培养基配制:配制用水,培养基的大部分是水,所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准,水的电阻应为200万欧姆,一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。培养基:培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基,以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)调pH至7.2-7.4,若pH值超过7.6或远低于6.8,则大多数细胞不能生长。RPMI-1640不耐高压灭菌,使用前需经灭菌0.22μm孔径滤膜滤过处理。血清:培养中常使用小牛血清(或胎牛血清)。血清亦不能高压灭菌,无菌的小牛血清需在56℃水浴30分钟灭活补体,置4℃冰箱存放待用。配制时含量视培养细胞种类、时间而定,一般用10—15%。由于血清成分复杂、条件不易控制,可选用无血清培养基。制备培养基的操作要点:固体培养基在实际中用得十分普遍。不锈钢内桶培养基制备器厂家
配制培养基的原则:控制培养基的条件,控制培养基的pH配制培养基必须根据微生物的特点调节pH。各大类微生物要求的适宜生长pH范围不同。如霉菌与酵母菌一般为5.0-6.0,细菌为6.5-7.5.放线菌为7.5-8.5.培养基的pH与其C/N有极大关系。C/N高的培养基,例如培养各种的培养基,经培养后其pH明显下降;相反,C/N低的培养基,例如培养一般细菌的培养基,经培养后,其pH则明显上升。这是由于营养物质的消耗与代谢产物的积累,改变了培养基的pH,若不及时控制,将导致菌体生长停止。中国台湾全自动培养基制备器全自动培养基制备仪主要特点:具有快速升温和迅速冷却功能。
培养基制备的基本方法和注意事项:1、培养基配方的选定同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。因此,除所用的是标准方法,应严格按其规定进行配制外,一般均应尽量收集有关资料,加以比较核对,再依据自己的使用目的,加以选用,记录其来源。2、培养基的制备记录每次制备培养基均应有记录,包括培养基名称,配方及其来源,和各种成份的牌号,好终pH值、消毒的温度和时间制备的日期和制备者等,记录应复制一份,原记录保存备查,复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱。3、培养基成分的称取培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱,好好一次完成,不要中断。可将配方置于傍侧,每称完一种成分即在配方面军做出记号,并将所需称取的药品一次取齐,置于左侧,每种称取完毕后,即移放于右侧。完全称取完毕后,还应进行一次检查。
培养基的实验室制备:①概述:培养基和试剂的灭菌通常采用湿热灭菌或过滤灭菌。有些培养基无需高压灭菌,可煮灭菌。如,含亮绿的肠道菌培养基对光和热特别敏感,应在煮沸后快速冷却,避光保存。同样,一些试剂则不需要灭菌,直接使用(参见相关标准或生产厂商的使用说明)。②湿热灭菌;p湿热灭菌在高压锅或培养基制备器中进行。高压霉菌一般采用121℃±3℃霉菌15min。如果培养基的体积超过1000mL,要对灭菌条件进行适当的调整。所有操作均要按照标准和使用说明的规定进行。注:大容量培养基(>1000mL)灭菌时可能会造成过度加热。加热后应采取适当的方式冷却,防止沸溢。这对大容量培养基和敏感性培养基(如含亮绿的培养基)是非常重要的。配制培养基的原则:根据培养目的需要选择适宜的营养物质。
微生物培养基:根据微生物类型和培养基的组成,微生物培养基通常可以分为:限定培养基、复杂培养基、选择性培养基和富集培养基。在确定的培养基中,确切的化学成分是已知的。这些类型的培养基通常由纯生化物质组成,通常用于研究微生物的较低营养需求。相比之下,复杂介质的确切化学成分尚不清楚。复杂介质培养基类型通常包含生物来源的试剂,例如酵母提取物和蛋白胨,其中确切的化学成分未知。复杂培养基通常提供多种生长因子,有助于未知和挑剔的细菌物种的培养。天然培养基是指一类利用动物、植物或微生物体包括其提取物制成的培养基。上海Systec培养基制备器
制备培养基的操作要点:体培养基营养成分分布均匀。不锈钢内桶培养基制备器厂家
培养基制备器:1.操作简单,安全可靠。温度和压力严格控制锁定装载舱口和外部盖子,不存在意外打开,保证了环境和操作者的安全。内部的管道和容器可以更换,方便移除和清洗。每一款MediaPrep高压灭菌器都是这样装配和控制的,是一种标准配置。2.高效而强大的加热和制冷系统功能强大的加热器,能够迅速加热;快速制冷是通过循环水和压力(加入内部的软化水产生的)所进行的。利用与外部水连接的盘状热交换器,能够使内部迅速冷却,整个过程包括:加热、灭菌和冷却(至50°C),依据容器的大小、培养基的数量和冷却水的温度,只需60-120分钟即可完成。负载的压力,有效地避免了培养基过温失效和培养基中气泡的产生。空气压缩机是内置的。全自动控制程序,确保内部温度均一,从而保证了配制和灭菌的培养基具有更高的质量,整个过程,在一个设定温度内,从初的加热到混合和灭菌,后到冷却,都是微处理器控制的,而且灭菌之后保持的温度是可以预设的。杀菌剂装入口宽大,并附有保险锁。杀菌剂可从此口加入,也可用注射器从硅酮膜注入。不锈钢内桶培养基制备器厂家
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