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PCR技术

来源: 发布时间:2024年04月06日

巧亦捷核酸一体机采用的探针法荧光PCR与常规PCR的不同之处在于:在上、下游引物外还加入了具有序列特异性的探针(探针本身具有荧光标记),该探针根据需要扩增的靶序列设计因此只能与待检测序列结合,与染料法相比提高了实验的特异性。目前市场上的探针主要种类有:TaqMan、MolecularBeacon、Scorpions、Hybirdization等,其中以TaqMan探针应用宽泛。TaqMan探针的结构:长度与普通PCR引物类似,大约20bp左右。在5’与3’端各标记有一个荧光基团,5’的荧光基团称为报告基团(Report),3’的荧光基团称为淬灭基团(Quencher)。TaqMan探针的性能:在探针结构完整的情况下用特定的波长激发报告基团,由于报告基团与淬灭基团的空间位置很近,因此报告基团能够通过FRET(FluorescenceResonanceEnergyTransfer)将接受的能量转移到淬灭基团,使后者以发射荧光或热量的方式释放能量,而报告基团并不发射特定波长的荧光信号。PCR检测正越来越多的被动物临床医师所接受,并广泛应用于动物临床疾病诊断。PCR技术

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市面上一般的实时荧光PCR检测过程:待检样品通过DNA提取试剂盒提取DNA。样本制备完成后,进行荧光定量PCR扩增。Ct值由实时荧光PCR仪软件自动确定。此法需要配置实时荧光PCR仪,这对中小型宠物医院、兽医站等来说,是一笔不小的负担:且操作需要更专业的技术人员。巧亦捷针对此产品痛点特推出薄膜微流控核酸检测一体机,集核酸提取、PCR扩增为一体,无需专业实验室、无需专业检测人员,真正实现了“样本进,结果出”,大部分检测项目可在30~70分钟内完成,检测快速、结果准确。江苏薄膜微流控PCR技术在动物疫病检测的应用巧亦捷全自动核酸检测一体已实现覆盖猫、犬肠道类、呼吸道类、血液类、人畜共患类等多种病原体的诊断。

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使用平常的抗原试纸做动物诊断常会出现误诊的情况,如用抗原试纸条对刚买的小狗带到做检测,犬瘟试纸条检测是阴性,但回家养几天后小狗开始出现打喷嚏、咳嗽等症状,此时再去做检查,犬瘟检测则变成阳性,这种情况在宠物临床上并不少见。很有可能这只小狗在第、一次检查的时候已经传染并且向外排毒了,但是由于抗原滴度低排毒量比较小,试纸条检测不出来,错失了及早诊疗的机会。另一方面,抗体检测试纸并不能及时准确知道机体是否传染这个病原,就比如现在常见的猫咪弓形虫检测,只有猫咪接触病原一段时间后,才能产生足量的抗体,抗体试纸才出现阳性结果。当这些情况发生,结果都是令人很难过的。因为这不仅*意味着后期要花更多的Money用于诊疗,还会出现诊疗困难,毛孩子们受罪,甚至会出现我们都不愿意接受的死亡。所以我们更建议使用PCR技术进行临床诊断。

巧亦捷核酸一体机采用的TaqMan探针法介绍:TaqMan探针法是具有高度特异性的定量PCR技术。它的工作原理是在PCR反应体系中存在一对PCR引物和一条探针,探针的5′端标记有报告基团,3′端标记有荧光淬灭基团,探针只与模板特异结合,其结合位点在两条引物之间。当探针完整的时候,报告基团的荧光能量被淬灭基团吸收,所以仪器搜集不到信号,随着反应的进展,Taq酶遇到探针,利用3′→5′外切核酸酶的活性把探针切断,导致报告基团的荧光能量不能被淬灭基团吸收,产生了荧光信号,因此信号的强度就代、表了模板DNA的拷贝数。巧亦捷全自动核酸检测一体机极大程度降低了传统核酸检测方法对于环境以及专业技术人员的依赖性。

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巧亦捷(ingeNova)是翊新诊断技术(苏州)有限公司旗下专注于动物体外诊断检测的产品品牌,以翊新诊断全资子公司——苏州翊创生物科技有限公司为主体。巧亦捷系列产品覆盖了猫呼吸道疫病检测、猫消化道疫病检测、犬消化道疫病检测、寄生虫等宠物核酸检测,非洲猪瘟、蓝耳等猪病核酸检测,牛逼支、牛腹泻等牛羊类食品动物的核酸检测,人畜共患病核酸检测,以及鱼虾等水生动物的核酸检测。全自动薄膜微流控核酸检测一体机是巧亦捷系列产品的主打检测平台,巧亦捷基于此平台技术致力于为客户提供快速、精确的动物疫病诊断整体解决方案。PCR在常见传染病、**、遗传病、寄生虫病、优生优育、法医学等领域中有相当高的实际应用价值。江苏多重PCR荧光检测

无论是由病毒、细菌,还是原虫、寄生虫等引起的犬猫传染性疾病都可利用巧亦捷核酸一体机进行诊断。PCR技术

每个生物体(包括病原微生物)都含有自己的基因,通过对某种生物的基因信息进行分析可以用来识别和区分不同的物种,甚至可以用来区分不同的个体(比如我们在犯罪大片里经常见到的通过DNA分析来抓凶手,再比如亲子鉴定)。传染病诊断也类似于刑侦,就是在患者的样本中查找引起症状的元凶——病原微生物。那么同样可以通过分析样本中是否含有某种病原微生物的基因来实现诊断。PCR就是通过样本中的基因信息进行分析,某一种病原体的诊断试剂只会去捕捉该病原体的基因,并对其进行大量扩增。如果扩增可以发生,则结果呈阳性,也就是有这种病原微生物存在。PCR技术