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苏州核酸PCR仪器

来源: 发布时间:2024年04月19日

样本处理、核酸提取、PCR扩增和数据处理是PCR的四个步骤。其中核酸提取可以帮助研究人员准确地快速地分离细胞或分子材料中的有效核酸,并获得足够的样本为后续实验提供依据。无论是病毒、细菌还是体细胞,遗传物质都不是裸露在细胞外,都是在细胞内。需要有一个核酸提取试剂将遗传物质释放到外界,保证PCR反应效率。将核酸释放出来后,提取与纯化过程中同样需要将样本中的一些PCR抑制物去除掉,获得纯度比较高的核酸,比较大限度的保证PCR反应中抑制物的浓度降低,提高核酸检测的准确性。因此核酸提取与纯化这一步,也是保证PCR反应结果的关键一步。巧亦捷核酸检测一体机采用磁珠法提取,效率高且可确保结果更准确。许多宠物医生表示自己在工作中已经离不开PCR仪的帮助了。苏州核酸PCR仪器

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说PCR仪(尤其是实时荧光PCR仪)是动物诊断工具的中流砥柱毫不为过。然而,即时、快速和准确的检测是广大兽医站和养殖场对检测仪器更高的诉求。面对传染性疾病,用户对便携、易操作、准确性高、成本相对低廉的检测设备需求更为迫切。事实上,以微流控芯片作为耗材,搭配后端定量PCR的检测在临床检测领域已有成型产品——即巧亦捷全自动薄膜微流控快速核酸检测一体机。它实现了从核酸提取、PCR扩增、荧光检测全流程自动化芯片内完成,样本进,结果出,检测时间短,全程无需专业技术人员参与,可实现基于病症的多项目联检,特别适合宠物医院、兽医站、养殖场等现场快检应用场景。巧亦捷PCR核酸检测巧亦捷全自动核酸检测一体已实现覆盖猫、犬肠道类、呼吸道类、血液类、人畜共患类等多种病原体的诊断。

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当犬猫的一些疾病处于潜伏期时,该阶段动物体内的病原体含量过低。而目前市场上的一些检测工具主要检测宠物体内是否产生对抗某种病原的抗体,虽然快速,但在初期传染时,宠物免疫系统尚未产生抗体,所以检测出现伪阴性,进而延误诊疗。巧亦捷薄膜微流控快速核酸一体机则可以很好的解决这一问题,即便处于疾病潜伏期,巧亦捷核酸一体机也可以得到准确的检测结果,做到早期诊断,实现及时诊疗,减少患病动物痛苦,获得更好的疗效。预后评估,监控诊疗效果。

巧亦捷核酸一体机采用的探针法荧光PCR与常规PCR的不同之处在于:在上、下游引物外还加入了具有序列特异性的探针(探针本身具有荧光标记),该探针根据需要扩增的靶序列设计因此只能与待检测序列结合,与染料法相比提高了实验的特异性。目前市场上的探针主要种类有:TaqMan、MolecularBeacon、Scorpions、Hybirdization等,其中以TaqMan探针应用宽泛。TaqMan探针的结构:长度与普通PCR引物类似,大约20bp左右。在5’与3’端各标记有一个荧光基团,5’的荧光基团称为报告基团(Report),3’的荧光基团称为淬灭基团(Quencher)。TaqMan探针的性能:在探针结构完整的情况下用特定的波长激发报告基团,由于报告基团与淬灭基团的空间位置很近,因此报告基团能够通过FRET(FluorescenceResonanceEnergyTransfer)将接受的能量转移到淬灭基团,使后者以发射荧光或热量的方式释放能量,而报告基团并不发射特定波长的荧光信号。在宠物医疗中,目前病毒检测主要包括胶体金检测(试纸)和PCR检测。

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巧亦捷核酸一体机采用的TaqMan探针法介绍:TaqMan探针法是具有高度特异性的定量PCR技术。它的工作原理是在PCR反应体系中存在一对PCR引物和一条探针,探针的5′端标记有报告基团,3′端标记有荧光淬灭基团,探针只与模板特异结合,其结合位点在两条引物之间。当探针完整的时候,报告基团的荧光能量被淬灭基团吸收,所以仪器搜集不到信号,随着反应的进展,Taq酶遇到探针,利用3′→5′外切核酸酶的活性把探针切断,导致报告基团的荧光能量不能被淬灭基团吸收,产生了荧光信号,因此信号的强度就代、表了模板DNA的拷贝数。无论是由病毒、细菌,还是原虫、寄生虫等引起的犬猫传染性疾病都可利用巧亦捷核酸一体机进行诊断。巧亦捷PCR核酸检测

在准确的前提下,高效显得尤为重要。苏州核酸PCR仪器

PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(热稳定DNA聚合酶)的作用下,由一对特异性引物经热变性-退火-延伸反应,三个不同温度的循环处理使得DNA由少量扩增到多量的一种体外DNA扩增技术。在反应体系内,以一对人工合成的寡核苷酸作为扩增引物,第一步,模板DNA变性,以构成脱氧核糖核酸的四种脱氧核苷酸为底物,目的基因作为模板,在DNA聚合酶的作用下模板DNA经过80-90℃高温变性,使模板DNA双链经PCR扩增形成的双链解离成单链。第二步,模板DNA与引物退火(复性),模板DNA解离成单链后温度降至50-60℃,引物与模板DNA单链互补配对。第三步,引物的延伸,DNA模板-引物结合物在DNA聚合酶作用下,70-75℃以dNTP为反应原料半保留复制合成一条新的模板DNA链。这三个步骤为一个循环,2-4分钟即可完成一个循环,2-3小时就能使极微量的DNA、片段、甚至单拷贝基因复制到几百万倍,从而实现对靶DNA的放大。由于扩增碱基序列按照靶DNA复制,因此PCR反应具有高度特异性。苏州核酸PCR仪器