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浙江采购HEPES使用注意事项

来源: 发布时间:2025年09月25日

HEPES在细胞培养中发挥作用的主要原理是基于其两性离子特性和稳定的缓冲能力。以下是具体解释:稳定的缓冲能力***的pH缓冲范围:HEPES的有效缓冲范围在pH6.88.2之间,覆盖了大多数细胞生长所需的pH环境(pH7.27.4)。这使得HEPES能够在细胞培养过程中提供稳定的pH环境,有利于细胞的生长和繁殖。CO2无关性:与许多其他缓冲液不同,HEPES的缓冲能力不受CO2浓度的影响。这意味着在开放式培养或细胞观察时,即使培养基脱离了5%CO2的环境,HEPES也能维持pH的稳定,防止pH迅速升高。GMP条件下生产艾伟拓稳定供货注射级HEPES。浙江采购HEPES使用注意事项

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Tris-HCL与HEPES(供注射用)缓冲液应用对比

**常用的缓冲液有很多,如磷酸盐缓冲液、Tris-HCl缓冲液、HEPES缓冲液、氨基酸缓冲液等。不同的缓冲液差别液很大,***主要来对比两种**常用的缓冲液:Tris-HCl缓冲液与HEPES缓冲液各自的应用对比。

1、Tris-HCl缓冲液的应用Tris常用于蛋白或者核酸的缓冲液,其在电泳缓冲液中与甘氨酸构成缓冲体系,稳定电泳过程中的pH,由于其具有弱碱性,水溶液的pH在10.5左右,可通过添加HCl或者NaOH制备不同pH的缓冲液,根据缓冲理论,Tris缓冲液的有效范围通常是pH7.0-9.2之间。此外,Tris还可以制备表面活性剂、硫化促进剂和一些药物(磷霉素等)的中间物,在化妆品、医药、涂料以及合成中均有应用。应用于体内时,Tris作为一种不含钠的氨基缓冲碱,在体液中与H2CO3结合,生成碳酸氢盐。因此它能缓冲酸,而且能降低CO2张力,有纠正急性呼吸性酸中毒和代谢性酸中毒双重效果,其作用较碳酸氢钠快而强。HEPES缓冲液对细胞无毒性作用,它是一种氢离子缓冲剂,能较长时间控制恒定的pH范围。使用时浓度为10-50mmol/L,一般培养液内含20mmol/LHEPES即可达到缓冲能力。在体外诊断、DNA/RNA提取、脂质体药物等方面均有应用。


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在RNA研究中的注意事项‌HEPES可能抑制某些RNA酶活性,但高浓度会干扰逆转录反应。建议在RNA提取阶段使用Tris-EDTA缓冲液替代。HEPES在RNA电泳中常用作缓冲液,其低离子强度减少了对RNA迁移的干扰。在体外转录反应中,HEPES缓冲液能维持反应体系的pH稳定。但需注意HEPES可能结合某些金属离子,影响依赖金属离子的RNA酶活性。HEPES溶液在光照下会生成过氧化物,需避光保存于4℃。使用前建议通过0.22 μm滤膜除菌,并检测过氧化物含量(如硫代硫酸钠滴定法)。过氧化物会氧化敏感的生物分子,如硫醇基团和某些荧光染料。长期储存的HEPES溶液应分装并避免反复冻融。商业化的HEPES粉末也应避光保存,因其在光照下会逐渐降解。HEPES溶液的pH会随时间缓慢变化,建议使用前重新校准。

与温度变化的稳定性‌HEPES缓冲能力在4-37℃范围内变化<10%,优于Tris缓冲液。但高温(>50℃)会导致降解,需避免高压灭菌。HEPES在低温下仍保持良好缓冲能力,适合冷库或冰上操作。在热稳定性实验中,HEPES缓冲液能有效维持反应体系的pH稳定。但需注意HEPES在高温下的降解产物可能干扰实验结果。在RNA研究中的注意事项‌HEPES可能抑制某些RNA酶活性,但高浓度会干扰逆转录反应。建议在RNA提取阶段使用Tris-EDTA缓冲液替代。HEPES在RNA电泳中常用作缓冲液,其低离子强度减少了对RNA迁移的干扰。在体外转录反应中,HEPES缓冲液能维持反应体系的pH稳定。但需注意HEPES可能结合某些金属离子,影响依赖金属离子的RNA酶活性。AVT注射用HEPES已登记!

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HEPES是一种两性离子缓冲剂。HEPES分子中的磺酸基(-SO3H)和叔胺氮共同构成了缓冲对。磺酸基具有较强的酸性,可以释放出H+;而叔胺氮则具有碱性,可以接受H+生成季铵盐。这两个部分之间可以相互转移H+或OH-,从而建立起平衡的缓冲体系。在HEPES缓冲溶液中,当有外来酸或碱添加进来时,磺酸基和叔胺之间的转移平衡会发生变化,从而抵消外界酸碱物质的影响,使溶液的pH保持相对稳定。这种平衡转化关系可以通过下图来表示:HEPES⇌HEPESH++OH-HEPES⇌HEPES-+H+HEPES⇌HEPESH2++OH-HEPES⇌HEPES2-+2H+这些平衡反应使得HEPES能够在一定范围内调节溶液的pH值,一般在6.8到8.2之间。此外,HEPES缓冲溶液的浓度以及环境温度对其pH值的影响较小,因此能够保持较长时间的稳定pH值。总的来说,由于HEPES分子中的磺酸基和叔胺氮之间的平衡转化关系,HEPES可以作为一种有效的两性离子缓冲剂,在生化实验和生产过程中稳定溶液的酸碱度。国产注射用HEPES缓冲液中美双报。江西药用HEPES医院采购

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艾伟拓氨丁三醇(供注射用)获DMF号,完成中美双报!

本月,艾伟拓自研自持的药用辅料“氨丁三醇(供注射用)”已完成FDA相关登记工作,顺利取得DMF归档号(#037604)。至此,该品种已完成中美双报(CDE登记号:已登记;DMF号:已登记4)。艾伟拓稳定供应国产化注射级别氨丁三醇,低内***(<4IU/g),高纯度低杂质,符合USP,ChP,EP等主流药典标准,支持中外申报,欢迎来询!

此外,艾伟拓长期稳定供应国产化注射级海藻糖、蔗糖、TRIS-HCl、HEPES等生物保护剂与缓冲盐,均为GMP条件生产,低内***,高纯度低杂质,DNase&RNasefree,符合USP,ChP,EP等国际主流药典标准,助力重组蛋白疫苗、mRNA疫苗、腺病毒载体疫苗、脂质体、单双抗、抗体偶联药物、CAR-T等生物制剂的研发生产与中外申报! 浙江采购HEPES使用注意事项