ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。兴化P选择素(SELP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
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elisa试剂盒检定中一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。加样时应将所加物加在LEISA板孔的底部,避免针眼壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡。加标本一般用微量加样器,按规定的量加入板孔中。每次加标本应更换吸嘴,以免发生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加样。有此测定需用稀释的血清,可在试管中按规定的稀释度稀释后再加样。也可在板孔中加入稀释液,再在其中加入血清标本,然后在微型震荡器上震荡1分钟以保证混和。加酶结合物应用液和底物应用液时可用定量多道加液器,使加液过程迅速完成。
关于elisa试剂盒温育,在实际测定操作中一定要注意以下几点:要保证在设定的温度下有足够的反应时间。一般来说,加完样本和/或反应试剂后,将微孔板从室温拿至水浴箱或温箱中时,其孔内温度从室温升至37℃,需要一定的时间,尤其是在室温比较低以及非水浴的状态下,这段升温时间可能还比较长,而在临床实验室中,很少有人注意这个问题,通常是将微孔板一放入温箱即开始计时,这样就很容易造成实际测定中温育时间不够,弱阳性样本测不出来的问题。为保证37℃下足够的温育时间,临床实验室可自行确定本实验室不同季节(不同室温下)微孔板从室温拿至温箱后需要多长时间孔内温度才能达到37℃,从而适当延长板条在温箱中的放置时间。Elisa试剂盒的选择需要考虑其价格、质量、品牌、缺点等因素。
分子生物学与免疫学的发展是有目共睹的,还记得2003年的非典吗?不用说防治,就是确诊都很困难。到现在,过去10来年,什么禽流感、猪流感,什么埃博拉、中东呼吸综合征,出现几天,抓住它的基因序列,获取蛋白和抗体就不是难事,研制疫苗与抗体血清也有可能,拿出检测试剂盒只是探囊取物。公司近七千种检测试剂盒主要是ELISA试剂盒,也有少部分是CLIA试剂盒,有双抗夹心法与竞争抑制法之分。特色产品有检测灵敏度高的高敏型检测试剂盒;实验耗时短,试剂使用方便的快捷型检测试剂盒;以及只需要少量标本即可检测的小样本检测试剂盒;用于检测抗体的测抗体检测试剂盒;用于检测小分子物质的通用型泛物种检测试剂盒;用于检测二个物种以上靶蛋白的多物种检测试剂盒。这些试剂盒目前基本上都只能用于科学研究,不用于临床诊断,云克隆诊断试剂研究所正在着手逐步将部分指标转化为临床用体外诊断试剂。杭州昊鑫生物是云克隆浙江省一级代理,大量产品备有现货,欢迎咨询!试剂盒一般医院、制药企业使用。龙泉粒细胞集落刺激因子(GCSF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
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