选择合适的超滤管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。新买来的超滤是干燥的,使用前加入超纯水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。直接损坏超滤膜。开始离心超滤(离心机预冷至4度)。不同离心机的转速rpm换算成g之后,有所不同。超滤离心管可以有效地去除混合物中的低分子量化合物,从而提高目标化合物的纯度。浙江高离心力离心管选择
超滤离心管采用PH适用范围普遍、蛋白结合力低、通量高、相容性强的PES聚醚矾膜制作而成。产品独特的设计与制作工艺有利于降低溶质极化导致滤膜结垢,防止过度离心使样本干掉而造成样本损失、降低离心时间,提高样本回收率(回收率>90%)、同时保持温和的浓缩环境以保持蛋白的活性和构象。公司提供多种截留分子量的超滤离心管(10kD、30kD、50kD、10OkD),15ml离心过滤器可快速有效的浓缩纯化多达15ml的生物样品,,单支非灭菌包装满足实验室常用需求。同时公司也支持OEM定制。超滤离心管是一种将离心力和超滤技术相结合的一次性过滤装置,在生物实验中为蛋白质样本的浓缩、脱盐和缓冲交换提供可靠的数据,与层析、透析等方法相比,超滤离心管处理分子更加温和,不需要有机萃取,不会导致蛋白变性,操作快速且简单高效,在分离分子的同时,浓缩倍数得到了大幅提高,浓缩效率得到了明显提升。山东高离心力离心管购买超滤离心管通常由聚碳酸酯等材料制成,可承受高速旋转和高温高压。
根据其大小,又分为1.5ml、2ml、5ml、10ml、15ml、50ml等,国产的离心管一般就是这几个规格,用的较多的也就是10ml和50ml的。如果您的离心机是配30ml或者其他规格的离心管时,就要考虑进口的了。另外,离心管还有圆底和尖底,以及螺旋盖和插盖之分。螺旋盖的离心管带有较精细的刻度,插盖的只有一个总体的容量标示。实验室常用的离心管有塑料的和玻璃的,一般塑料的用的较多,因为玻璃的离心管不能用在高速或者超速离心机上。塑料的离心管又有PP(聚丙烯)、PC(聚碳酸酯),PE(聚乙烯)等材质。PP的管子性能相对来说比较好。塑料的离心管透明或者半透明,可以直观的看到样品离心情况,但是比较容易变形,抗有机溶剂的腐蚀性较差,所以使用寿命较短。因此,实验室一般会经常购买离心管。
以下是处理超滤管,重复利用超滤管的步骤。倒出超滤管里的水,用milliQ水轻轻润洗几次,【若管底有可见的蛋白沉淀,可以先加入水,然后用设备头吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉淀悬起,然后倒掉,不可用自来水猛冲】然后加入0.2M的NaOH溶液,室温放置20min,期间平衡超滤管。再离心10min。倒出残留的NaOH溶液,将管芯浸入MilliQ水的烧杯(1或2L)中,放置几个小时,再换新的水,放置几个小时,不断稀释NaOH浓度。50ml管和盖子用自来水洗,内壁再用MilliQ水洗干净。取出浸没的管芯,加至接近满的MilliQ水,50ml管也加满MilliQ水,将管芯慢慢放入50ml。离心管,排出部分水,然后盖上盖子,放4度保存,直到下次使用。一般来说,按照上述步骤和注意事项,每根管用三四年不会坏。使用超滤离心管时应注意避免污染和交叉传播,并对设备进行彻底清洁消毒。
当浓缩到剩下1ml时,取50ul缓冲溶液,加入10ul流穿,看有没变蓝色,以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了,将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管,用5mgml的BSA离心10min,再取流穿,跑蛋白胶或Bradford粗测,继续加入剩下的蛋白液浓缩(在冰上操作,防止蛋白受热),直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀,导致堵管。若发生沉淀,要确定沉淀的具体原因,是蛋白浓度过高还是Buffer不合适;前者可用多根超滤管同时超滤,降低浓度的办法解决,后者的方法是换不同的缓冲溶液,直到蛋白不发生沉淀为止。超滤离心管在临床诊断中也具有重要作用,如肾功能检测、脑脊液分析等领域。北京离心管工厂
超滤离心管可以用于分离并提取草药材料中的有效成分,以进行药理学和毒理学研究。浙江高离心力离心管选择
按用途可分:制备型离心管和分析型离心管。大量离心管(500mL、250mL)。普通离心管(50mL、15mL)。微量离心管(2mL、1.5mL、0.65mL、0.2mL) 塑料离心管,玻璃离心管,钢制离心管。1、塑料离心管。塑料离心管的优点是透明或者是半透明的,它的硬度小,可用穿刺法取出梯度。缺点是易变形,抗有机溶剂腐蚀性差,使用寿命短。塑料离心管都有管盖,它的作用是防止样品外泄,尤其是用于有放射性或强腐蚀性的样品时防止样品外泄是很重要的一点;管盖还有一个作用是防止样品挥发以及支持离心管,防止离心管变形。在挑选这一点的时候还要注意检查管盖是否严密,在试验时能否盖严,以到达倒置不漏液;我们都知道在塑料离心管中,常用材料有聚乙烯(PE),聚碳酸酯(PC),聚丙烯(PP)等,其中聚丙烯PP管性能会相对较好,所以,我们在挑选塑料离心管时尽可能的考虑聚丙烯的塑料离心管。浙江高离心力离心管选择