中国澳门培养基制备器定制

配制培养基的原则：调节氧化还原电位(Eh)各种微生物对培养基的Eh要求不同。适宜好氧微生物生长的Eh值一般为+0.3~+0.4V，厌氧微生物只能在+0.1V以下生长，因此，培养好氧微生物必须保证氧的供应，可在培养基中加入氧化剂提高Eh值。调节渗透压多数微生物能耐受较大范围渗透压的变化。培养基中营养物质的浓度过大，会使渗透压过高，使细胞发生质壁分离而抑制微生物生长。低渗溶液则使细胞吸水膨胀易破裂，因此，配制培养基时要掌握营养物质的浓度。常在培养基中加人适量的Nacl以提高渗透压。原料来源的选择力求节约：配制培养基还应遵循力求节约的原则，尽量选用价格便宜、来源方便的原料。特别是在工业发酵中，培养基用量大，更应注意利用低成本的原料，降低产品成本。培养基通常采用高压蒸汽灭菌。中国澳门培养基制备器定制

简单制作培养基，需调整培养基成分，介质中使用的化学物质应该是化学纯品，铜锅或铁锅易导致铜、铁混入培养基，使细菌难以繁殖。用不锈钢锅加热溶解较为适宜。溶解于水的锅子，可用温水加热，随时搅拌，防止结焦。若发现结焦，则不能使用介质，需重新调配。在溶解大多数固体成分之后，用少量热将其全部溶解，直到沸腾。简单制作培养基，需调整培养基的pH值，由于加热消毒过程中培养基的pH值会发生变化，因此应在培养基组分完全溶解后，调整pH值。举例来说，牛肉汁的pH值下降了0.2左右，而肠浸出物的pH值则明显上升。所以，在这一步中，操作者要注重不断探索经验，掌握培养基的很终pH值，保证培养基的质量。在调整pH值后，要将其煮沸几分钟，以利于培养基沉淀。中国澳门培养基制备器定制全自动培养基制备分装系统：两个存储器;存储器高度可选。

培养基的制备：（1）称量：根据培养基的配方,称取适量药品于搪瓷杯中;（2）溶解：用量筒量取所需水量,置电炉上加热,一边搅拌,至完全溶解,加热至沸腾,拔掉电源,待冷却;（3）分装：根据不同需要,立即趁热分装入三角瓶或试管中,分装三角瓶以不超过三角瓶一半为宜,分装试管一般为管长的1/5（需根据试管的大小而定）.液体培养基如乳糖胆盐发酵培养基约分装10毫升左右.（4）塞硅胶塞：装好培养基的试管应塞上硅胶塞,松紧合适,紧贴管壁,不留缝隙,约1/2塞入内,这样即可过滤空气,避免杂菌侵入,又可减缓培养基水分的蒸发.（5）包装：三角瓶棉塞头部应用锡箔纸包扎,试管集中于试管篓.2、无菌水的制备：（1）用10ml移液管量取9.2ml蒸馏水（稀释水）装入试管中.（2）用100ml量筒量取95ml蒸馏水（稀释水）装入150ml的三角瓶中.可置少许玻璃珠于三角瓶内,防止暴沸.（3）量取240ml蒸馏水（稀释水）于250ml的三角瓶中,塞上瓶塞用牛皮纸包扎好,高压灭菌备用。

培养基配制：配制用水，培养基的大部分是水，所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准，水的电阻应为200万欧姆，一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。培养基：培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基，以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3（或HCl）调pH至7.2-7.4，若pH值超过7.6或远低于6.8，则大多数细胞不能生长。RPMI-1640不耐高压灭菌，使用前需经灭菌0.22μm孔径滤膜滤过处理。血清：培养中常使用小牛血清（或胎牛血清）。血清亦不能高压灭菌，无菌的小牛血清需在56℃水浴30分钟灭活补体，置4℃冰箱存放待用。配制时含量视培养细胞种类、时间而定，一般用10—15%。由于血清成分复杂、条件不易控制，可选用无血清培养基。培养基由于富含营养物质，易被污染或变质。

培养基配制后一般都有沉渣或混浊出现医学，需过滤成清晰透明后方可使用，常用的过滤方法如下：1.液体培养基：液体培养基必须清晰，以便观察细菌的生长情况，常用滤纸过滤，亦可在加热前加入用水稀释的鸡蛋白（1000ml培养基用1个鸡蛋白）在100℃加热后保持60～70℃，40～60分钟，使其不溶性物质附于凝固的蛋白上而沉淀，然后再用虹吸法吸出上清液或以滤纸过滤。2.固体培养基：如系琼脂培养基，于加热融化后需趁热以绒布或两层纱布中夹脱脂棉过滤；亦可用自然沉淀法，即将琼脂培养基盛人铝锅或广口搪瓷容器内，以高压（103.43kPa）蒸汽融化15分钟后，静置高压锅内过夜，次日将琼脂倾出，用刀将底部沉渣切去，再融化即可收清晰的琼脂培养基。微生物只有在营养物质浓度及其比例合适时才能良好生长。中国澳门培养基制备器定制

培养基制备器必须附有该批培养基制备记录副页或明显标签。中国澳门培养基制备器定制

高压灭菌造成培养基结焦焦化问题：在实验过程中，检测人员发现在高压灭菌后的培养基有结焦焦化现象。微生物认为造成这种现象是：控制培养基在容器中不要超过百分之八十，避免填充过多。注意控制高压灭菌时间过长（115-116度）二十分钟即可，温度不超过121度，而且灭菌后的培养基在高温环境中不要长时间存放。以上原因都会导致培养基结焦焦化。贮存：培养基在30℃下放置1天，无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。中国澳门培养基制备器定制