吉林Systec培养基制备仪

培养基pH值不在标准范围内的问题：出现此类情况有很多原因，生物大致分为①厂家质量：出厂时pH不稳定。②灭菌问题：是蒸压过高或杀菌时间过长，导致葡萄糖焦化，因此，pH值降低。③存放周期：保存时间超过保质期或结块水的质量有问题。④水质问题：采用去离子水/蒸馏水/纯净水等，不要采用矿泉水和自来水。⑤存储温度：储存温度过高。⑥光线直射等六种原因，可逐一检查排除解决问题。这样的培养基称之为鉴别培养基。例如用以检查饮水和乳品中是否含有肠道致病菌的伊红美蓝培养基就是一种常用的鉴别性培养基。牛肉浸液中加入适量的蛋白胨、氯化钠、磷酸盐，调节pH7.2～7.6，经灭菌处理后，即为基础液体培养基。吉林Systec培养基制备仪

培养基的性能测试：1.外观控制：制备好的培养基应有相应的颜色，一般的培养基应澄清、无浑浊、无沉淀。使用前应检查培养基的颜色是否发生变化，是否蒸发/脱水。2.污染控制：从每批制备好的培养基中选取部分进行污染测试(无菌试验)，确定无微生物生长方可使用。3.性能测试：(1)测试菌株选择：测试菌株是具有其表示种的稳定特性并能有效证明实验室特定培养基较佳性能的一套菌株。(3)半定量测试方法（改进的划线法接种法）。(4)定性测试方法（平板接种观察法）。用接种环取测试菌培养物，在测试培养基表面划平行直线。吉林Systec培养基制备仪液体培养基在静止的条件下，在菌体或培养细胞的周围，形成透过养分的壁障，养分的摄入受到阻碍。

马铃薯培养基的分装：1.根据需要将培养基分装于不同容量的三角烧瓶、试管中。分装的量不宜超过容器的2/3以免灭菌时外溢。2.琼脂斜面分装量为试管容量的1/5，灭菌后须趁热放置成斜面，斜面长约为试管长的2/3。3.半固体培养基分装量约为试管长的1/3，灭菌后直立凝固待用。4.高层琼脂分装量约为试管的1/3，灭菌后趁热直立，待冷后凝固待用。5.液体培养基分装于试管中，约是试管长度的1/3。6.琼脂平板：将灭菌(或加热融化)后的培养基冷至50℃左右，以无菌手续倾人灭菌平皿内，内径225px的平皿倾注培养基约13～15ml，轻摇平皿底，使培养基平铺于平皿底部，待凝固后即成，倾注培养基时，切勿将皿盖全部启开，以免空气中尘埃及细菌落入新制成的平板培养基(简称平板)，表面水分较多，不利于细菌的分离，通常应将平皿倒扣搁置于37℃培养箱内约30分钟待平板平面干燥后使用。

培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源（生长因子）等。（1）碳源：能为微生物的代谢提供碳元素的物质。如CO2、NaHCO3等无机碳源；糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。异养微生物只能利用有机碳源。单质碳不能作为碳源。（2）氮源：能为微生物的代谢提供氮元素的物质。如N2、NH3、NO3-、NH4+（无机氮源）蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等。只有固氮微生物才能利用N2。培养基还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时须将培养基的pH调至酸性，培养细菌是需要将pH调至中性或微碱性，培养厌氧型微生物是则需要提供无氧的条件。基础培养基各种微生物的营养要求虽不相同，但多数微生物需要的基本营养物质相同。

培养基的灭菌：一般培养基可采用121°C高压蒸汽灭菌15分钟的方法。在各种培养基制备方法中，如无特殊规定，即可用此法灭菌。某些热敏成分，如糖类，应另行配成20%或更高的浓液，以过滤或间歇灭菌法消毒，以后再用无菌操作技术、定量加于培养基。明胶培养基亦应用较低温度灭菌。血液、体液和等则应以无菌操作技术抽取和加入于经冷却约50°C左右的培养基中。琼脂斜面培养基应在灭菌后立即取出，冷至55℃-60℃时，摆置成适当斜面，待其自然凝固。微生物只有在营养物质浓度及其比例合适时才能良好生长。吉林Systec培养基制备仪

液体培养基，80%～90%是水，其中配有可溶性的或不溶性的营养成分的培养基。吉林Systec培养基制备仪

配制好的培养基保存：灭菌以后培养基应该迅速冷却至所需温度，避免长时间保存在灭菌锅内，造成过度灭菌，影响培养基的营养成分或选择性效果。所配制的培养基的量，应该是在较长保存期限内正好使用完。含染料的培养基应闭光保存;倒好的琼脂平板如果配制的当天未使用完，应于冷藏保存，如果保存时间超过2天，应将其放入密封的塑料袋中保存;配好的肉汤类培养基如果保存时间超过2个星期，应将其放在带有螺旋盖的试管或其它密闭的试管或容器中防止蒸发。吉林Systec培养基制备仪

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