培养基配置原则:选择适宜的营养物质,总体而言,所有微生物生长繁殖均需要培养基含有碳源、氮源、无机盐、生长因子、水及能源,但由于微生物营养类型复杂,不同微生物对营养物质的需求是不一样的,因此首先要根据不同微生物的营养需求配制针对性强的培养基。自养型微生物能从简单的无机物合成自身需要的糖类、脂类、蛋白质、核酸、维生素等复杂的有机物,因此培养自养型微生物的培养基完全可以(或应该)由简单的无机物组成。在该培养基配制过程中并未专门加入其他碳源物质,而是依靠空气中和溶于水中的CO2为氧化硫硫杆菌提供碳源。就微生物主要类型而言,有细菌、放线菌、酵母菌、霉菌、原生动物、藻类及病毒之分,培养它们所需的培养基各不相同。在实验室中常用牛肉膏蛋白胨培养基(或简称普通肉汤培养基)培养细菌,用高氏I号合成培养基培养放线菌,培养酵母菌一般用麦芽汁培养基,培养霉菌则一般用查氏合成培养基。液体培养基具有进行通气培养、振荡培养的优点。培养基灭菌 培养基制备器安装调试
微生物检验培养基制备的要点:培养基摆斜面,灭菌完成后,将试管中的中海琼脂培养基放在木棒或玻璃棒上,同时它很热,并且有适当的坡度。冷却后使琼脂凝固并变成斜面。斜面长度不超过试管的二分之一。微生物培养基质检,检验培养基灭菌后,发现有破损,浸水,颜色异常,棉塞被培养基污染。所有这些都必须丢弃,不能重复使用,并确定其很终pH值。无菌检查和效果检查也是必需的。无菌检查是取1~2瓶无菌培养基,37℃孵育一两天,确认无细菌生长;效果检查是将标准菌株接种到相关培养基上进行细菌检查。动物的生长、形态和生化条件与已知条件一致。两个条件都合格,准备好的培养基就可以使用了。河南进口培养基制备器在发酵工业中,培养基用量很大,利用低成本的原料更体现出其经济价值。
培养基的质量测试:每批培养基制备好以后,应仔细检查一遍,如发现破裂、水分浸入、色泽异常、棉塞被培养基沾染等、均应挑出弃去。并测定其较终pH。将全部培养基放入36±1°C恒温箱培养过夜,如发现有菌生长,即弃去。用有关的标准菌株接种1~2管或瓶培养基,培养24~48小时,如无菌生长或生长不好。应追查原因并重复接种一次,如结果仍同前,则该批培养基即应弃去,不能使用。培养基的保存:培养基应存放于冷暗处,较好能放于普通冰箱内。放置时间不宜超过一周,倾注的平板培养基不宜超过3天。每批培养基均必须附有该批培养基制备记录副页或明显标签。
培养基的物理灭菌方法:(一)加热灭菌法:加热可破坏微生物中酶、蛋白质和核酸,导致微生物死亡。加热灭菌又分干热灭菌法和湿热灭菌法。在同一温度下,湿热灭菌的效果比干热灭菌好。主要是因湿热灭菌时,有水分存在,蛋白质容易变性。水分又易使微生物膜壁润湿,湿热的穿透力比干热大。常用的有火焰灭菌法与干热空气灭菌法两种。(二)紫外线灭菌法:是指用紫外线照射杀灭微生物的方法。一般用于灭菌的紫外线波长是200~300nm,灭菌力较强的波长是253.7nm。紫外线作用于核酸蛋白促使其变性,同时空气受紫外线照射后产生微量臭氧,从而起共同杀菌作用。紫外线进行直线传播,可被不同的表面反射,穿透力微弱,但较易穿透清洁空气及纯净的水。同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。
培养基的配置应该注意的几大步骤:常用玻璃仪器的准备制备培养基所用的吸管、锥形瓶、毛细吸管、平皿等玻璃仪器用前要用肥皂水洗刷后用清水冲洗干净,晾干后备用。(1)平皿用纸或布包好,或装在金属盒内,于121℃高压蒸汽菌3min后烘干,备用。(2)试管管口用棉花塞或硅氟塑料试管塞塞好,再用布或报纸包扎好,121℃高压蒸汽灭菌20℃后烘干,备用。(3)吸管及滴管先用少许棉花塞于吸口端(防止污染物吸出,或橡皮帽内的气体污染),然后用纸包后或装入金属吸管筒内,于121℃高压蒸汽灭菌20min后烘干,备用。其他玻璃器皿均应按上法处理,也应装金属筒内160℃干热灭菌2h后,备用。全自动培养基制备仪主要特点:不会产生气泡。全自动培养基制备器厂家
要根据不同微生物的营养需求选择适宜的营养物质,配制针对性强的培养基。培养基灭菌 培养基制备器安装调试
分装:配制好的培养基根据不同的用途分装在三角瓶、试管等容器中,分装试管,如果试管量很大,可用自动分液器。如果试管量少,可用漏斗分装。分装量不超过容器容积的三分之二。三角瓶以不超过容积的二分之一为宜;琼脂斜面以不超过试管长度的五分之一为宜,灭菌后,摆成的斜面为培养基的三分之一、底层为三分之二的量为宜;半固体琼脂分装量为试管长度的的三分之一;用来接种或保菌的高层琼脂,分装量为试管长度的四分之一或三分之一,用来接种厌氧菌的要达到三分之二;琼脂平板,内径90mm的以13ml~15ml为宜,内径70mm的平板为8ml~10ml,制成的琼脂平板。培养基灭菌 培养基制备器安装调试