鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事项:将培养器皿在室温(25度左右)下放置20分钟待胶凝固后,转移到培养箱内。如果配制中使用的是10PBS,使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。B.含细胞的三维胶原的制备(以配制200ul鼠尾胶原蛋白(5mg/ml)加到(如果反过来把12ul0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入23ul10PBS10培养液,混匀(混匀后pH左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要用pH试纸测试)。加入760ul的细胞悬浮液,混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温下放20分钟待胶凝固后,加入适当体积的细胞培养液,转移到培养箱中培养。注意事项型在室温下pH中性时可迅速成胶,在操作过程中要尽量保持低温。鼠尾肌腱胶原蛋白I(rattailtendoncollagentypeI)根据Birkedal-Hansen方法,经过醋酸(HAc)抽提、氯化钠沉淀、磷酸氢二钠沉淀等步骤制备所得。为了尽可能减少对动物的伤害和方便试验人员的操作,剪下一小段鼠尾是一个不错的选择。正规鼠尾胶原销售厂家
鼠尾胶原备用胶凝程序:1)在冰上放置以下物品:胶原蛋白I、无菌10×PBS、无菌蒸馏水、无菌1MNaOH。2)确定胶原蛋白I待使用溶液所需的较终浓度的体积。3)在冰上放置无菌管以收存胶原蛋白I。4)在无菌条件下执行以下步骤。4.1加入10×PBS(终体积/10)mL4.2计算要使用的胶原蛋白I的体积(不要添加到管中直到步骤4.6为止)终体积x终胶原蛋白I浓度(mg/mL)。4.3向10×PBS溶液中加入(要加入的胶原体积×0.023)mL的无菌冰冷1MNaOH。4.4向4.3溶液中加入下述体积的无菌冰冷蒸馏水:添加蒸馏水体积=V(终)—V(胶原蛋白)—V(10×PBS)—V(1MNaOH)4.5混合管中的物质并放入冰中。4.6加入胶原蛋白I并计算体积,混匀,冰上备用。5)胶原蛋白I溶液可立即使用或在冰上放置2-3小时。6)使用时,无菌条件下将溶液加入到细胞培养装置中37°C凝胶30min。合肥鼠尾胶原制备鼠尾胶原:吸取上清,分装成小瓶,4℃保存。
鼠尾胶原在心肌细胞氧化损伤中的保护作用:原蛋白具有抗氧化作用,但既往在实验室主要将鼠尾胶原用于促进细胞贴壁和支架构建,对于其抗氧化作用目前尚无相关研究。目的:探讨鼠尾胶原对过氧化氢导致离体心肌细胞氧化损伤的保护作用。方法:将原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞随机接种到铺有鼠尾胶原的培养皿(实验组)和普通培养皿(对照组)中,并且均用0,10,100μmol/LH2O2诱导。24h后,以电子显微镜观察各组乳鼠心肌细胞的形态,应用MTT比色法检测心肌细胞存活率,TUNEL法检测心肌细胞凋亡形态,流式细胞技术检测心肌细胞凋亡率,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法检测丙二醛水平,Western-Blot检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表达。
鼠尾Ⅰ型胶原:材料与方法:1.主要材料、试剂和仪器鼠尾、盐酸、等渗氯化钠溶液、钙液、磷液均购自上海晶纯生化科技股份有限公司。日立高新TEMHT770(日本日立公司);多功能粉末X射线衍射仪。2.酸解提取鼠尾Ⅰ型胶原蛋白取大鼠尾巴洗净,用75%的乙醇浸泡5min。将尾巴剪开,去掉皮毛,并剪成小段,抽出银色的肌腱。将肌键剪断置于平皿中,用无菌等渗氯化钠溶液浸泡。吸去等渗氯化钠溶液,将肌键置于平皿中剪碎,按每克肌键50mL的比例加入0.1%的醋酸溶液。摇晃,将肌键分散于醋酸溶液中,4℃放置一周,然后以2186×g离心20min。在醋酸溶液的酸解下,肌腱水解成胶冻状凝胶,置于冰箱4℃保存。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。自制的鼠尾胶原能正常地培养出大鼠耳蜗边缘细胞,细胞角蛋白18表达阳性。
一种基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料及其制备方法:随着现代医学的发展,各种医用耗材的更新换代也是日新月异。止血材料是常见的医疗器械产品。但是现今市面上的止血材料不光存在着容易引起伤口传染的缺点;同时还存在着容易与伤口粘附不易去除,导致伤口溃烂,或者因为粘附导致传染;再次就是止血材料多是通过吸收血液及添加凝血酶等外在因素止血,很少有止血材料是使用能够自身具有止血性质的材料来生产的。现今市面上的可吸收止血材料有氧化纤维素、α-氰基丙烯酸酯类组织胶、医用止血明胶等,但是都有各自的缺点。如氧化纤维素可引起组织周围PH值升高;α-氰基丙烯酸酯类组织胶降解过程中释放出氰和甲醛等有毒物质;医用止血明胶黏附性较差,易脱落,因其吸收血液后膨胀可能压迫伤口周围组织等。鼠尾胶原醋酸溶解:在室温中搅拌1-3小时直到完全溶解。深圳正规鼠尾胶原厂家现货
包被好的器皿在4~25℃至少可保存三个月以上的时间。正规鼠尾胶原销售厂家
一种基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料及其制备方法:一般的生物体中提取的胶原蛋白多为混合型,之前多从牛皮、猪皮、牛腱中提取,但这类胶原蛋白不光有油脂等其他杂质,也存在着II型及其他一些胶原蛋白亚型;同时,这种畜牧业大量饲养的动物存在着例如疯牛病等一些生物性疾病及病毒传染,如果用此开发医用产品更加存在着品质的不稳定及潜在的风险及危害;再次,人的真皮中主要含有I型和III型,但III型不易大量获得,故应用单一的I型胶原蛋白是解决体外应用的医用产品引起的抗原性问题的关键,这也是I型胶原蛋白抗原性低的原因之一。同时,I型胶原蛋白的三重螺旋的氨基酸结构决定了它的一些特有的性能,如机械性能、促进细胞生长、弱抗原性、可生物降解性和胶原的自缔合性。正规鼠尾胶原销售厂家
苏州君欣生物科技有限公司是一家从事原代细胞,无血清细胞冻存液,干细胞无血清培养基,动物疾病模型研发、生产、销售及售后的生产型企业。公司坐落在江苏省张家港市塘桥镇东城科技创业园C幢二楼,成立于2019-12-16。公司通过创新型可持续发展为重心理念,以客户满意为重要标准。在孜孜不倦的奋斗下,公司产品业务越来越广。目前主要经营有原代细胞,无血清细胞冻存液,干细胞无血清培养基,动物疾病模型等产品,并多次以精细化学品行业标准、客户需求定制多款多元化的产品。我们以客户的需求为基础,在产品设计和研发上面苦下功夫,一份份的不懈努力和付出,打造了苏州君欣生物产品。我们从用户角度,对每一款产品进行多方面分析,对每一款产品都精心设计、精心制作和严格检验。原代细胞,无血清细胞冻存液,干细胞无血清培养基,动物疾病模型产品满足客户多方面的使用要求,让客户买的放心,用的称心,产品定位以经济实用为重心,公司真诚期待与您合作,相信有了您的支持我们会以昂扬的姿态不断前进、进步。