HEPES在细胞培养中的应用HEPES***用于哺乳动物细胞培养,尤其在CO2培养箱外操作时(如显微镜观察),可替代碳酸氢盐缓冲系统。推荐浓度为10-25 mM,过高浓度可能抑制细胞生长。需注意HEPES对光敏感,需避光保存。HEPES缓冲液能有效维持细胞外pH稳定,防止因CO2逸出导致的培养基碱化。在胚胎培养中,HEPES需严格过滤除菌,且浓度不超过15 mM,以避免影响囊胚发育。建议与**酸钠联用增强缓冲能力。HEPES还可用于原代细胞培养,其低离子强度特性减少了对细胞的机械损伤。注射用HEPESCDE已登记登记状态为A。江苏登记号HEPES生产厂家

HEPES缓冲体系的应用
2022年4月15日,施维雅公司(SERVIER)宣布,其胰腺****药物易安达(通用名:盐酸伊立替康脂质体注射液)获得中国国家药品监督管理局(NMPA)正式批准上市。
伊立替康**早上市的制剂是盐酸伊立替康注射液,在实际使用的过程中,该剂型逐渐暴露出一个问题:伊立替康的内酯环结构易水解,在pH>6条件下平衡快速向羧酸盐型方向转化。羧酸盐型的伊立替康药理活性低,毒性更强。生理条件(pH 7.4)下,由于血清蛋白优先与羧酸盐络合而使平衡偏向活性低的羧酸型,造成有效的内酯型比例过低,达到平衡时,“低效高毒”的羧酸盐形式化合物所占比重高达90%。
q中包裹的伊立替康以有效的内酯型为主,这也意味着伊立替康脂质体内水相pH偏酸性(pH6左右)。而众多文献及Onivyde专利文件实施例均表明外水相pH在近中性时更有利于脂质的稳定,Onivyde专利文件的实施例表明外水相pH在7.25左右时脂质长期稳定性比较好。这需要伊立替康脂质体外水相和内水相存在pH差异,同时外水相偏碱性的缓冲对不能在长期储存中进入内水相升高内水相pH,否则内水相中的伊立替康将会转化为“低效高毒”的羧酸盐形式。四、不易穿过脂质膜的羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)更适用于伊立替康脂质体
江苏cas号7365-45-9HEPES实验室采购注射用HEPES CDE已登记登记状态为A;

羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)是一种不能轻易穿过生物膜的缓冲。 它适用于伊立替康脂质体,因为它可以在稳定脂质体外水相酸碱度为弱碱性的情况下,不改变内水相酸性酸碱度。HEPES 的用量应该在10-25mM 之间,10mM以下的用量会导致缓冲能力较弱, 25mM以上可能对一些细胞造成不良反应。HEPES的使用以及操作应尽量在避光的情况下进行。这是因为在灯光下,HEPES会产生H2O2,而H2O2对活性的物体来说是有害的,这对培养的细胞会造成一定的伤害。
HEPES缓冲体系在生物化学和细胞生物学研究中扮演着至关重要的角色。以下是对HEPES缓冲体系的详细介绍:工作原理HEPES的工作原理是通过吸收或释放氢离子来调节溶液的pH值。在生理pH范围内,HEPES主要以未离解的分子形式存在,即“非离子”状态。当溶液中的氢离子浓度增加时,HEPES会吸收氢离子并转化为带负电荷的离子形式;反之,当溶液中的氢离子浓度降低时,HEPES会释放氢离子并转化为带正电荷的离子形式。这种转化过程使得HEPES能够在不同的pH条件下维持溶液的稳定。国产注射用HEPES缓冲液中美双报。

对细胞的保护作用降低细胞毒性:某些化学物质在培养基中容易产生细胞毒性,影响细胞的生长和繁殖。HEPES能够降低这些化学物质的细胞毒性,从而保护细胞免受损伤。形成保护层:HEPES分子还可以通过吸附在细胞表面,形成一层保护层,减少细胞间的摩擦和碰撞,降低细胞的损伤风险。这有助于提高细胞的生存率和实验结果的可靠性。综上所述,HEPES在细胞培养中发挥作用的主要原理是通过其两性离子特性增加溶液离子浓度和渗透压,以及通过其稳定的缓冲能力维持细胞生长所需的pH环境。此外,HEPES还能降低细胞毒性、形成保护层等,对细胞具有保护作用。这些特性使得HEPES成为细胞培养中不可或缺的缓冲剂之一。注射用HEPES缓冲液中美双报高性价比;河北药用HEPES实验室采购
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HEPES在细胞培养中发挥作用的主要原理是基于其两性离子特性和稳定的缓冲能力。以下是具体解释:稳定的缓冲能力***的pH缓冲范围:HEPES的有效缓冲范围在pH6.88.2之间,覆盖了大多数细胞生长所需的pH环境(pH7.27.4)。这使得HEPES能够在细胞培养过程中提供稳定的pH环境,有利于细胞的生长和繁殖。CO2无关性:与许多其他缓冲液不同,HEPES的缓冲能力不受CO2浓度的影响。这意味着在开放式培养或细胞观察时,即使培养基脱离了5%CO2的环境,HEPES也能维持pH的稳定,防止pH迅速升高。江苏登记号HEPES生产厂家