工作者,其中谈到多的是外泌体难以分离,分离后的外泌体不好定量,定量的外泌体数据是否准确等问题。2.单一表征方法的局限性对外泌体的纯度表征目前采用的是外泌体阴性蛋白标志、颗粒蛋白比。外泌体阴性蛋白标志一般采用WB检测,属于定性检测,与样本处理、抗体、显色、曝光时间等多个因素有关,如果作为纯度表征的指标,显然是不合适的。在蛋白聚集体或其他杂质(糖/脂质/核酸等)聚集体/大颗粒较多时,颗粒蛋白比的数值也可能较大,其作为纯度表征指标也有其局限性。既然上述外泌体定量方法、表征方法具有其局限性,那么如何科学的对外泌体进行定量和表征呢?中药ExosomeCRO
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