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培养基防止污染应该注意以下事项：确认工作细胞库是否被污染，确认毒种工作种子批是否被污染，确认所用培养基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染，均可用细菌、病菌及支原体无菌试验来确认并排除。同时要对无菌试验培养基的灵敏度进行验证。实际生产中，可以从配制好的培养液中取少量加入营养琼脂于恒温培养箱内培养，48小时即可观察有无污染。其它：高压灭菌设备、过滤除菌设备均应进行验证，确保灭菌和除菌效果;前者应在投产前及其后的每6个月进行验证，后者应在每次除菌前、后进行验证工作(至少应在除菌后进行一次)。另外，应将有毒区与无毒区严格分开，并有各自自立的空气净化系统及孵室，有毒区对无毒区应保持相对负压，防止病毒对培养细胞(尤其是细胞库)的污染。液体培养基，80%～90%是水，其中配有可溶性的或不溶性的营养成分的培养基。北京培养基制备仪哪家好

干粉培养基有哪些注意事项：①熔化培养基制备必须在玻璃容器中进行，如果使用铜或铁器皿，会影响细菌的生长。②注意按照先加水再加颗粒干粉培养基顺序，反之则不利于培养基溶解。③单在必要时进行加热溶解操作，其加热温度也不要过高时间不要过长，主要原因是高温会破坏琼脂和培养基中的一些营养成分。④生产的干粉培养基和颗粒培养基都经过pH校准，使用时无需特殊验证。因为高压会影响pH值，则应在高压后验证pH值。⑤液体培养基通常是预先包装好的，分装时应注意每管的用量不得高于试管的三分之二。⑥高压后冷却至五六十度环境，再导入平板，否则会形成更多的水蒸气，导致细菌分离数量。北京培养基制备仪哪家好培养基配好后不宜久置，很好现配现用。

培养基的灭菌：一般培养基可采用121°C高压蒸汽灭菌15分钟的方法。在各种培养基制备方法中，如无特殊规定，即可用此法灭菌。某些热敏成分，如糖类，应另行配成20%或更高的浓液，以过滤或间歇灭菌法消毒，以后再用无菌操作技术、定量加于培养基。明胶培养基亦应用较低温度灭菌。血液、体液和等则应以无菌操作技术抽取和加入于经冷却约50°C左右的培养基中。琼脂斜面培养基应在灭菌后立即取出，冷至55℃-60℃时，摆置成适当斜面，待其自然凝固。

培养基的类别按照培养基的成分来分：培养基按其所含成分，可分为合成培养基、天然培养基和半合成培养基三类。(1)合成培养基。合成培养基的各种成分完全是己知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚，组成成分精确，重复性强，但价格较贵，而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏培养基等。(2)天然培养基。由天然物质制成，如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤，前者用于培养霉菌，后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定，也难以确定，但配制方便，营养丰富，所以常被采用。(3)半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类，或在合成培养基的基础上添加某些天然成分，如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。按一般微生物生长繁殖所需要的基本营养物质配制的培养基即成为基础培养基。

培养基的制备原则和要求：培养基是根据各类微生物生长繁殖的需要，用人工方法把多种物质混合而成的营养物。一般用来分离、培养菌类。常用的培养基有基础培养基、增菌培养基、选择培养基、鉴别培养基和厌氧培养基。在制备培养基时，应掌握如下原则和要求：(一)培养基必须含有细菌生长繁殖所需要的营养物质。所用的化学药品必须纯净，称取的份量务必准确。(二)培养基的酸碱度应符合细菌生长要求。按各种培养基要求准确测定调节pH值。多数细菌生长的适宜pH值为7.2～7.6，呈弱碱性。培养基根据使用范围可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基、培养基等。进口培养基制备仪供应商

在配制用于观察和定量测定微生物生长状况的合成培养基时，常需在培养基中加入少量螯合剂。北京培养基制备仪哪家好

马铃薯培养基的分装：1.根据需要将培养基分装于不同容量的三角烧瓶、试管中。分装的量不宜超过容器的2/3以免灭菌时外溢。2.琼脂斜面分装量为试管容量的1/5，灭菌后须趁热放置成斜面，斜面长约为试管长的2/3。3.半固体培养基分装量约为试管长的1/3，灭菌后直立凝固待用。4.高层琼脂分装量约为试管的1/3，灭菌后趁热直立，待冷后凝固待用。5.液体培养基分装于试管中，约是试管长度的1/3。6.琼脂平板：将灭菌(或加热融化)后的培养基冷至50℃左右，以无菌手续倾人灭菌平皿内，内径225px的平皿倾注培养基约13～15ml，轻摇平皿底，使培养基平铺于平皿底部，待凝固后即成，倾注培养基时，切勿将皿盖全部启开，以免空气中尘埃及细菌落入新制成的平板培养基(简称平板)，表面水分较多，不利于细菌的分离，通常应将平皿倒扣搁置于37℃培养箱内约30分钟待平板平面干燥后使用。北京培养基制备仪哪家好

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