江苏琼脂灭菌 培养基制备仪

培养基制备仪-培养基使用规程：1.目的：规范本中心微生物实验室培养基的使用和管理。2.适用范围，本规程适用于培养基的储存、融化和废弃等。3.职责，3.1检验人员：按照本规程规范使用培养基、定期检查培养基是否失效。3.2科室负责人：负责指导、监督检验人员规范使用培养基。4.使用程序，4.1培养基的储存，4.1.1除特殊说明和标准规定，通常情况下基础培养基（如营养琼脂培养基）应在4℃冰箱中保存不超过3个月，或在室温（20℃）下保存不超过一个月。一般培养基在受热、吸潮后，易被细菌污染或分解变质，因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。江苏琼脂灭菌 培养基制备仪

培养基的称量和溶解：小心称量所需量的脱水合成培养基（必要时佩戴口罩或在通风柜中操作，以防吸入含有有毒物质的培养基粉末），先加入适量的水，充分混合（注意避免培养基结块），然后加水至所需的量后适当加热，并重复或连续搅拌使其快速分散，必要时应完全溶解。含琼脂的培养基在加热前应浸泡几分钟。注意：培养基的加热溶解或高温灭菌盛放使用的容器不得为铜锅或铁锅，以防有微量铜或铁混入培养基中，使细菌不易生长。较好使用不锈钢锅加热溶化，可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中溶化时、可先用温水加热并随时搅动、以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用，应重新制备。江苏琼脂灭菌 培养基制备仪高压蒸汽灭菌一般使培养基pH降低，应在配制培养基时加以调节。

培养基的分装：大批量配制时使用的自动分配器须经校准和确认。每次使用前后，均要对分配器的管道系统进行冲洗，在分装无菌培养基前，则要采用无菌硅胶管。固体培养基一般分装在250ml、500ml锥形瓶中，高压灭菌后根据需要分装平皿或试管。平皿：倾注平皿，应在无菌室中放置3—4h，如用塑料平皿须在35℃培养箱中倒置30—60min。让水蒸汽自然蒸发。斜面：制备低层斜面分装于试管，约占容积1/5，灭菌后趁热斜放在细玻璃棒和木杆上，使成斜度，分装使注意管口和瓶塞上勿沾有培养基，如沾有培养基应用布抹去，以避免污染。

培养基制备仪：培养基的种类繁多，但制备的方法大同小异，一般可分为6个步骤：用水、称量、溶解复水、灭菌、pH测定、保存。1、必须选用专门纯净水或者经消毒过后的无菌水。2、培养基进行复水的容器不得用铜锅或铁锅，放置离子混入培养基中，影响微生物的生长。3、容器的体积须大于复水后培养基总体积的2倍，预防出现溢出情况。4、在对培养基进行加热时，若培养基内含有琼脂粉成分，则需要将其充分浸泡一段时间。加热的过程中不断进行搅拌防止出现培养基结底炭化从而造成成分损害。部分培养基则需要使用沸水进行加热，预防发生局部烧焦及沸腾溢出。5、琼脂类培养基进行再融化时应使用沸水浴或流动蒸汽进行加热，较多只能加热两次，第二次再融化后仍未用完的培养基应弃去。6、而当对培养基实施灭菌时，需严格按照说明规范操作。但是也不能盲目按照说明的时间进行，需结合实际情况，合理调节灭菌时间，防止出现培养基灭菌过度而造成的成分变性。控制培养基的条件，控制培养基的pH配制培养基必须根据微生物的特点调节pH。

含琼脂的培养基有时在平板上不凝固或凝固不好问题：在此种情况下，建议对于需要高压灭菌的培养基,倒入平板前先摇一摇。主要是琼脂培养基的分子量比较大，在冷却过程中容易沉淀到底，造成琼脂不能均匀分布。对于无需高压灭菌的培养基，不能直接煮沸溶解后倒入平板、需要重复三至五次煮沸溶解过程，因一次无法保证琼脂完全溶解。微生物培养基成分中含有染料或指示剂；不同批次的粉状培养基含水量不同。一般要求≤6。含水量越高，颜色越深；研磨时间越长，颜色越深等三个原因。在配制用于观察和定量测定微生物生长状况的合成培养基时，常需在培养基中加入少量螯合剂。江苏琼脂灭菌 培养基制备仪

按一般微生物生长繁殖所需要的基本营养物质配制的培养基即成为基础培养基。江苏琼脂灭菌 培养基制备仪

培养基制备技术：一、玻璃器皿的清洗：在制备培养基的过程中，首先要使用一些玻璃器皿，如试管、三角瓶、培养皿、烧杯和吸管等。这些器皿在使用前都要根据不同的情况，经过一定的处理，洗刷干净。有的还要进行包装，经过灭菌等准备就绪后，才能使用。1、新购的玻璃器皿：除去包装沾染的污垢后，先用热肥皂水刷洗，流水冲净，再浸泡于１～２％的工业盐酸中数小时，使游离的碱性物质除去，再以流水冲净。对容量较大的器皿，如大烧瓶、量筒等，洗净后注入浓盐酸少许，转动容器使其内部表面均沾有盐酸，数分钟后倾去盐酸，再以流水冲净，倒置于洗涤架上将水空干，即可使用。2、用过的玻璃器皿：凡确无病原菌或未被带菌物污染的器皿，使用后可随时冲洗，吸取过化学试剂的吸管，可先浸泡于清水中，待到一定数量后再集中进行清洗。有可能被病原菌污染的器皿，必须经过适当消毒后，将污垢除去，用皂液洗刷，再用流水冲洗干净。江苏琼脂灭菌 培养基制备仪

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