配制培养基的原则:调节氧化还原电位(Eh)各种微生物对培养基的Eh要求不同。适宜好氧微生物生长的Eh值一般为+0.3~+0.4V,厌氧微生物只能在+0.1V以下生长,因此,培养好氧微生物必须保证氧的供应,可在培养基中加入氧化剂提高Eh值。调节渗透压多数微生物能耐受较大范围渗透压的变化。培养基中营养物质的浓度过大,会使渗透压过高,使细胞发生质壁分离而抑制微生物生长。低渗溶液则使细胞吸水膨胀易破裂,因此,配制培养基时要掌握营养物质的浓度。常在培养基中加人适量的Nacl以提高渗透压。原料来源的选择力求节约:配制培养基还应遵循力求节约的原则,尽量选用价格便宜、来源方便的原料。特别是在工业发酵中,培养基用量大,更应注意利用低成本的原料,降低产品成本。干热天菌、高压蒸汽灭菌方法主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。江西自动搅拌培养基制备器
培养基配制:配制用水,培养基的大部分是水,所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准,水的电阻应为200万欧姆,一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。培养基:培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基,以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)调pH至7.2-7.4,若pH值超过7.6或远低于6.8,则大多数细胞不能生长。RPMI-1640不耐高压灭菌,使用前需经灭菌0.22μm孔径滤膜滤过处理。血清:培养中常使用小牛血清(或胎牛血清)。血清亦不能高压灭菌,无菌的小牛血清需在56℃水浴30分钟灭活补体,置4℃冰箱存放待用。配制时含量视培养细胞种类、时间而定,一般用10—15%。由于血清成分复杂、条件不易控制,可选用无血清培养基。上海培养基制备器一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。
制备培养基的操作要点:用过的玻璃器皿:凡确无病原菌或未被带菌物污染的器皿,使用后可随时冲洗,吸取过化学试剂的吸管,可先浸泡于清水中,待到一定数量后再集中进行清洗。有可能被病原菌污染的器皿,必须经过适当消毒后,将污垢除去,用皂液洗刷,再用流水冲洗干净。若用皂液未能洗净的器皿,可用洗液浸泡适当时间后再用清水洗净。洗液的主要成份是重铬酸钾和浓流酸,其作用是将有机物氧化成可溶性物质,以便冲洗。洗液有很强的腐蚀作用,使用时应特别小心,避免溅到衣服、身体和其他物品上。
全自动培养基制备分装系统:1.一键选择培养皿类型;整合数据库,预设培养皿尺寸选择程序。2.全自动程序,无人值守;分装过程无需人工干预。3.运行过程顺滑无声;大程度的削减了噪音。4.铝制表面光滑平坦;易于清洁,无孔隙和裂缝,以防培养基流进去。5.两个存储器;存储器高度可选;220或440个培养皿(高为16.5mm的培养皿)预装培养皿方便;旋转存储器,可整个从Mediafill上取走,方便预装培养皿。6.整合蠕动泵(主泵);*确分装培养基。7.整合蠕动泵(附加剂泵);*确添加附加剂(可选)。8.一体化控制;主机和选配件(附加剂泵)可通过Mediafill触摸屏一起控制。控制培养基的条件,控制培养基的pH 配制培养基必须根据微生物的特点调节pH。
培养基制备器:1.多功能蠕动泵:该仪器的明显特征是高精密度和高速度。可选择从0.1到999ml不等的剂量量配器,实现培养基定量分装,系统运行的精确度达到±0.5﹪。系统自动调整供给样品剂量保证了重现性结果。2.自动管阀:经济的分配法。在培养基器皿中事先选好一定的轻微的余压来推动样品流动。MediaPreo控制阀门开关。容量一达到所需,MediaPrep就会开始运行样品量配器并根据培养基的黏度调整样品剂量。3.其他系统:可直接连接标准、通用的蠕动泵和稀释、充填培养皿系统。培养基制备器利用各种动、植物或微生物的原料,其成分难以确切知道。中国台湾Systec培养基制备器
培养基制备器血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。江西自动搅拌培养基制备器
实验室在制作培养基时候的经验总结:1、培养基成份称量:培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱,较好一次完成,不要中断。可将配方置于傍侧,每称完一种成分即在配方上做出记号,并将所需称取的药品一次取齐,置于左侧,每种称取完毕后,即移放于右侧。完全称取完毕后,还应进行一次检查。2、培养基成份的混合与溶化:培养基所用化学药品均应是化学纯的。使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅,以防有微量铜或铁混入培养基中,使细菌不易生长。较好使用不锈钢加热溶化,可放入大烧杯或大烧瓶中置于高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。江西自动搅拌培养基制备器
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