再生纤维素离心管购买

当浓缩到剩下1ml时，取50ul缓冲溶液，加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管，用5mgml的BSA离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradford粗测，继续加入剩下的蛋白液浓缩（在冰上操作，防止蛋白受热），直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀，导致堵管。若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因，是蛋白浓度过高还是Buffer不合适；前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决，后者的方法是换不同的缓冲溶液，直到蛋白不发生沉淀为止。超滤离心管可以去除混合物中的杂质和低分子量化合物，得到高纯度的目标化合物。再生纤维素离心管购买

超滤离心管使用注意事项：（1）选择合适的超滤管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书，注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。2）新买来的超滤是干燥的，使用前加入超纯水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。（3）平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤（离心机预冷至4度）。不同离心机的转速 rpm换算成g之后，有所不同。离心机的加速度调至较低档，减小对膜的压力。注意，一定要等离心机达到目的转速之后，方可离开离心机，否则离心机出问题时，无法一时间处理。膜与转轴的方向根据说明书调整（角转离心机的情况是膜与轴垂直）。在实际使用中，一般转速开的比说明书里的要低，这样可以延长离心管的使用寿命。北京超滤离心管咨询超滤离心管适用于从细胞培养基、血浆、尿液等样品中分离蛋白质、核酸、多糖等大分子化合物。

超滤管产品系列包括5种不同的截留分子量(即标称分子量限值, NMWL)。这些超滤管只供研究使用，不适用于诊断程序。1）.浓缩含有抗原、抗体、酶、核酸（DNA/RNA样本，单链或双链）、噬菌体等微生物样本。2）.纯化组织培养提取液或细胞裂解液中的大分子成分，去除反应液中的引物、接头或分子标记，在HPLC前去除蛋白质。3）.除盐，缓冲液更换，或渗滤。超滤管提供了两个微量离心管。在操作过程中，一个用于收集滤出液，而另一个用于回收浓缩后的样本。超滤管的超滤膜含有微量甘油。如果担心干扰后续分析,可用缓冲液或Milli-Q水进行预清洗。如果干扰仍然存在,可用0.1M NaOH清洗,再用缓冲液或Milli-Q8水清洗并甩干。

超滤离心管的分子量选择：按照样品量和目标分子量选择适当的超滤离心管，为了得到较高的收率，所选滤膜的截留分子量MWCO建议选择所需截留分子大小的1/3左右，不超过目标分子量的一半。因为超滤膜上孔径是平均孔径，膜上的孔并非均匀，离心高压下也可能渗漏，因此截留孔径越小，流速越慢但截留比例更大。如果样本浓度低体积大，可选择较小容积的超滤管多次重复加样离心。如果同时需要脱盐和去除可溶小分子杂质，可将待浓缩样品稀释到超滤管较大容积再离心，重复2次可除去99%盐。避免过长时间或者过速离心，虽然优良品质的产品都有防死端设计，可避免过度离心造成膜表面干而造成不可逆吸附。避免过度浓缩，体积越小，越容易因表面吸附而损失得率。离心后用Tips轻轻吹吸几次滤膜截留的溶液，必要时补加一定体积的缓冲液冲洗膜表面，有助于减少膜表面吸附，能提高回收率。尽量避免Tips接触膜表面。超滤离心管还可用于生产工艺控制和质量监测，以确保产品符合标准要求。

注意:超滤离心管中的滤膜一旦润湿 后应避免变干。如果在预清洗后不是立即使用，则让液体保留在滤膜上，直到使用。6.使用方法：1）.将超滤内管插入所提供的一个微量离心管中。2）.向超滤管内管中加入不超过500 μL的样本,并盖上盖子。3）.将盖好盖子的超滤管放入离心转子中，让盖子的连接带朝着转子的中间;用一个类似的超滤管平衡。4）.以14,000 x g离心约10-30分钟,具体时间取决于所使用超滤管的NMWL。5）.离心结束后将整个超滤管从离心机中取出,取出内管。6）.为了回收浓缩后的溶质,将内管倒过来插在-个干净的微量离心管中。放在离心机中,让打开的盖子朝着转子的中间;用一个类似的超滤管进行平衡。以1 ,000 x g离心2分钟,使浓缩后的样本从超滤内管转移到收集管中。超滤液可以保存在收集管中。超滤离心管可以有效地去除溶液中的杂质，使样品更纯净。再生纤维素离心管购买

使用超滤离心管时，应注意控制转速，以避免过度旋转导致超滤膜损坏或溢出样品。再生纤维素离心管购买

超滤管采用其特有的再生纤维素膜，定义为：一个确定NMWL 的超滤膜应该截留至少90% 以上的这个大小的球形分子，即100kDa的球形蛋白用100k的再生纤维素膜得率超过90%。请仔细查看以下默克生命科学官方数据：(以0.5mL的AU0.5为例，其它型号截留分子量的选择原则一致，具体离心力和离心时间不同。截留分子量选小啦！看到这个表，你是否发现原来抱怨超滤管流速偏慢的根源来自对于截留分子量定义的误解。膜孔径要小于目的分子这是一原则。如果分子有近似球形的立体结构(而非明显的线性分子)，在再生纤维素超滤膜体系内，选择“等于”或“略小于”目的分子的截留分子量的超滤管是较佳选择，这样操作起来又快又好，既保证了样品回收率，又缩短了离心时间，大幅降低大分子损伤风险。再生纤维素离心管购买