广东超滤离心管使用方法

按用途可分：制备型离心管和分析型离心管。大量离心管(500mL、250mL)。普通离心管(50mL、15mL)。微量离心管(2mL、1.5mL、0.65mL、0.2mL) 塑料离心管，玻璃离心管，钢制离心管。1、塑料离心管。塑料离心管的优点是透明或者是半透明的，它的硬度小，可用穿刺法取出梯度。缺点是易变形，抗有机溶剂腐蚀性差，使用寿命短。塑料离心管都有管盖，它的作用是防止样品外泄，尤其是用于有放射性或强腐蚀性的样品时防止样品外泄是很重要的一点；管盖还有一个作用是防止样品挥发以及支持离心管，防止离心管变形。在挑选这一点的时候还要注意检查管盖是否严密，在试验时能否盖严，以到达倒置不漏液；我们都知道在塑料离心管中，常用材料有聚乙烯(PE)，聚碳酸酯(PC)，聚丙烯(PP)等，其中聚丙烯PP管性能会相对较好，所以，我们在挑选塑料离心管时尽可能的考虑聚丙烯的塑料离心管。超滤离心管通常具有标准化设计，使其易于与其他实验室设备集成使用。广东超滤离心管使用方法

选择合适的超滤管，主要考虑MWCO和浓缩体积，较常见的是10kD。到底选择多大截留分子量比较合适呢?10kDa、 5kDa、还是30kDa?通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤 管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书，注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同，表格中有。新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。广东超滤离心管使用方法超滤离心管还可用于制备纯度高的酶、蛋白质等生物制品，以满足不同实验室和行业的需求。

超滤离心管从细胞培养上清液中浓缩蛋白，在园子里找到一些关于浓缩蛋白的一些帖子，但还有些问题还是向园子里的大虾请教一下。我们定的是 15ml规格的管子，不知道有没有谁以前做过的，有关于转速，时间给一些建议，另外细胞上清液离心前是否需要什么预处理？离心之后回收蛋白时怎么尽量减少损失？如果要把管子重复利用，NaoH清洗后，如何在20%的乙醇中保存？是将其浸到乙醇中防于4度，还是在管子中灌入乙醇？我用过5ml的管子，当时使用的转速是4000rpm 8min，可以把5ml的样品液浓缩到约200ul，这只供参考，具体情况还要由您的样品决定。我保存5ml管子的方法是把内管取出，浸泡于装有20％乙醇的烧杯中。四度保存。

超滤离心管关于回收率的疑问？一般对浓度大于0.1mg/ml的溶质进行回收，回收率在90%以上。通常，样品损失是由于滤膜表面和料管表面的非特异性吸附造成的。为了获得较高的回收率，所选滤膜的截留率约为目标蛋白的1/3。超滤膜是一种非对称膜，其孔径呈正态分布。在高压离心下也可能发生泄漏，在这种情况下蛋白质可能会发生变形。因此，截留孔径越小，流速越慢，但回收率会更高。浓缩过程中有蛋白质沉淀，如何处理？如果蛋白质浓缩过快或过多，都可能造成蛋白质沉淀，浓缩后的蛋白质之后浓度不宜过高；对于对浓缩速度敏感、易沉淀的蛋白质，建议改进方法如下：1）降低离心速度，2）使用截留分子量较大的超滤膜3) 吹吸浓缩管，然后离心。使用超滤离心管时应注意保持其稳定性并避免操作失误导致实验失败或损坏设备。

离心过程中注意是否发生蛋白沉淀，导致堵管。若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因，是蛋白浓度过高还是Buffer不合适；前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决，后者的方法是换不同的缓冲溶液，直到蛋白不发生沉淀为止。用以浓缩蛋白，如果要换Buffer，在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候，轻轻加入新的Buffer（经0.22um超滤膜超滤），再浓缩至1ml左右，连续三次，之后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定，一般不多于500ul，也有浓缩至200ul以内的情况。按照每次至少10倍左右的体积浓缩算，三次达到1000倍以上，基本上可以达到换buffer的目的。使用超滤离心管时，应注意控制转速，以避免过度旋转导致超滤膜损坏或溢出样品。广东超滤离心管使用方法

超滤离心管在基础科学研究中也具有重要意义，如蛋白质结构解析、酵母遗传学等领域。广东超滤离心管使用方法

在选择过程中，应首先执行以下步骤：1考虑样品和分子特性：比如改变pH 可能增加构象改变的风险，而降低温度可能降低浓缩效率等。2、选择正确的膜：众所周知，超滤没有太多的膜选项，但您应对再生纤维素和聚醚砜（PES）材料进行测试，以确定哪种材料可为您的特定材料提供较低的非特异性结合和较优的回收率。3、选择合适的截留分子量，通常是靶标1/3大小的截留分子量较适合。但有时则需要更小的孔径来满足回收率的要求。如果在病毒和核酸样品，可参看下面截留分子量和病毒颗粒分子大小以及核酸大小的换算表。选择合适的装置：赛多利斯拥有适用于低浓度样品、DNA、蛋白质、病毒、过滤应用等普遍的装置选项；选择合适的装置可以有效改善结果。广东超滤离心管使用方法