安全性:避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。Elisa 试剂盒在生物检测领域地位重要。如皋凋亡相关因子配体(FASL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
elisa试剂盒的操作要点:可用作大鼠elisa试剂盒检定的标本十分普遍,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定,有些则需经预处理。大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均同等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清自然凝固收缩后即可取得。除特殊情况外,在医学检验中均以血清作为检测标本。在ELISA中血浆和血清可同等应用。绍兴干细胞因子受体(SCFR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)Elisa 试剂盒能助力传染病监测工作。
一、试验原理1,ELISA试剂盒是以免疫学反响为基础,将抗原、抗体的特异性反响与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技能。免疫酶技能是将酶标记在抗体/抗原分子上,构成酶标抗体/酶标抗原,称为酶结合物。该酶结合物的酶在免疫反响后,作用于底物使之呈色,依据色彩的有无和深浅,定位或定量抗原/抗体。2,ELISA法是免疫酶技能的一种,其特点是利用聚苯乙烯微量反响板(或球)吸附抗原/抗体,使之固相化,免疫反响和酶促反响都在其间进行。在每次反响后都要反复洗刷,这既确保了反响的定量联络,也避免了末反响的游离抗体/抗原的别离进程。在ELISA法中.酶促反响只进行一次,而抗原的免疫反响可进行一次或数次,即可用二抗(抗抗体)、三抗再次进行免疫反响。
免疫吸附剂已包被抗原或抗体的固相载体在低温(2~8℃)干燥的条件下一般可保存6个月。对于有些不完整的试盒,单供应包被用抗原或抗体,检测人员需自行报备,固相载体在elisa试剂盒测定过程中作为吸附剂和容器,不参与化学反应。可作elisa试剂盒中载体的材料很多,较为常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有较强的吸附蛋白质的性能,抗体或蛋白质抗原吸附其上后仍保留原来的免疫学活性,加之它的价格低廉,所以被普遍采用。聚苯乙烯为塑料,可制成各种形式。ELISA测定过程中作为吸附剂和容器,不参与化学反应。Elisa 试剂盒可检测组织提取物中的成分。
ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。Elisa试剂盒广泛应用于医学、生物科学研究和食品安全等领域。江阴补体因子D(CFD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Elisa 试剂盒可检测自身抗体情况。如皋凋亡相关因子配体(FASL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
注意事项1.正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。2.在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:(1)固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。如皋凋亡相关因子配体(FASL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
徐州乳脂球表皮生长因子8(MFGE8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
徐州铁蛋白(FE)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
无锡白介素15(IL15)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
平湖L选择素(SELL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
句容低密度脂蛋白(LDL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
淮安基质金属蛋白酶9(MMP9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
常熟肌红蛋白(MYO)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
高邮血管生成素1(ANGPT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
江阴乳铁传递蛋白(LTF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
瑞安胎盘生长因子(PLGF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)