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嘉兴10K超滤离心管咨询

来源: 发布时间:2024年01月26日

当浓缩到剩下1ml时,取50ul缓冲溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管,用5mgml的BSA离心10min,再取流穿,跑蛋白胶或Bradford粗测,继续加入剩下的蛋白液浓缩(在冰上操作,防止蛋白受热),直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀,导致堵管。若发生沉淀,要确定沉淀的具体原因,是蛋白浓度过高还是Buffer不合适;前者可用多根超滤管同时超滤,降低浓度的办法解决,后者的方法是换不同的缓冲溶液,直到蛋白不发生沉淀为止。超滤离心管在基础科学研究中也具有重要意义,如蛋白质结构解析、酵母遗传学等领域。嘉兴10K超滤离心管咨询

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超滤离心管的分子量选择:按照样品量和目标分子量选择适当的超滤离心管,为了得到较高的收率,所选滤膜的截留分子量MWCO建议选择所需截留分子大小的1/3左右,不超过目标分子量的一半。因为超滤膜上孔径是平均孔径,膜上的孔并非均匀,离心高压下也可能渗漏,因此截留孔径越小,流速越慢但截留比例更大。如果样本浓度低体积大,可选择较小容积的超滤管多次重复加样离心。如果同时需要脱盐和去除可溶小分子杂质,可将待浓缩样品稀释到超滤管较大容积再离心,重复2次可除去99%盐。避免过长时间或者过速离心,虽然优良品质的产品都有防死端设计,可避免过度离心造成膜表面干而造成不可逆吸附。避免过度浓缩,体积越小,越容易因表面吸附而损失得率。离心后用Tips轻轻吹吸几次滤膜截留的溶液,必要时补加一定体积的缓冲液冲洗膜表面,有助于减少膜表面吸附,能提高回收率。尽量避免Tips接触膜表面。嘉兴10K超滤离心管咨询超滤离心管还可用于检测食品样品中的致病菌、重金属等污染物,并进行食品安全监测和控制。

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下面是处理和重复使用超滤管的步骤。将超滤管中的水倒出来,用Milliq水轻轻冲洗几次。[如管底有可见蛋白质沉淀,可先加水,再用设备头吹气,注意不要碰触膜,吹气至沉淀悬浮,再倒出,不要冲自来水。)然后加入0.2 mNaOH溶液,室温放置20分钟,平衡超滤。在此期间定量管。离心10分钟。倒出剩余的MaOH溶液,将管芯浸入Milliq烧杯(1L或2L)中。放器数小时,然后用新水替换,放置数小时,不断稀释Na0E浓度。50ml管道和盖子用自来水冲洗,内壁用Milliq水冲洗。取出浸入水中的芯,并将其加入几乎满毫升的水中。在50毫升试管中注入毫升水。慢慢地将芯放入50毫升离心管中,排出一些水。然后盖上盖子,4度存放,直到下次使用。一般来说,根据上述步骤和注意事项,每根渠道在三到四年内不会受损。

选择合适的超滤管,主要考虑MWCO和浓缩体积,较常见的是10kD。到底选择多大截留分子量比较合适呢?10kDa、 5kDa、还是30kDa?通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤 管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同,表格中有。新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。超滤离心管还可用于生产工艺控制和质量监测,以确保产品符合标准要求。

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超滤离心管,备有四种材质的超滤膜:聚醚砜、三醋酸纤维素、再生纤维素和Hydrosart,可根据不同要求灵活选用;两种回收浓缩液的方法:既可用吸管直接吸取并回收,又可将离心管放入离心机反甩,将浓缩液甩入回收帽中,加盖保存。这两种方法都可使浓缩液达到近乎完全回收;截留分子量普遍,配有3K、5K、10k、30K、50K、100K、300K、1000K、0.2μl的聚醚砜膜;较新推出ZL产品Hydrosart膜2K型,具有极低的蛋白吸附特性,高流速、高通量,是免疫球蛋白浓缩和脱盐的理想用膜。使用超滤离心管时,应注意保持样品干燥、无污染和清洁。嘉兴10K超滤离心管咨询

超滤离心管可以用于制备疫苗、抗体等生物制品,以缓解某些疾病。嘉兴10K超滤离心管咨询

超滤作为一种膜分离技术,普遍应用于生物样品的浓缩、脱盐和缓冲液置换,其原理是样本在力的作用下,通过超滤膜孔径的筛滤,大分子量的颗粒被截留下来,而水、溶剂和低分子量溶质则允许透过膜,从而达到浓缩、脱盐和缓冲液置换的目的,这种方法较大的特点是操作简便、快速、高效,可同时浓缩和纯化分子,一般来说超滤的回收率能够达到90%以上,因此得到许多人的青睐。一种超滤离心管,包括主管,主管为顶部开口底部封闭结构,主管开口处安装有顶盖,主管内安装有内管,内管上下贯通,内管底面贴合有超滤膜,超滤膜将内管底面包覆,超滤膜底面贴合有支撑板,超滤膜位于内管底面与支撑板之间,内管底部安装有底托,内管配合底托将超滤膜、支撑板压紧,内管、超滤膜、支撑板、底托与主管中位于底托以下的容腔空间连通。嘉兴10K超滤离心管咨询