生物缓冲剂HEPES粉末事实证明,HEPES优于碳酸盐缓冲液等其他缓冲液,可以避免二氧化碳释放导致细胞微细化生长,因此在细胞培养中频繁使用。HEPES的PH值随温度下降而下降,但磷酸盐与碳酸氢盐缓冲液的解离常数pK几乎不随温度变化。HEPES的行为与水相似,温度降低解离常数降低,HEPES可用于维持酶在低温下的结构和功能。HEPES为白色结晶粉末,纯度高、质量好,主要含量在99.50%以上,铁离子在5ppm以下,硫酸盐在0.05%以下,重金属残留量在10ppm以下。提供少量试用样品粉末,可自行配置于溶液中检测使用。AVT稳定供货注射级HEPES。江苏登记号HEPES需求
HEPES(4-2-羟乙基醇-1-哌秦基-乙磺酸) 分子量为238.31,化学名:4-羟乙基哌口秦乙磺酸,分子式: C8H18N2O4S。HEPES是制备缓冲液的有机物质,为非离子两性缓冲液,在pH 7.2 - 7.4范围内具有很好的缓冲能力。 ***用于细胞培养,为了维持稳定的生理pH值,20下的pKa为7.55。 HEPES用于保护冷冻酶溶液免受冷冻诱导的pH变化的影响。 考虑到HEPES的光毒性(暴露于环境光会产生过氧化氢),该缓冲剂配置溶液后,保存在黑暗的环境中,以便在后续实验中正常工作。云南cas号7365-45-9HEPES现货GMP条件下生产AVT注射级HEPES!
Tris-HCl缓冲液缺点:1、温度效应大,如4℃时pH=8.4,37℃时pH=7.42、pH值受溶液浓度影响较大,稀释十倍,pH值的变化大于0.1;3、对某些pH电极发生一定的干扰作用,所以要使用与Tris溶液具有兼容性的电极。4、易吸收空气中的CO2,所以配制的缓冲液要盖严密封。HEPES缓冲液HEPES是一种非离子两性缓冲液,其在pH7.2~7.4范围内具有较好的缓冲能力,常用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。HEPES缓冲液优点:pKa值介于6.0和8.0之间;在水中具有高溶解度;具有膜不透性,不易穿透生物膜;对生化反应影响有限,可耐化学和酶解作用,且不与金属离子生成复合物或沉淀;有极低的可见光和紫外光吸收;离子浓度、溶液组成和温度对解离的影响小;HEPES缓冲液缺点:如果将HEPES水溶液暴露于环境光下三小时,会产生细胞毒性的H2O2;HEPES水溶液必须远离光线以免影响实验结果;而配置成溶剂后,要在4℃下保存,建议在短期内使用效果更佳;HEPES粉末放置的时候一般放于干燥的室内,不能直接长时间照射阳光。
HEPES的使用方法:1)HEPES可以按所需浓度直接加入制备的培养液中进行过滤除菌。每1000ml培养液中加入2.38克HEPES,溶解后用lNNaOH调节ph7.2,过滤除菌后使用。此时HEPES的使用浓度为10mmol/L。2)亦可配成100x贮存液(lmol/L),使用前取99ml培养液加入lml贮存液,*终应用浓度仍为10mmol/L。lmol/L(100x)HEPES贮存液配制方法:取23.8gHEPES溶于90ml双蒸水中,用lNNaOH调pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,过滤除菌,分装小瓶(2ml/瓶),4℃或-20℃保存。国内AVT注射用HEPES已登记?
(1)hepes缓冲液可按所需的浓度直接加入到配制的培养液中,再过滤除菌.每1000ml培养液中加入2.38克HEPES,待溶后用lNNaOH调pH至7.2,滤过除菌后使用.此时HEPES的使用浓度为10mmol/L.(2)亦可配成100x贮存液(lmol/L),使用前取99ml培养液加入lml贮存液,**终应用浓度仍为10mmol/L。lmol/L(100x)hepes缓冲液配制方法:取23.8gHEPES溶于90ml双蒸水中,用lNNaOH调pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,过滤除菌,分装小瓶(2ml/瓶),4℃或-20℃保存.作者:知乎用户0mmkBe艾伟拓稳定供货HEPES!吉林供注射用HEPES批发
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(5)缓冲溶液在稳定性方面各显利弊:①Tris-HCl缓冲溶液pH值受外界影响较大,一般现用现配。同时需要注意Tris是一级脂肪胺,分子结构中的氨基易与醛类化合物发生缩合反应,是一些生化实验的抑制剂。②硼酸盐缓冲液有一定毒性,不宜用做注射液或者口服液的缓冲液。③虽然磷酸盐缓冲溶液稳定性很好,但磷酸根具有一定的络合能力会抑制一些与金属离子有关的生化反应。④HEPES缓冲溶液是较理想的生物缓冲剂,但其有多种生物学效应,如:缩短血液凝固时间、减缓平滑肌收缩频率以及阻断细胞膜上的阴离子通道等,在一定程度上会影响患者身体状态,使用时应需注意。江苏登记号HEPES需求
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