PAS技术是很少可检测不同种类的黏液物质(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技术却不能区别黏蛋白和糖原。若要冸确鉴别黏液物质(如黏蛋白或糖原),需加入糖原消化步骤。大多数情冴下可用α–淀粉酶或麦芽淀粉酶来催化糖原的糖苷键水解,形成水溶性的双糖-麦芽糖,在应用PAS技术之前将糖原从组织切片上除去。人类的唾液被认为是消化糖原的一种有效手段,但是出于安全以及缺乏标冸唾液的考虑,不主张应用唾液。所以网状纤维的组织化学染色,在临床病理诊断上占着相当重要的位置。糖原在肝脏及心肌疾患及某些的病变中分布和量都有一定改变。湖南咨询糖原染色试剂盒厂家现货
糖元染色试剂盒细胞生物学研究有以下几个方面。细胞生物学的研究内容十分普遍,主要包括。①细胞核、染色体以及基因表达的研究。②生物膜与细胞器的研究。③细胞骨架体系的研究。④细胞增殖及其调控。⑤细胞分化及其调控。⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)⑦细胞的起源与进化。⑧细胞工程。PAS染色,全称过碘酸雪夫染色(PeriodicAcid-SchiffStain),主要用来显示糖原和其他多糖物质,因此也称作糖原染色。另外,此染色方法还可以显示中性黏液性物质和某些酸性物质,以及软骨、垂体、色素、淀粉样物质、基底膜、霉菌等。PAS法的检测原理在于:过碘酸(也成为高碘酸)是一种强氧化剂湖南咨询糖原染色试剂盒厂家现货切取的材料应小而薄,便于固定液迅速渗入内部。
染色的一般原则:因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用凋亡诱导处理的细胞做单阳对照,进行荧光补偿的调节。标记抗体常用荧光素FITC,EGFP激发光:488nm发射光:525nm;使用面较广,价格便宜。PE激发光488nm发射光575nm,此荧光的激发效率较佳,故此荧光得到的信号较强;检测某些弱表达的抗原,推荐使用此荧光素。价格较FITC昂贵。APC激发光633nm,发射光660nm,在配有双激光的流式细胞仪上,此荧光染料可与7-AAD或PI共同使用来避开自带绿色荧光的样本。流式细胞仪相关试剂盒。
注意事项:染色前:①切出的石蜡切片要好,不能有皱褶或者刀痕,切片不能太厚。②捞片时,较好一张玻片捞一个组织,组织较好位于玻片的中间,美观的同时也利于脱蜡(有时二甲苯的液面低于组织片的时候,达不到脱蜡的目的)。③石蜡切片脱蜡到水时,一定要注意组织切片脱蜡务必要彻底(脱蜡时间不能太少)以使脱蜡后的组织达到真正的“干净”。否则剩余的未脱干净的石蜡粘附在组织表面,在染色时染色液未能充分与组织接触,较终导致染色效果不佳,甚至染不上颜色。④在染色过程中较好不要在玻片上贴标签纸,以避免脱蜡时把标签纸也浸没,致使标签纸上的胶黏到玻片上,造成染色不佳。生物膜与细胞器的研究。
糖原及粘液染色法注意事项:1、糖原的固定要及时,而且标本要新鲜。2、如用无水酒精作糖原的固定剂,有它的弊病,因无水酒精渗透较慢,而且容易产生极化,(极化是糖原颗粒趋向于细胞的一端)。故用Gendre氏固定液效果较佳,其配法如下:苦味酸饱和于95%酒精85ml40%甲醛10ml冰醋酸5ml3、各种试剂必须化学纯,亚硫酸钠须有浓厚气味,器皿必须洁净而干燥,染色缸亦是。4、如果Schiff氏试剂,在经过活性碳吸附漂白后不显无色,首先应考虑试剂中的偏重亚硫酸钠是否失效。如果偏重亚硫酸钠气味不浓,使用时可考虑适当的增加用量。其次考虑碱性品红本身,常常虽属同一生产厂家,但不同批号,其效果就可能不同,应特别引起注意~拥有日本进口的各种染料,保证切片染色效果。湖南咨询糖原染色试剂盒厂家现货
如用无水酒精作糖原的固定剂,有它的弊病。湖南咨询糖原染色试剂盒厂家现货
注意事项:染色时:①染色时必须严格按照染色操作说明书进行染色。②在染色过程中,前一个染液浸染完成后,在进行下一个染液的步骤之前,必须彻底充分水洗,使前一个染液冲洗干净后再进行下一步骤。③每次滴加染液前,务必吸干组织上多余的水分,避免多余的水把染液稀释了,造成染色不佳。④在滴加染液时,务必使染液完全覆盖组织,但不能溢出圈外,避免浪费试剂。在染色时,用有色铅笔在组织周围划一个圈,这样在滴加染液时就不会使染液溢出。湖南咨询糖原染色试剂盒厂家现货