HEPES在细胞培养中的应用HEPES***用于哺乳动物细胞培养,尤其在CO2培养箱外操作时(如显微镜观察),可替代碳酸氢盐缓冲系统。推荐浓度为10-25 mM,过高浓度可能抑制细胞生长。需注意HEPES对光敏感,需避光保存。HEPES缓冲液能有效维持细胞外pH稳定,防止因CO2逸出导致的培养基碱化。在胚胎培养中,HEPES需严格过滤除菌,且浓度不超过15 mM,以避免影响囊胚发育。建议与**酸钠联用增强缓冲能力。HEPES还可用于原代细胞培养,其低离子强度特性减少了对细胞的机械损伤。国产注射用HEPES缓冲液CDE已登记状态为A购买。辽宁有登记号HEPES使用注意事项
特性与优势***的缓冲范围:HEPES的有效缓冲范围在pH6.8~8.2之间,覆盖了大多数生物实验和细胞培养所需的pH环境。CO2无关性:与许多其他缓冲液不同,HEPES的缓冲能力不受CO2浓度的影响,这使得它在开放式培养或细胞观察等实验中具有独特的优势。低毒性:在适当浓度下,HEPES对细胞无毒性作用,能够为细胞提供一个安全的生长环境。稳定性强:HEPES不易受温度、光照和化学物质的影响,适合长期实验和储存。膜不透性:HEPES具有膜不透性,不会***改变细胞的渗透压,避免了对细胞形态和功能的不良影响。辽宁有登记号HEPES使用注意事项国产注射用HEPES缓冲液CDE已登记状态为A采购。
HEPES缓冲体系在生物化学和细胞生物学研究中扮演着至关重要的角色。以下是对HEPES缓冲体系的详细介绍:在细胞培养中的应用维持pH稳定:在细胞培养中,HEPES能够维持培养液的pH稳定,为细胞提供一个适宜的生长环境。这对于细胞的生长、繁殖和代谢过程至关重要。减少乳酸积累:在某些培养基中,如RPMI-1640,HEPES有助于减缓细胞代谢产生的大量乳酸,从而避免培养液pH下降,抑制细胞生长。适用于无CO2环境:在需要避免CO2干扰的实验中,如细胞观察、转染等,HEPES能够确保细胞在一个稳定的酸碱环境中生长。
(5)缓冲溶液在稳定性方面各显利弊:①Tris-HCl缓冲溶液pH值受外界影响较大,一般现用现配。同时需要注意Tris是一级脂肪胺,分子结构中的氨基易与醛类化合物发生缩合反应,是一些生化实验的抑制剂。②硼酸盐缓冲液有一定毒性,不宜用做注射液或者口服液的缓冲液。③虽然磷酸盐缓冲溶液稳定性很好,但磷酸根具有一定的络合能力会抑制一些与金属离子有关的生化反应。④HEPES缓冲溶液是较理想的生物缓冲剂,但其有多种生物学效应,如:缩短血液凝固时间、减缓平滑肌收缩频率以及阻断细胞膜上的阴离子通道等,在一定程度上会影响患者身体状态,使用时应需注意。AVT长期稳定供应注射级海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、HEPES等生物保护剂与缓冲盐!
7. 在RNA研究中的注意事项HEPES可能抑制某些RNA酶活性,但高浓度会干扰逆转录反应。建议在RNA提取阶段使用Tris-EDTA缓冲液替代。8. 与温度变化的稳定性HEPES缓冲能力在4-37℃范围内变化<10%,优于Tris缓冲液。但高温(>50℃)会导致降解,需避免高压灭菌。9.在流式细胞术中的优化HEPES(10mM)可维持细胞悬液pH稳定,减少荧光染料淬灭。但需与FBS或BSA联用以防止非特异性结合。艾伟拓HEPES现已登记且登记状态为A,欢迎采购询价注射用HEPES 中美双报;江西高纯度HEPES大批量采购
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对细胞的保护作用降低细胞毒性:某些化学物质在培养基中容易产生细胞毒性,影响细胞的生长和繁殖。HEPES能够降低这些化学物质的细胞毒性,从而保护细胞免受损伤。形成保护层:HEPES分子还可以通过吸附在细胞表面,形成一层保护层,减少细胞间的摩擦和碰撞,降低细胞的损伤风险。这有助于提高细胞的生存率和实验结果的可靠性。综上所述,HEPES在细胞培养中发挥作用的主要原理是通过其两性离子特性增加溶液离子浓度和渗透压,以及通过其稳定的缓冲能力维持细胞生长所需的pH环境。此外,HEPES还能降低细胞毒性、形成保护层等,对细胞具有保护作用。这些特性使得HEPES成为细胞培养中不可或缺的缓冲剂之一。辽宁有登记号HEPES使用注意事项