转印膜用于蛋白质和核酸的转移和检测过程,主要分为:正电荷尼龙膜/硝酸纤维素膜/PVDF膜(Positively charged nylon/Nitrocellulose/PVDF membrane)。已知的结合力包括疏水作用力\H键\静电作用力等,确切的结合原理并不明确,主要靠假说来支撑.主要有两种假说:1 首先两者靠静电作用力结合, 然后靠H键和疏水作用来维持长时间结合.2首先两者靠疏水作用结合, 然后靠静电作用来维持长时间结合.两条假说, 都表明其结合过程分为两步, 首先结合和后面长时间结合.由于结合原理的不明确性, 导致在这方面的工作非常依赖实践经验。膜材料能够保证高效率和高质量。广州透明反光转印膜价格表
PVDF膜的优点:低背景、高灵敏度、双面易辨(PVDF膜一面是光滑的,一面是有纹理的, 但两面的转印效果一样,建议客户在实验过程中用光滑面作为转印面),省去实验过程中膜标记的麻烦。PVDF膜是天然疏水膜,不带支撑的转印膜。具有很高的蛋白结合能力,BSA结合力高达125μg/cm2。具有优异的拉伸强度,防止开裂或卷曲,具有普遍的化学兼容性。PVDF膜当甲醇浓度高时,不会降解,变形适合经抗体剥离实验后的样品检测。支撑型PVDF转印膜是一种天然疏水,有支撑体的蛋白转印膜,具有机械强度高、蛋白结合能力强等优点。该膜专为蛋白转印而设计,是Western印迹、蛋白质测序、糖蛋白显色和斑点印迹等应用的理想选择。成都硝化纤维转印膜生产商PVDF转印膜材料能够抵挡日常的化学腐蚀。
我们并没有那么多选择. 经过使用实践, 各供应商一般都只提供两个型号, 就是135s和180s. 虽然看到有些厂家的产品目录上型号种类繁多,但这两个型号的定货量就占了95%以上, 其他型号供货上也就远不如这两个型号来得顺利. 135s一般用在双抗体夹心法, 180s一般用在竞争法. 你所要做的是,先选择其中的一个型号, 然后比较不同供应商同一个型号的差异, 由于前面说的添加配方与你的试验条件配合的不同,这个差异可能大也可能小. 具体要根据试验结果来确定之后的选择。我个人不建议地毯式的测试不同规格/不同厂家的膜, 这样成本高, 成功的几率也小。
硝化纤维素转印膜的发展趋势:随着科技的不断进步和人们对环保、健康的要求越来越高,硝化纤维素转印膜的发展趋势也在不断变化。未来硝化纤维素转印膜的发展方向主要有以下几个方面:1. 环保性能的提高:未来硝化纤维素转印膜的环保性能将得到进一步提高,减少对环境的污染和对人体的危害。2. 功能性能的增强:未来硝化纤维素转印膜的功能性能将得到进一步增强,可以实现更多的应用需求。3. 生产工艺的改进:未来硝化纤维素转印膜的生产工艺将得到进一步改进,提高生产效率和产品质量。4. 应用领域的拓展:未来硝化纤维素转印膜的应用领域将得到进一步拓展,可以应用于更多的领域和行业。使用PVDF转印膜具有高覆盖率和高保真度。
从膜的质地上来看,较重要的指标就是单位面积上能够结合的蛋白的量。硝酸纤维素膜(NC膜)的结合能力主要与膜的硝酸纤维素的纯度有关,市场上有些硝酸纤维素膜(NC膜)通常会还有大量的醋酸纤维素,因而降低了蛋白的结合量。如果采用的是100%纯度的硝酸纤维素, 保证了较大的蛋白结合量,可达80-150μg/cm2。由于100%的纯度,因而也有效减少了非特异性的结合,降低杂交背景,无需高严谨度的洗脱步骤。其次,膜的强度和韧性也是需要考虑的因素。常规的硝酸纤维素膜比较脆,漂洗一两次就会破损,不能反复使用。PVDF膜即聚偏二氟乙烯膜是蛋白质印迹法中常用的一种固相支持物。膜材料易于加工和安装。四川PVDF转印膜供应商
PVDF转印膜材料具有良好的温度稳定性。广州透明反光转印膜价格表
PVDF本质是一种疏水性的聚合物,在水溶液中不会浸湿,为了在水性缓冲液和系统中使用PVDF膜,首先必须将其浸泡在50%(v/v)或更高浓度的醇溶液中。(PVDF膜在使用时需预处理,用甲醇处理的目的是活化膜上的正电基团,使其更容易与带负电的蛋白结合。)甲醇、乙醇和异丙醇都适合浸泡这种膜。随着膜的外观从不透明到半透明,完全浸湿是显而易见的。之后必须用水反复冲洗以去除醇类,经预处理的膜可以直接放入转印缓冲液中平衡。一旦膜被浸湿,蛋白结合可通过蛋白与膜的接触而实现。由于蛋白与膜的结合贯穿整个膜的厚度(深度),结合能力是由孔的内部表面积来决定的,随着膜孔径的不断减小,膜对低分子量的蛋白结合就越牢固。0.2um PVDF膜内部表面积大约是0.45um PVDF 膜的三倍,使其吸附能力更高。PVDF膜是疏水性的,一般大于20kD的蛋白就可以用0.45μm的膜,小于20kD的蛋白就要用0.2μm的膜。广州透明反光转印膜价格表
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