鼠尾Ⅰ型胶原:材料与方法:1.主要材料、试剂和仪器鼠尾、盐酸、等渗氯化钠溶液、钙液、磷液均购自上海晶纯生化科技股份有限公司。日立高新TEMHT770(日本日立公司);多功能粉末X射线衍射仪。2.酸解提取鼠尾Ⅰ型胶原蛋白取大鼠尾巴洗净,用75%的乙醇浸泡5min。将尾巴剪开,去掉皮毛,并剪成小段,抽出银色的肌腱。将肌键剪断置于平皿中,用无菌等渗氯化钠溶液浸泡。吸去等渗氯化钠溶液,将肌键置于平皿中剪碎,按每克肌键50mL的比例加入0.1%的醋酸溶液。摇晃,将肌键分散于醋酸溶液中,4℃放置一周,然后以2186×g离心20min。在醋酸溶液的酸解下,肌腱水解成胶冻状凝胶,置于冰箱4℃保存。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。制备鼠尾胶原:离心,4000转/分,10-15分钟。郑州鼠尾胶原单价
鼠尾胶原是一种天然培养基,它具有促进体外培养细胞(特别是上皮细胞)贴壁的作用,同时它也是一种天然的黏附剂,当我们需要在培养瓶或培养皿内放置小玻片,制备细胞爬片时,可在瓶底涂一层胶原,再放上小玻片,自然干燥后小玻片就固定于培养瓶之中。通过本实验可掌握鼠尾胶原的制备方法,以及如何切割小玻片,并利用鼠尾胶原将其固定于培养瓶内。实验设备及材料:大鼠尾巴、剪刀、镊子、止血钳、弯头吸管、平皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、天平、生理盐水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、盖玻片、培养瓶、钻石笔、鼠尾胶原。实验内容:1、制备鼠尾胶原。2、切割小玻片。3、利用鼠尾胶原将小玻片固定于培养瓶内。济南鼠尾胶原生产厂家鼠尾胶原醋酸溶解:将鼠尾胶原加入到0.1M的醋酸中。
胶原蛋白的提取方法:1.碱法提取:碱法提取胶原蛋白常用的处理剂为石灰、氢氧化钠、碳酸钠等。如Holzer等[5]采用1%~1.5%石灰水浸泡的方法提取胶原蛋白。由于它容易造成肽键水解,因此得到的水解产物分子量比较低。所以,若想保留胶原的三股螺旋结构,此法不可取。2.盐法提取:盐法提取胶原蛋白所用的中性盐有盐酸-三羟甲基胺基甲烷(Tris-HCl)、氯化钠、柠檬酸盐等。在中性条件下,当盐的浓度达到一定量时,胶原溶解。并且可采用不同浓度的氯化钠对提取的胶原蛋白进行盐析处理,可以沉淀出不同类型的胶原蛋白。
鼠尾Ⅰ型胶原:组装液的配置:1.50mmol/L甘氨酸+200mmol/L氯化钾100mL,用1mol/L氢氧化钠调节酸碱度至9.2。2.胶原纤维的重构吸取胶原10μL至小培养皿中,倒入0.5mL自组装液,室温放置20min。予自组装液自组装24h。吸取0.05%戊二醛2mL至小培养皿中,将自组装24h的胶原浸泡在戊二醛中。然后将胶原经去离子水、50%乙醇、100%乙醇依次漂洗后进行TEM观察。3.生物矿化形成仿生骨材料静滴配置钙磷矿化液将25mL钙液(10mmol/L二水氯化钙+150mmol/L氯化钠+50mmol/L三羟甲基氨基甲烷+0.02%三氮化钠)倒入烧杯中,滴入聚丙烯(PAA)至浓度350μg/mL;滴加1mol/L的氯化氢,调节酸碱度至7.4,然后缓慢滴入25mL磷液(6mmol/L磷酸氢二钠),约16滴/min。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。当我们需要在培养瓶或培养皿内放置小玻片,制备细胞爬片时,可在瓶底涂一层胶原。
除了让细胞更好贴上去,鼠尾胶原蛋白还能用于制备三维胶,这样可以在培养皿中一定程度上模拟身体内部的生长环境,让细胞在更真实地条件下进行生长。当然,除了这些,耗子尾汁还能做到很多事情,只需要打开网站——知网,输入鼠尾胶原蛋白就能看到,例如鼠尾胶原蛋白可用于制备防皱保湿或美白产品,制作止血海绵敷料等各种用途。NO.3鼠尾DNA除了从整条鼠尾中提取的鼠尾胶原蛋白,老鼠的尾巴尖尖也是制备「耗子尾汁」的好材料。这类「耗子尾汁」通常用来鉴别耗子的基因型,对于转基因小鼠而言,如果无法通过毛色来分辨动物的基因型,往往会选用经典的PCR法。通过蛋白酶K裂解,「剪尾、加碱、加热」三连的方法都能制备一管(香喷喷)的「耗子尾汁」,从而获取遗传信息。一种基于鼠尾胶原蛋白:根据权利要求1所述的基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料。珠海正规鼠尾胶原哪里买
鼠尾胶原醋酸溶解:在室温或37度结合数小时或者2-8度过夜。郑州鼠尾胶原单价
利用鼠尾Ⅰ型胶原构建与人类自体骨组织化学成分和分子结构相近的仿生骨材料。方法通过醋酸酸解提取鼠尾Ⅰ型胶原蛋白,并重构成胶原纤维。然后,将重构后的胶原纤维放置在矿化液中模仿骨生物矿化2~6d,通过透射电子显微镜和电子衍射观察骨生物矿化。结果酸解提取的鼠尾Ⅰ型胶原蛋白能够重构成胶原纤维,并且具有特征性的D-Band结构。透射电子显微镜和电子衍射显示:矿化2d后,羟基磷灰石钙前体渗入胶原纤维,胶原纤维部分矿化;矿化6d后,胶原纤维内部完全矿化,形成Ⅰ型胶原蛋白/羟基磷灰石钙的仿生骨材料。结论利用酸解法提取的鼠尾Ⅰ型胶原蛋白可以重构成胶原纤维,经矿化可形成与人类自体骨组织化学成分和分子结构一致的仿生骨材料。郑州鼠尾胶原单价