方法外泌体提取

为获得外泌体的大小、浓度、形态及蛋白质组成等信息，可以通过电镜、动态光散射、纳米颗粒跟踪分析仪、蛋白质免疫印迹、酶联免疫吸附法、流式细胞仪等对外泌体进行表征。通过电镜可获得外泌体的形态信息，不同类型的显微镜由于操作环境不同，得到的外泌体形态存在差异。例如，在扫描电镜、透射电镜和原子力显微镜中，外泌体呈现囊泡独有的茶托形，可能由于样品在固定或染色过程中极度脱水，导致外泌体塌陷所致。与之相反，在冷冻电镜中外泌体呈现圆形，由于不会脱水变性，所得的外泌体形态可能更加接近囊泡的真实状态。另外，由于透射电镜和原子力显微镜具有较高分辨率，也能够提供外泌体磷脂双分子层厚度、粒径分布等信息。干细胞外泌体通过改变细胞外基质，改变受体细胞的转录组和蛋白质组，调节细胞凋亡，生长，增殖和分化途径。方法外泌体提取

外泌体特指直径在30-150nm的囊泡，其主要来源于细胞内多囊泡体，经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。外泌体膜上富含参与外泌体运输的四跨膜蛋白家族（CD63,CD81和CD9）、热休克蛋白家族（HSP60,HSP70和HSP90），本示踪病毒使用CD9作为生物标记，通过将CD9与荧光蛋白偶联，带荧光的膜蛋白会在表达至外泌体膜上，便于后续进行、观察内化或其他实验。携带有外源基因的慢病毒载体在慢病毒包装质粒、细胞系的辅助下，经过病毒包装成为有ganran力的病毒颗粒，通过ganran细胞或组织，实现外源基因在细胞或组织中表达。方法外泌体提取外泌体被工程化改造后，具有靶向特定细胞类型或组织的功能。

所有真核细胞类型包括造血细胞、上皮细胞、神经细胞、干细胞、脂肪细胞和病症细胞均可在培养条件下分泌外泌体。体内所有体液，包括血液、唾液、脑脊液、腹水，甚至尿液中都可以分离得到外泌体。这些外泌体传输多种信号分子，包括蛋白质、信使核糖核酸（mRNA）和非编码核糖核酸（RNA），其携带的分子可以被其他细胞吸收。因此，外泌体可以将生物信息转移到相邻细胞。这种细胞间通信不只涉及生理功能，还涉及一些疾病的发病机理，包括瘤、心血管疾病和神经退行性疾病等。

间充质干细胞存在于骨髓、脂肪、脐血、牙髓、滑膜液等部位，是一种能够自我更新的多功能干细胞。间充质干细胞通过旁分泌的形式发挥其生理功能，而外泌体作为一种细胞间传递信息的介质，在间充质干细胞的功能行使中发挥了重要作用。研究发现间充质干细胞来源的外泌体能够修复组织损伤、抑制中流生长和调节免疫响应，具有zhiliao心肌梗死、自身免疫疾病、阿尔兹海默症等疾病的潜力。另外，也有研究显示间充质干细胞来源的外泌体会促进某些中流生长。外泌体具有良好的生物兼容性、稳定性和内在靶向性，使其在药物递送方向大有潜力。

有研究表明外泌体通过唤醒瘤相关信号通路、诱导免疫耐受、重塑细胞外基质、增强瘤细胞侵袭性和调控瘤微环境促进瘤的发生和发展，外泌体在瘤的诊断上有诸多优势：外泌体可保护其中的核酸类物质，防止其迅速降解；外泌体的形成与亲源细胞的状态密切相关；针对外泌体内容物的检测比传统的瘤标志物更具有特异性；外泌体宽泛存在于多种体液样本中，以其为基础的瘤诊断可在病情发展过程中及时监测分子标志物的变化，这种检测更易监控且样本更易收集。外泌体可以直接进入受体细胞影响细胞功能。方法外泌体提取

从症状患者树突状细胞释放的外泌体中，含有各种症状细胞来源的蛋白质。方法外泌体提取

研究者利用电穿孔法对外泌体进行DOX的负载，进行体内抗中流效果的研究。实验结果显示，负载DOX的iRGD肽靶向性外泌体对中流的抑制效果远优于单纯的DOX。直接静脉注射DOX，其不仅水溶性低，而且容易使DOX与血液中的蛋白结合，从而被网状内皮系统识别捕获，起不到理想的抗中流效果。而用iRGD肽靶向性的外泌体保护DOX，可以提高DOX水溶性，避免被网状内皮系统捕捉，提高靶向性，从而降低由于用药过量和非靶向性引起的毒性，起到更好的抗中流效果。方法外泌体提取