江苏动物检疫PCR动物检疫

在宠物医疗中，目前病毒检测主要包括胶体金检测（试纸）和PCR检测。两者的区别：胶体金是针对病毒蛋白质的检测，PCR检测是针对病毒核酸的检测。病毒蛋白质和病毒核酸对于病毒来说都是独特的，因此它们都可以确定病毒的身份。但目前医学上无法进行病毒蛋白质的扩增，因此当样本中病毒量少的情况下，就有可能无法找到病毒；而PCR病毒核酸检测的关键就在于可以将核酸进行不断地复制和扩增，所以PCR检测的灵敏度就更高，更容易在样本病毒量相对少的情况下更早地确认病毒。假设一个样本病毒量在10万以上，胶体金技术和PCR技术可以同时检测确诊阳性；但如果样本病毒量低于10万，则只能依靠PCR技术。传染性疾病在宠物中比较常见，由多种病原体如寄生虫，细菌，病毒等引起，且多具有传染性，死亡率也较高。江苏动物检疫PCR动物检疫

巧亦捷核酸一体机采用的探针法荧光PCR与常规PCR的不同之处在于：在上、下游引物外还加入了具有序列特异性的探针（探针本身具有荧光标记），该探针根据需要扩增的靶序列设计因此只能与待检测序列结合，与染料法相比提高了实验的特异性。目前市场上的探针主要种类有：TaqMan、MolecularBeacon、Scorpions、Hybirdization等，其中以TaqMan探针应用宽泛。TaqMan探针的结构：长度与普通PCR引物类似，大约20bp左右。在5’与3’端各标记有一个荧光基团，5’的荧光基团称为报告基团（Report），3’的荧光基团称为淬灭基团（Quencher）。TaqMan探针的性能：在探针结构完整的情况下用特定的波长激发报告基团，由于报告基团与淬灭基团的空间位置很近，因此报告基团能够通过FRET（FluorescenceResonanceEnergyTransfer）将接受的能量转移到淬灭基团，使后者以发射荧光或热量的方式释放能量，而报告基团并不发射特定波长的荧光信号。江苏动物检疫PCR动物检疫巧亦捷核酸一体机针对不同传染病的检测效果相同。不存在免疫学方法中出现的猫类检测试纸卡效果不佳的情况。

PCR的工作原理：在TaqDNA聚合酶（热稳定DNA聚合酶）的作用下，由一对特异性引物经热变性-退火-延伸反应，三个不同温度的循环处理使得DNA由少量扩增到多量的一种体外DNA扩增技术。在反应体系内，以一对人工合成的寡核苷酸作为扩增引物，第一步，模板DNA变性，以构成脱氧核糖核酸的四种脱氧核苷酸为底物，目的基因作为模板，在DNA聚合酶的作用下模板DNA经过80-90℃高温变性，使模板DNA双链经PCR扩增形成的双链解离成单链。第二步，模板DNA与引物退火（复性），模板DNA解离成单链后温度降至50-60℃，引物与模板DNA单链互补配对。第三步，引物的延伸，DNA模板-引物结合物在DNA聚合酶作用下，70-75℃以dNTP为反应原料半保留复制合成一条新的模板DNA链。这三个步骤为一个循环，2-4分钟即可完成一个循环，2-3小时就能使极微量的DNA、片段、甚至单拷贝基因复制到几百万倍，从而实现对靶DNA的放大。由于扩增碱基序列按照靶DNA复制，因此PCR反应具有高度特异性。

使用平常的抗原试纸做动物诊断常会出现误诊的情况，如用抗原试纸条对刚买的小狗带到做检测，犬瘟试纸条检测是阴性，但回家养几天后小狗开始出现打喷嚏、咳嗽等症状，此时再去做检查，犬瘟检测则变成阳性，这种情况在宠物临床上并不少见。很有可能这只小狗在第、一次检查的时候已经传染并且向外排毒了，但是由于抗原滴度低排毒量比较小，试纸条检测不出来，错失了及早诊疗的机会。另一方面，抗体检测试纸并不能及时准确知道机体是否传染这个病原，就比如现在常见的猫咪弓形虫检测，只有猫咪接触病原一段时间后，才能产生足量的抗体，抗体试纸才出现阳性结果。当这些情况发生，结果都是令人很难过的。因为这不仅*意味着后期要花更多的Money用于诊疗，还会出现诊疗困难，毛孩子们受罪，甚至会出现我们都不愿意接受的死亡。所以我们更建议使用PCR技术进行临床诊断。巧亦捷使用的PCR扩增酶酶活是同类酶的3倍以上，检测灵敏度高。

PCR检测技术以灵敏度高，稳定性强为优势深受兽医师的青睐，以常见的猫传腹为例：猫传腹是由猫肠冠状病毒的突变引起。猫传腹为分干性和湿性两种。如果不用PCR技术的话，干性和湿性传腹均不好确诊。但如果采用PCR技术，抽取患猫腹腔或胸腔积液进行检测，约45分钟就可以确诊是否是湿性猫传腹。而针对于干性传腹，大多数病猫会呈现淋巴结肿大。所以也可以通过PCR技术检测淋巴结的穿刺液来确诊。PCR技术在猫传腹方面的应用极大缩短了确诊的时间，从而争取到更多的诊疗时间，患猫生存的机会也就更大。巧亦捷核酸一体机的检测项目范围很广，像猫瘟、猫鼻气管炎、猫上呼吸道的各类症状、犬流感、犬瘟、犬细小、犬呼吸道和肠道的疾病、狂犬病等多种疾病均可以快速确诊，为诊疗争取了更多的时间。宠物传染病检测技术方面，核酸检测方法具有极高的灵敏度和特异性，可很大程度缩短传染病检测的窗口期。江苏动物检疫PCR动物检疫

巧亦捷核酸检测一体机的灵敏性和特异性上的优势，像犬猫的呼吸道、消化道和贫血等疾病的诊断和鉴别诊断。江苏动物检疫PCR动物检疫

PCR在传染病诊断中有灵敏度高的优势，可以做到早期诊断，实现及时诊疗，减少患病动物痛苦，获得更好的疗效。预后评估，监控诊疗效果。且适用范围广不同传染病的检测效果相同。不存在诸如免疫学方法中出现的猫类检测试纸卡效果不佳的情况。PCR是目前大多数犬猫传染病的诊断方法。也是宠物医院必备的仪器之一，但市面上大多数都是PCR扩增仪，即需要人工进行核酸提取和纯化。而巧亦捷核酸一体机则囊括了核酸提取和PCR扩增部分，仪器自动操作，极大减少了宠物医院的仪器预算，真正做到全自动一体化检测。江苏动物检疫PCR动物检疫