浙江羟乙基哌嗪乙磺酸HEPES使用注意事项

使用羟乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）缓冲体系时的注意事项由于哌嗪基团的存在，当羟乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）暴露于光线中时，会产生H2O2，这对培养的细胞或其它有生物活性的物体产生毒性，同时对氧化还原敏感的物质不宜共同使用，因此羟乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）作为缓冲液的操作应尽量在避光条件下进行。羟乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）在生化领域常见的使用浓度为10-25mM，当浓度低于10mM时缓冲能力较弱，不能起到较好的缓冲效果，当浓度较高时对一些细胞可能具有毒害作用。艾伟拓长期稳定供应注射级海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、羟乙基哌嗪乙磺酸（HEPES）等生物保护剂与缓冲盐，GMP条件生产，中美双报，供注射用，**内***，DNase&RNasefree，符合国际主流药典标准，助力重组蛋白疫苗、mRNA疫苗、腺病毒载体疫苗、脂质体、单双抗、抗体偶联药物等生物制剂生产与中外申报！注射用HEPES国产缓冲液CDE已登记实验室询价；浙江羟乙基哌嗪乙磺酸HEPES使用注意事项

HEPES(4-2-羟乙基醇-1-哌秦基-乙磺酸) 分子量为238.31，化学名：4-羟乙基哌口秦乙磺酸，分子式： C8H18N2O4S。HEPES是制备缓冲液的有机物质，为非离子两性缓冲液，在pH 7.2 - 7.4范围内具有很好的缓冲能力。 ***用于细胞培养，为了维持稳定的生理pH值，20下的pKa为7.55。 HEPES用于保护冷冻酶溶液免受冷冻诱导的pH变化的影响。 考虑到HEPES的光毒性(暴露于环境光会产生过氧化氢)，该缓冲剂配置溶液后，保存在黑暗的环境中，以便在后续实验中正常工作。福建药用HEPES现货供应注射用HEPESCDE已登记登记状态为A；

用途细胞培养：HEPES在细胞培养中发挥着重要作用，能够维持培养液的pH稳定，提高细胞存活率。特别适用于长时间培养、开放环境培养以及对pH变化敏感的细胞系。生物和生化研究：由于HEPES具有稳定的pH控制能力和广泛的应用范围，它还被用于大多数金属离子的研究、环境和生物学研究、阳离子交换色谱中的缓冲液和洗脱液、植物研究、凝胶电泳中的缓冲液、电穿孔的缓冲液等。其他应用：此外，HEPES还用于哺乳动物细胞培养、体外受精和胚胎培养的缓冲液、二辛可宁酸（BCA）分析以及一些软骨两栖动物的研究等。

‌7. 在RNA研究中的注意事项‌HEPES可能抑制某些RNA酶活性，但高浓度会干扰逆转录反应。建议在RNA提取阶段使用Tris-EDTA缓冲液替代。‌8. 与温度变化的稳定性‌HEPES缓冲能力在4-37℃范围内变化<10%，优于Tris缓冲液。但高温（>50℃）会导致降解，需避免高压灭菌。‌9.在流式细胞术中的优化‌HEPES（10mM）可维持细胞悬液pH稳定，减少荧光染料淬灭。但需与FBS或BSA联用以防止非特异性结合。艾伟拓HEPES现已登记且登记状态为A，欢迎采购询价国产注射用HEPES缓冲液CDE已登记状态为A采购；

光敏感性与储存条件‌HEPES溶液在光照下会生成过氧化物，需避光保存于4℃。使用前建议通过0.22μm滤膜除菌，并检测过氧化物含量（如硫代硫酸钠滴定法）。过氧化物会氧化敏感的生物分子，如硫醇基团和某些荧光染料。长期储存的HEPES溶液应分装并避免反复冻融。商业化的HEPES粉末也应避光保存，因其在光照下会逐渐降解。HEPES溶液的pH会随时间缓慢变化，建议使用前重新校准。蛋白质纯化中的缓冲选择‌HEPES缓冲液（pH 7.5）适用于离子交换层析，因其不与His标签蛋白竞争结合镍柱。但需避免与EDTA联用，以防金属离子沉淀。HEPES在蛋白质结晶中也常用作缓冲液，其低离子强度减少了对晶体生长的干扰。在蛋白质稳定性研究中，HEPES缓冲液能有效维持蛋白质的天然构象。HEPES还可用于蛋白质的等电点测定，因其缓冲范围覆盖了多数蛋白质的等电点区域。注射用HEPES CDE已登记登记状态为A；上海高纯HEPES批发

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对细胞的保护作用降低细胞毒性：某些化学物质在培养基中容易产生细胞毒性，影响细胞的生长和繁殖。HEPES能够降低这些化学物质的细胞毒性，从而保护细胞免受损伤。形成保护层：HEPES分子还可以通过吸附在细胞表面，形成一层保护层，减少细胞间的摩擦和碰撞，降低细胞的损伤风险。这有助于提高细胞的生存率和实验结果的可靠性。综上所述，HEPES在细胞培养中发挥作用的主要原理是通过其两性离子特性增加溶液离子浓度和渗透压，以及通过其稳定的缓冲能力维持细胞生长所需的pH环境。此外，HEPES还能降低细胞毒性、形成保护层等，对细胞具有保护作用。这些特性使得HEPES成为细胞培养中不可或缺的缓冲剂之一。浙江羟乙基哌嗪乙磺酸HEPES使用注意事项