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动物PCR扩增

来源: 发布时间:2024年07月02日

目前市面上有很多PCR仪器,一时间让兽医师无从选择,但大多数都是PCR扩增仪,即需要人工进行核酸提取和纯化。他们都有以下痛点:1、核酸提取和纯化的操作麻烦并且需要专业的技术人员和场地,有些还需要配置高速离心机,人工核酸提取需要30~40分钟并容易导致污染。2、人工反复开盖加入或倒出试剂,容易导致人为和气溶胶污染,导致结果不准确。因此针对宠物医院来说,需要一台集核酸提取、纯化和扩增为一体的全自动核酸检测仪。能更好的控制人工成本及试剂成本。常用的qPCR方法有荧光染料法(SYBR Green I)和探针法(TaqMan)。动物PCR扩增

动物PCR扩增,PCR

PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(热稳定DNA聚合酶)的作用下,由一对特异性引物经热变性-退火-延伸反应,三个不同温度的循环处理使得DNA由少量扩增到多量的一种体外DNA扩增技术。在反应体系内,以一对人工合成的寡核苷酸作为扩增引物,第一步,模板DNA变性,以构成脱氧核糖核酸的四种脱氧核苷酸为底物,目的基因作为模板,在DNA聚合酶的作用下模板DNA经过80-90℃高温变性,使模板DNA双链经PCR扩增形成的双链解离成单链。第二步,模板DNA与引物退火(复性),模板DNA解离成单链后温度降至50-60℃,引物与模板DNA单链互补配对。第三步,引物的延伸,DNA模板-引物结合物在DNA聚合酶作用下,70-75℃以dNTP为反应原料半保留复制合成一条新的模板DNA链。这三个步骤为一个循环,2-4分钟即可完成一个循环,2-3小时就能使极微量的DNA、片段、甚至单拷贝基因复制到几百万倍,从而实现对靶DNA的放大。由于扩增碱基序列按照靶DNA复制,因此PCR反应具有高度特异性。动物PCR技术在动物疫病检测的应用PCR在常见传染病、**、遗传病、寄生虫病、优生优育、法医学等领域中有相当高的实际应用价值。

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近三年宠物PCR检测普及率极大增加,一、线城市普及率约80%,二线城市普及率约60%。中国现有宠物医院数量约15000家,一、二线城市宠物医院数量占比65%,并且未来宠物医院数量将持续增长,综合来看中国1.5万家宠物医院PCR普及率约60%。宠物医院对PCR仪器主要关注3方面:1、全自动检测仪器,人工操作步骤少,由人为操作造成的失误率更少,解放人力,提高人工工作效率。2、8通量检测仪器,宠物医院检测量不高,8通量能够满足需求,节约成本。3、以投放模式采购PCR检测仪器(购买一定量的检测试剂,厂家赠送检测仪器)。

在宠物医疗中,目前病毒检测主要包括胶体金检测(试纸)和PCR检测。两者的区别:胶体金是针对病毒蛋白质的检测,PCR检测是针对病毒核酸的检测。病毒蛋白质和病毒核酸对于病毒来说都是独特的,因此它们都可以确定病毒的身份。但目前医学上无法进行病毒蛋白质的扩增,因此当样本中病毒量少的情况下,就有可能无法找到病毒;而PCR病毒核酸检测的关键就在于可以将核酸进行不断地复制和扩增,所以PCR检测的灵敏度就更高,更容易在样本病毒量相对少的情况下更早地确认病毒。假设一个样本病毒量在10万以上,胶体金技术和PCR技术可以同时检测确诊阳性;但如果样本病毒量低于10万,则只能依靠PCR技术。巧亦捷核酸一体机,给宠物医院、兽医站、养殖场等带来了更大“福利”,减少了诊断等候时间。

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样本处理、核酸提取、PCR扩增和数据处理是PCR的四个步骤。其中核酸提取可以帮助研究人员准确地快速地分离细胞或分子材料中的有效核酸,并获得足够的样本为后续实验提供依据。无论是病毒、细菌还是体细胞,遗传物质都不是裸露在细胞外,都是在细胞内。需要有一个核酸提取试剂将遗传物质释放到外界,保证PCR反应效率。将核酸释放出来后,提取与纯化过程中同样需要将样本中的一些PCR抑制物去除掉,获得纯度比较高的核酸,比较大限度的保证PCR反应中抑制物的浓度降低,提高核酸检测的准确性。因此核酸提取与纯化这一步,也是保证PCR反应结果的关键一步。巧亦捷核酸检测一体机采用磁珠法提取,效率高且可确保结果更准确。巧亦捷希望能更好的去为每一只动物提供专业的检测服务。动物疾病PCR动物疫病

对于宠物的诊断,巧亦捷薄膜微流控全自动核酸检测平台是非常有用的工具。。动物PCR扩增

经过多年的科研,PCR技术应用于动物疫病的检测和诊断中,具有特异性高和便于操作等特点,得到了宽泛的临床应用。该技术能够在比较短的时间内使基因进行快速的扩增,从而使微量的基因检测在临床中得到应用实践。在PCR技术实际应用的过程中,其优点主要包括以下几方面。首先,操作性较强,技术能够简单的应用于实际的工作中。其次,高效的扩增结果,能够实现成果的转化。***,特异性较高,技术性较强。现阶段,该技术能够在很短的时间内实现快速扩张的形势使微量基因得到快速的检测。动物PCR扩增