核酸是由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物,包括脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)两类,是生命的基本物质之一。病毒结构单一,就只含有一种核酸和蛋白质,因此检测出特征核酸就检测出了病毒。病毒属于寄生生物,采样后体外无法存活,如果不能及时检测,就需要放入病毒保存液中。为了保护病毒检测环境的安全性,就需要加入裂解盐来灭活病毒,释放出可以被检测的核酸即可。
非灭活型:除了灭活型的病毒保存液,还有非灭活型的病毒保存液,不含裂解盐,但是保存的病毒完整性更好,检出率更高,除了核酸检测外还可以用于其他研究。灭活型病毒保存液则使用上更安全,操作环境要求也不用那么严格,各有各的优势,非灭活病毒保存液的成分主要为Hank’s液基础,在Hank’s液基础上,添加了很多抑菌成分、冷冻保护剂等成分 而病毒本身在体外很快就会裂解掉影响后续检测,所以在保存和运输时,就需要加入病毒保存液。陕西一次性使用病毒保存液什么价格
而不灭活的可以主要是以运送培养基为基础改良的病毒维持液型保存液。它能够保持病毒在体外的活性以及抗原和核酸的完整性,保护病毒蛋白质外壳不易分解,较大程度地保持了病毒样本的原始性。这种保存液除了用于核酸提取检测外,还能用于病毒的培养、分离以及抗原的检测等,但是采样后长时间保存需要保持严格低温。
对于不同的检测目的,需要选择不同的病毒采样管,目前使用的这两种病毒采样管各有特点。为了满足不同的检测要求,以及不同的病毒检测实验室条件,采样不同的病毒采样管是非常有必要的。但是需要注意的是:不管是灭活型还是非灭活型,在采样之前的病毒采样管都必须严格灭活杀菌,保证管内没有其他微生物,致使采样后病毒分解或其它影响造成错误检测。拭子取样后,如果使用质量欠缺的采集工具或保存液,会影响后续的检测结果甚至造成误诊的假阳性,因此一定要选择具有专业资质厂家生产的病毒采样管。 中国灭活病毒保存液品牌企业能保护病毒核酸不被降解,从而使后续能通过NT-PCR进行检测。
病毒保存液适用于、流感病毒、手足口病毒等常见病毒样本采样保存和运输工作,是采样管内浸没采样拭子病毒样本的一种用来保护病毒的被检测物质的液体,可采集咽拭子、鼻拭子或者是特定部位组织样本,储存的样本可用于后续的核酸提取或纯化等临床实验。
病毒保存液通常分为两种,一种是非灭活型,能够保护病毒的蛋白和核酸,另一种是灭活型的,通常含有灭活病毒的裂解盐,裂解蛋白而保护核酸。
灭活型:添加有裂解盐的病毒保存液就是灭活型的病毒保存液,里面含有的Tris、裂解盐、EDTA等主要目的是裂解核酸而释放出核酸,从而通过后续的实时荧光RT-PCR进行核酸检测,以此判断样本是否含有病毒特征核酸,即是否病毒。
灭活型病毒保存液主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解型保存液,液体含有高浓度的裂解盐,能够迅速高效地使待测样本里的病毒蛋白裂解失活,可以有效防止,同时又含有Rnase酶抑制剂,能保护病毒核酸不被降解,后续的NT-PCR实验只要能检测出病毒的核酸既可以做出诊断。而且能够在常温下保存相对较长的时间。
病毒的检测不同于常规的生化检测,病毒本身是一种结构简单的微生物,必须 寄生在活细胞内。采样后,病毒离开寄主细胞,在采样管内其蛋白质外壳和核酸都会很快降解,这样核酸检测时就无法判断初始采集的样本是否含有病毒,容易造成假阴性。 作为核酸检测的第一步样本采集与保存的重要性毋庸置疑很长一段时间市场上的病毒保存液都是直接保存活病毒。
制造保存管的材质应注意选择,有资料提示聚丙烯(Polypropylene)与核酸的吸附有关,特别是在高张力离子浓度时,聚乙烯塑料(Polyethylene)比聚丙烯(Polypropylene)更容易抓住DNA/RNA。聚乙烯-丙烯聚合物(Polyallomer)塑胶与某些特殊处理的聚丙烯(Polypropylene)塑胶容器更适合做DNA/RNA的储存使用。另外,在使用可折断拭子时,保存管应尽量选择高度大于8厘米的容器,以防止在折断拭子时内容物外溅污染。
生产保存液的水:生产保存液使用的超纯水应经过分子量为13,000的超滤膜过滤,以保证去除生物来源的聚合物杂质,例如RNase、DNase和内,不推荐使用普通纯化水或蒸馏水。 非灭活型的主要优点是检出率高,缺点是具有一定的危险性。山西一次性使用病毒保存液采购
病毒保存液的质量,是提高PCR检测阳性率与病毒分离阳性率的关键因素,从根本上决定了病毒采样管的质量。陕西一次性使用病毒保存液什么价格
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