青岛3K超滤离心管使用方法

我们通常会以1/3到1/6甚至更低的区间来选择超滤管的孔径，通常更小的孔径会使回收率提高但是超滤的时间也会比较长。一定范围内，超滤的回收率和速度是一对矛盾体，因此可以通过优化孔径的选择，在回收率可以接受的条件下选择较大的孔径，来提高超滤的速度。低温如< 10 ℃，液体的粘度会增加，流动性会降低，因此液体的跨膜速率也会降低。适当提高超滤温度，往往能够提高超滤的速度。有些客户需要做几十ml到几百ml样品的浓缩或者缓冲液置换，但是却使用1支或几支15ml的超滤管反复离心来完成操作，这样必然造成时间上的浪费。怎么办？一定要挑选适合处理量的产品，减少不必要的反复离心从而提升超滤的效率。使用超滤离心管时应注意避免与酸、碱等化学物质接触，以免损坏其结构和性能。青岛3K超滤离心管使用方法

可以通过多个超滤管同时超滤来降低浓度，而后者通过改变不同的缓冲液直到没有蛋白质沉淀。用来浓缩蛋白质的。如果要更换缓冲液，当总蛋白溶液浓缩到1毫升左右时，轻轻添加一个新的缓冲液〈用0.22um超滤膜超滤后〉，然后连续浓缩到1毫升左右。浓缩液的之后体积取决于所需的蛋白质浓度，通常不超过500 ul，但也要浓缩到200 ul以下。根据每次至少10次的体积浓度计算，1000次以上的3次基本可以达到更换缓冲器的目的。提取之后浓缩蛋白的操作在冰上进行。黄色设备头(200ul)用于提取之后的蛋白质浓缩物。设备头沿设备头边缘轻轻插入。将蛋白溶液轻轻吹匀。注意不要触摸超滤膜。吸取浓缩液，一次较多吸200 ul，直至耗尽。之后留在管底的浓缩液不需要吸收，否则太困难，可能损坏超滤膜。之后，在无超滤膜的超滤管中加入milliq水，以防止超滤膜干燥。青岛3K超滤离心管使用方法超滤离心管通常有不同孔径大小的超滤膜供选择，以便过滤出不同大小范围内的目标分子。

超滤离心管的分子量选择：按照样品量和目标分子量选择适当的超滤离心管，为了得到较高的收率，所选滤膜的截留分子量MWCO建议选择所需截留分子大小的1/3左右，不超过目标分子量的一半。因为超滤膜上孔径是平均孔径，膜上的孔并非均匀，离心高压下也可能渗漏，因此截留孔径越小，流速越慢但截留比例更大。如果样本浓度低体积大，可选择较小容积的超滤管多次重复加样离心。如果同时需要脱盐和去除可溶小分子杂质，可将待浓缩样品稀释到超滤管较大容积再离心，重复2次可除去99%盐。避免过长时间或者过速离心，虽然优良品质的产品都有防死端设计，可避免过度离心造成膜表面干而造成不可逆吸附。避免过度浓缩，体积越小，越容易因表面吸附而损失得率。离心后用Tips轻轻吹吸几次滤膜截留的溶液，必要时补加一定体积的缓冲液冲洗膜表面，有助于减少膜表面吸附，能提高回收率。尽量避免Tips接触膜表面。

超滤作为一种膜分离技术，普遍应用于生物样品的浓缩、脱盐和缓冲液置换，其原理是溶液在力的作用下，通过超滤膜孔径的筛滤，大分子量的颗粒被截留下来，而水、溶剂和低分子量溶质则允许透过膜，从而达到浓缩、脱盐和缓冲液置换的目的，这种方法较大的特点是操作简便、快速、高效，可同时浓缩和纯化分子。如何使用超滤心离心管1. 使用角转子加到超滤装置上，较大样本量为15 毫升（Anavo Ultra-15）。2. 将带盖过滤装置放入离心机转子内; 用一个类似的装置来平衡。3. 使用定角转子时，将薄膜面板朝上定位，较大旋转 5000 xg，旋转 30 分钟。4. 为了回收浓缩的溶质，在过滤装置的底部插入一个移液管，通过左右扫动的方式将样品抽离，以保证总回收率。超滤液可贮存在离心管中。说明：为达到较佳回收率，离心后应立即取出浓缩样品。超滤离心管通常具有标准化设计，使其易于与其他实验室设备集成使用。

选择合适的超滤管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书，注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。新买来的超滤是干燥的，使用前加入超纯水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。直接损坏超滤膜。开始离心超滤（离心机预冷至4度）。不同离心机的转速rpm换算成g之后，有所不同。超滤离心管还可以用于检测样品中的微生物或细胞，并进行分析和研究。青岛3K超滤离心管使用方法

使用超滤离心管时应注意避免振动或震动造成样品混乱并影响分离效果。青岛3K超滤离心管使用方法

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