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高效液相色谱

高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“**离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术应用。 双恒温模式：蒸馏气体和加压气体。北京液相色谱系统价格

高效液相色谱相关术语

峰面积(peak area，A)—峰与峰底所包围的面积。

保留时间(retention time，tR)——从进样开始到某个组分在柱后出现浓度极大值的时间。

理论塔板数(theoretical plate number，N)——用于定量表示色谱柱的分离效率（简称柱效）。

分离度(resolution，R)——相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值。也叫分辨率，表示相邻两峰的分离程度。R≥1.5称为完全分离。

《中国药典》规定R应大于1.5。

拖尾因子(tailing factor，T)——T=，用以衡量色谱峰的对称性。也称为对称因子(symmetry factor)或不对称因子(asymmetry factor)。

《中国药典》规定T应为0.95~1.05。

T1.05为拖尾峰。

高效液相色谱综述

HPLC的出现不过三十多年的时间，但这种分离分析技术的发展十分迅猛，应用十分***。其仪器结构和流程多种多样。典型的高效液相色谱仪结构和流程可用下列方框图表示(See Fig.3-4)。高效液相色谱仪一般都具备贮液器、高压泵、梯度洗提装置（用双泵）、进样器、色谱柱、检测器、恒温器、记录仪等主要部件。

高效液相色谱更适宜于分离、分析高沸点、热稳定性差、有生理活性及相对分子量比较大的物质，因而广泛应用于核酸、肽类、内酯、稠环芳烃、高聚物、药物、人体代谢产物、表面活性剂，抗氧化剂、杀虫剂、除锈剂的分析等物质的分析。

高效液相色谱法之实例：

高效液相色谱法，只要求试样能制成溶液，而不需要气化，因此不受试样挥发性的限制。对于高沸点、热稳定性差、相对分子量**于400以上）的有机物（这些物质几乎占有机物总数的75%～80%）原则上都可以应用高效液相色谱法来进行分离、分析。据统计，在目前已知的化合物中，能用气相色谱分析的大约占20%，而能用液相色谱分析的大约占70～80%。

1、环境中有机氯农药残留量分析；

2、稠环芳烃的分析；

3．阴离子分析。 增强定性、定量样品信息。

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液相色谱中的大多数检测选项都需要通过某些物理化学性质来检测某一物质，例如用于紫外线吸收检测的发色团或用于质谱检测的离子化。电雾式检测技术可检测所有不同化学结构的非挥发性分析物，同时提供一致的响应、出色的灵敏度和较宽的线性范围。

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液相色谱类型

液相色谱按其分离机理，可分为四种类型--吸附色谱法、分配色谱法、离子交换色谱、凝胶色谱法

吸附色谱法

吸附色谱法的固定相为吸附剂，色谱的分离过程是在吸附剂表面进行的，不进入固定相的内部。与气相色谱不同，流动相(即溶剂)分子也与吸附剂表面发生吸附作用。在吸附剂表面，样品分子与流动相分子进行吸附竞争，因此流动相的选择对分离效果有很大的影响，一般可采用梯度淋洗法来提高色谱分离效率。

在聚合物的分析中，吸附色谱一般用来分离添加剂，如偶氮染料、抗氧化剂、表面活性剂等，也可用于石油烃类的组成分析。