培养基的实验室制备:1.水:除特定要求,实验室用水的电导率在25℃下应不高于25uS/cm(相当于电阻率≥0.4MΩcm)。微生物污染应不超过103CFU/mL,较好低于102CFU/mL。应根GB/T5750.12或其他有效方法,定期检验微生物的污染。2.称量和复水:称量所需量的脱水培养基(注意防止吸入粉末,尤其是含有有害物质的培养基粉末),先加入少量水,充分混合(注意避免培养基结块)后再加水至所需的量。3.溶解和分装:脱水培养基加水后适当加热,并不搅拌使其快速溶解,必要时,重新溶解。含琼脂的培养基在加热溶解前应浸泡几分钟。培养基制备器使用注射器将添加剂加入,确保了添加剂的无菌添加。湖南琼脂灭菌 培养基制备器
简单制作培养基,需要完成以下几个主要步骤:需要对其进行消毒处理,普通介质使用121℃高压蒸汽灭菌15分钟。本发明适用于各种介质的制备,如无特殊要求,可用于灭菌。一些热成分,如碳水化合物,应该单独制备20%或更多的浓缩液,过滤或间断杀菌,然后通过无菌操作技术加入到培养液中。在低温下,明胶培养基也能杀菌。血、体液及素应经无菌处理后,加至约50℃冷却培养基中。需要对培养基的质量进行检测。每次处理完培养基,都要仔细检查,如破损、浸渍、颜色异常、棉塞污染等,要进行筛选和弃置,才能确定pH值。培养基培养一晚,若有细菌生长,培养基将被丢弃。常规菌株接种1×2管或瓶培养基,24h培养,对生长不良或无菌的菌株进行培养,追踪其产生原因,并反复接种。如不发生变化,应丢弃培养基,禁止使用。安徽大容量 培养基制备器培养基制备器在分装过程中,温度始终保持在设定的分装温度。
调pH:虽然培养基中含有缓冲物质成分,能使培养基的pH尽可能的保持在要求的范围内,但是配出的培养基若不符合要求,就要进行必要的调整。如果有已校准pH计,可用pH计。如果没有,可用精密的pH试纸,再根据需要用1mol/L氢氧化钠或1mol/L盐酸(微调可用0.1mol/L氢氧化钠或0.1mol/L盐酸)调制所需的pH。培养基的pH一般为7.4~7.6,也有酸性或碱性的。用氢氧化钠调整的需要高压灭菌的培养基,在调整pH时要调至高出所需0.1个~0.2个单位,因用氢氧化钠提哦啊正时,高压灭菌后,培养基大的pH要降低0.1~0.2。如培养基中含有碳酸钙成分,可不调pH。
Systec培养基准备器的灭菌:Systec培养基准备器能够保证快速温和的制备标准和高敏感性培养基。的加热冷却系统加上均匀的搅拌,大程度上减低了对培养基的热应力,保证了培养基的营养性。Systec培养基准备器的操作高度安全:灭菌开始前,会有一个程序自动检查整个系统的气密性,例如:锅盖的密封圈是否完好,这能够避免培养基在灭菌过程中突然漏气引起卸压,此外,Systec培养基准备器有4个温度/压力检测器,保证用户及工作环境的高度安全。锅盖上装有的过压安全保护装置,在电子检测系统失效时,自动卸压以保障安全。全自动培养基制备分装系统:一键选择培养皿类型;整合数据库,预设培养皿尺寸选择程序。
培养基各成份的混合和溶化:培养基所用化学药品均应是化学纯的。使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅,以防有微量铜或铁混入培养基中,使细菌不易生长。好好使用不锈钢锅加热溶化.也可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中溶化时、可先用温水加热并随时扰动,以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用,应重新制备。待大部分固体成分溶化后,再用较小火力使所有成分完全溶化.迄至煮沸。如为琼脂培养基,应先用一部分水将琼脂溶化,用另一部分水溶化其它成分,然后将两溶液充分混合。在加热溶化过程中,因蒸发而丢失的水分,较后必须加以补足。全自动培养基制备仪主要特点:不会产生气泡。安徽大容量 培养基制备器
调节氧化还原电位(Eh) 各种微生物对培养基的Eh要求不同。湖南琼脂灭菌 培养基制备器
培养基在使用前通过高压或过滤灭菌。防止污染应该注意以下事项:确认工作细胞库是否被污染,确认毒种工作种子批是否被污染,确认所用培养基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染,均可用细菌、及支原体无菌试验来确认并排除。同时要对无菌试验培养基的灵敏度进行验证。实际生产中,可以从配制好的培养液中取少量加入营养琼脂于恒温培养箱内培养,48小时即可观察有无污染。其它:高压灭菌设备、过滤除菌设备均应进行验证,确保灭菌和除菌效果;前者应在投产前及其后的每6个月进行验证,后者应在每次除菌前、后进行验证工作(至少应在除菌后进行一次)。另外,应将有毒区与无毒区严格分开,并有各自独自的空气净化系统及孵室,有毒区对无毒区应保持相对负压,防止病毒对培养细胞(尤其是细胞库)的污染。湖南琼脂灭菌 培养基制备器