培养基的储存:干粉培养基应保存在阴凉干燥处,要避免阳光直射;未开瓶的培养基在室温下的较长保存2年,开瓶后的干粉培养基易吸湿,应注意防潮并在6个月内用完。应定期对储存中的培养基进行常规检查,如容器密闭性复查、一次开封日期、内容物的感官检查,如果培养基发生结块、颜色异常和其他变质迹象就不能再使用。培养基的制备和使用是微生物实验室检测工作的重要环节,培养基自身质量的优劣、保存是否得当、配制使用是否正确等都直接影响到检测结果的准确性。同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。辽宁培养基制备器报价
微生物培养基制备:溶解灭菌后,盘子上无不溶性结晶紫、无紫色斑;与未溶解和消毒的盘子相比,盘子上有结晶紫和紫色斑点。因此正确的步骤顺序是在高压灭菌前需要进行培养基煮沸溶解。先煮沸溶解后冷却至二十五度,确定pH值;对需要高压灭菌的介质取平均值,高压灭菌后冷却至二十五度,这两种状况测量培养基pH值,固体培养基至少检测两个点,取它们的平均值。控制培养基在容器中不要超过百分之八十,避免填充过多。注意控制高压灭菌时间过长(115-116度)二十分钟即可,温度不超过121度,而且灭菌后的培养基在高温环境中不要长时间存放。辽宁培养基制备器报价在液体培养基中的培养称为液中培养、液体培养或液内培养。
培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源(生长因子)等。(1)碳源:能为微生物的代谢提供碳元素的物质。如CO2、NaHCO3等无机碳源;糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。异养微生物只能利用有机碳源。单质碳不能作为碳源。(2)氮源:能为微生物的代谢提供氮元素的物质。如N2、NH3、NO3-、NH4+(无机氮源)蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨(有机氮源)等。只有固氮微生物才能利用N2。培养基还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如,培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素,培养霉菌时须将培养基的pH调至酸性,培养细菌是需要将pH调至中性或微碱性,培养厌氧型微生物是则需要提供无氧的条件。
微生物发酵培养基配制注意事项:①养分浓度和配比合适:微生物只有在培养基中养分浓度合适的情况下才能生长良好是合适的。当养分浓度过低时,不能满足微生物正常生长的需要。②微生物培养基pH条件控制:培养基的pH必须控制在一定范围内,以满足不同种类微生物的生长繁殖或产生代谢物。各种微生物生长繁殖或代谢产物产生的较佳pH条件不同。通常细菌和放线菌适合在7~7.5pH范围内生长,酵母菌和霉菌一般在4.5~6pH范围内生长。③微生物培养基原料来源选择:培养基配制时,应尽可能使用低廉易得的原料作为培养基成分。尤其在发酵行业,培养基用量大,使用成本较低原料实现产品附加价值。例如在微生物单细胞蛋白的工业化生产过程中,制糖业含蔗糖废液、乳业含乳糖废液、大豆废液工业和黑色废物、造纸工业中含有戊糖和己糖的亚硫酸盐纸浆等经常被作为培养基原料使用。④成品培养基灭菌处理、为了获得微生物的纯培养物,必须避免被细菌污染,所以对使用的设备和工作场所进行消毒和消毒。对于微生物培养基要进行严格的灭菌处理。全自动培养基制备仪主要特点:保证细菌不被引入容器中。
培养基的灭菌:培养基的灭菌多采用高压蒸汽灭菌,各种培养基的灭菌时间和压力,按其成分不同而定。普通培养基采用121℃、灭菌15min,但容器和装量较大时,应延长至20min。含糖培养基115℃、灭菌30min。含糖、血清、鸡蛋等培养基可用流动蒸汽及血清凝固器80—100℃、30min,连续3d,间歇灭菌。血清或组织液,采用低热56—58水浴1h,连续5—6d灭菌,一些遇高温即被破坏的物质如尿素、腹水等,可用细菌过滤器,过滤除菌。高压灭菌应严格按照操作规程执行,必须逐渐加热,彻底排除灭菌器内的空气,再逐渐升压保持预定的压力和时间,达到全部杀灭微生物。以上的灭菌时间和温度要经过验证确认,如不同类型培养基混合一起灭菌时宜采用115℃、灭菌30min为好。干热天菌、高压蒸汽灭菌方法主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。辽宁培养基制备器报价
液体培养基在静止的条件下,在菌体或培养细胞的周围,形成透过养分的壁障,养分的摄入受到阻碍。辽宁培养基制备器报价
加棉塞:分装完毕后,需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是过滤空气,避免污染。棉塞应采用普通新鲜、干燥的棉花制作,不要用脱脂棉,以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用。制作棉塞时,要根据棉塞大小将棉花铺展成适当厚度,揪取手掌心大小一块,铺在左手拇指与食指圈成的圆孔中,用右手食指插入棉花中部,同时左手食指与姆指稍稍紧握,就会形成1个长棒形的棉塞。棉塞作成后,应迅速塞入管口或瓶口中,棉塞应紧贴内壁不留缝隙,以防空气中微生物沿皱折侵入。棉塞不要过紧过松,塞好后,,以手提棉塞、管、瓶不下落为合适。棉塞的2/3应在管内或瓶内,上端露出少许棉花便于拔取。塞好棉塞的试管和锥形瓶应盖上厚纸用绳捆札,准备灭菌。辽宁培养基制备器报价