糖原染色是病理学中常规的染色方法之一,McManus在1946年较先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖,该染色试剂盒不仅能够显示糖原,还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。过碘酸(又称高碘酸)是一种强氧化剂,它能氧化糖类及有关物质中的1,2-乙二醇基,使之变为二醛,醛不Schiff试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。由于高碘酸还可氧化细胞内其他物质,使用时应注意选择好高碘酸浓度和氧化时间,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于过氧化,这是很关键的步骤。PAS技术是很少可检测不同种类的黏液物质(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法,但PAS技术却不能区别黏蛋白和糖原。切出的石蜡切片要好,不能有皱褶或者刀痕,切片不能太厚。山东品质好的糖原染色试剂盒报价
染色的一般原则:1.荧光素产品一般为微量试剂,取用前请离心集液,以及避光保存和使用。建议您在收到产品之后,分装为小份避光保存于-20℃,即用即取。2.式细胞仪只可检测单细胞悬液,如使用组织样本,首先必须制备成单细胞悬液,细胞数量不应低于1X106/ml。3.推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,需用不含EDTA的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA的PBS中,防止进一步的损伤。安徽品质好的糖原染色试剂盒生产厂家常需要分别选用相应的显示这些成分的染色方法进行特殊染色。
糖原及粘液染色法注意事项:1、糖原的固定要及时,而且标本要新鲜。2、如用无水酒精作糖原的固定剂,有它的弊病,因无水酒精渗透较慢,而且容易产生极化,(极化是糖原颗粒趋向于细胞的一端)。故用Gendre氏固定液效果较佳,其配法如下:苦味酸饱和于95%酒精85ml40%甲醛10ml冰醋酸5ml3、各种试剂必须化学纯,亚硫酸钠须有浓厚气味,器皿必须洁净而干燥,染色缸亦是。4、如果Schiff氏试剂,在经过活性碳吸附漂白后不显无色,首先应考虑试剂中的偏重亚硫酸钠是否失效。如果偏重亚硫酸钠气味不浓,使用时可考虑适当的增加用量。其次考虑碱性品红本身,常常虽属同一生产厂家,但不同批号,其效果就可能不同,应特别引起注意~
特染的应用价值:现代病理学中免疫组织化学技术、电子显微镜技术以及其它细胞及分子生物学技术应用日益普遍,但由于这些技术要求一定的实验条件以及所需的试剂价格较为昂贵,对于一部分病人以及某一些基层医院是比较难以接受的。而组织化学技术则具有无需复杂的实验条件以及较为昂贵的试剂操作又比较简单的优势,在临床病理学诊断中具有重要的应用价值。比如,当细胞中出现色素,是黑色素还是含铁血黄素以及当组织中出现均一化学物质是否为淀粉样变性等,用组织化学技术区别起来很简单,所以组织化学技术,虽然已有几十年到几百年的历史,仍是一个很有实用价值的技术~急性单核细胞白血病原、幼单核细胞POX染色多呈细小颗粒弱阳性反应。
糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面:PAS染色时需于暗处加盖反应,染色时间10~20min(染色时间长短取决于试剂的质量和环境温度,SO浓度高,染色时间适当缩短;环境温度高,染色时间也应适当缩短,反之则需适当延长反应时间)。染色过程中不能接触伊红,以免造成颜色误差[4]。作糖原染色时,较好作消化对照,即取两张连续切片,其中一张脱蜡至水后,用1%淀粉酶于37℃消化30min,水洗后与不经消化处理的切片一起置0.5%高碘酸液氧化,如经消化处理的切片染色阴性,不经消化处理的切片染色阳性,即肯定为糖原[6]。偏重亚硫酸钠(钾)溶液配置后,不能保存,因此,必须现配现用,用过一次即应废弃。各种试剂必须是化学纯或者分析纯。器皿、染色缸必须洁净而干燥。在滴加染液时,务必使染液完全覆盖组织,但不能溢出圈外,避免浪费试剂。山东口碑好的糖原染色试剂盒服务电话
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糖原染色正常值:正常情况下,红细胞系统的原、幼红细胞和成熟红细胞;粒细胞系统的原粒细胞、原单核细胞和大多数淋巴细胞为阴性反应。自早幼粒阶段以后的粒细胞和幼单核细胞可呈弱阳性反应。糖原染色临床意义:(1)急性淋巴细胞白血病、淋巴组织恶性增生性疾病、红白血病、戈谢病的原始细胞呈强阳性反应或阳性反应;缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍、骨髓增生异常综合征亦可呈阳性反应;急性粒细胞白血病、急性单核细胞白血病、良性淋巴细胞增多症、尼曼-皮克细胞呈阴性反应或弱阳性反应。巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血等,幼红细胞为阴性反应。偶有个别幼红细胞呈阳性反应。(2)帮助鉴别不典型巨核细胞和霍奇金细胞,巨核细胞呈强阳性反应;霍奇金细胞呈弱阳性或阴性反应。(3)帮助鉴别白血病细胞和腺骨髓转移的腺细胞,腺细胞呈阳性反应。山东品质好的糖原染色试剂盒报价
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