PCR在传染病诊断中有灵敏度高的优势,可以做到早期诊断,实现及时诊疗,减少患病动物痛苦,获得更好的疗效。预后评估,监控诊疗效果。且适用范围广不同传染病的检测效果相同。不存在诸如免疫学方法中出现的猫类检测试纸卡效果不佳的情况。PCR是目前大多数犬猫传染病的诊断方法。也是宠物医院必备的仪器之一,但市面上大多数都是PCR扩增仪,即需要人工进行核酸提取和纯化。而巧亦捷核酸一体机则囊括了核酸提取和PCR扩增部分,仪器自动操作,极大减少了宠物医院的仪器预算,真正做到全自动一体化检测。在宠物医疗中,目前病毒检测主要包括胶体金检测(试纸)和PCR检测。薄膜微流控PCR荧光探针法
每个生物体(包括病原微生物)都含有自己的基因,通过对某种生物的基因信息进行分析可以用来识别和区分不同的物种,甚至可以用来区分不同的个体(比如我们在犯罪大片里经常见到的通过DNA分析来抓凶手,再比如亲子鉴定)。传染病诊断也类似于刑侦,就是在患者的样本中查找引起症状的元凶——病原微生物。那么同样可以通过分析样本中是否含有某种病原微生物的基因来实现诊断。PCR就是通过样本中的基因信息进行分析,某一种病原体的诊断试剂只会去捕捉该病原体的基因,并对其进行大量扩增。如果扩增可以发生,则结果呈阳性,也就是有这种病原微生物存在。江苏核酸PCR试剂宠物传染病检测技术方面,核酸检测方法具有极高的灵敏度和特异性,可很大程度缩短传染病检测的窗口期。
市面上一般的实时荧光PCR检测过程:待检样品通过DNA提取试剂盒提取DNA。样本制备完成后,进行荧光定量PCR扩增。Ct值由实时荧光PCR仪软件自动确定。此法需要配置实时荧光PCR仪,这对中小型宠物医院、兽医站等来说,是一笔不小的负担:且操作需要更专业的技术人员。巧亦捷针对此产品痛点特推出薄膜微流控核酸检测一体机,集核酸提取、PCR扩增为一体,无需专业实验室、无需专业检测人员,真正实现了“样本进,结果出”,大部分检测项目可在30~70分钟内完成,检测快速、结果准确。
近三年宠物PCR检测普及率极大增加,一、线城市普及率约80%,二线城市普及率约60%。中国现有宠物医院数量约15000家,一、二线城市宠物医院数量占比65%,并且未来宠物医院数量将持续增长,综合来看中国1.5万家宠物医院PCR普及率约60%。宠物医院对PCR仪器主要关注3方面:1、全自动检测仪器,人工操作步骤少,由人为操作造成的失误率更少,解放人力,提高人工工作效率。2、8通量检测仪器,宠物医院检测量不高,8通量能够满足需求,节约成本。3、以投放模式采购PCR检测仪器(购买一定量的检测试剂,厂家赠送检测仪器)。巧亦捷核酸一体机,给宠物医院、兽医站、养殖场等带来了更大“福利”,减少了诊断等候时间。
PCR的工作原理:在TaqDNA聚合酶(热稳定DNA聚合酶)的作用下,由一对特异性引物经热变性-退火-延伸反应,三个不同温度的循环处理使得DNA由少量扩增到多量的一种体外DNA扩增技术。在反应体系内,以一对人工合成的寡核苷酸作为扩增引物,第一步,模板DNA变性,以构成脱氧核糖核酸的四种脱氧核苷酸为底物,目的基因作为模板,在DNA聚合酶的作用下模板DNA经过80-90℃高温变性,使模板DNA双链经PCR扩增形成的双链解离成单链。第二步,模板DNA与引物退火(复性),模板DNA解离成单链后温度降至50-60℃,引物与模板DNA单链互补配对。第三步,引物的延伸,DNA模板-引物结合物在DNA聚合酶作用下,70-75℃以dNTP为反应原料半保留复制合成一条新的模板DNA链。这三个步骤为一个循环,2-4分钟即可完成一个循环,2-3小时就能使极微量的DNA、片段、甚至单拷贝基因复制到几百万倍,从而实现对靶DNA的放大。由于扩增碱基序列按照靶DNA复制,因此PCR反应具有高度特异性。微流控PCR技术是一种通过将PCR反应微型化来实现PCR反应的高通量、低成本和快速的方法。薄膜微流控PCR荧光探针法
巧亦捷核酸检测解决方案包括全自动便携式核酸检测一体机、免核酸提取检测试剂盒。薄膜微流控PCR荧光探针法
大多数宠物医院运用的诊断方法为:PCR和试纸条。其区别是:试纸条原理是基于抗体抗原的免疫学方法,通过颜色或荧光标记来判读,和PCR检测是基于不同方法学的检测方式。PCR通过检测样本中有无病毒DNA(RNA)来确诊,灵敏度高、特异性强、支持检测项目多,是人医医学界公认的诊断金标准,两者区别可以理解为滴血认亲(免疫学方法)与亲子鉴定(分子诊断)的区别。目前专业的的宠物疾病机构就是使用PCR检测。巧亦捷核酸检测一体机采用国际**的薄膜微流控技术,实现了从核酸提取、PCR扩增、荧光检测全流程自动化芯片内完成,可以实现专业实验室级别的核酸检测,且检测时间短,全程无需专业技术人员参与,可实现基于病症的多项目联检,更适合宠物医院、兽医站、养殖场等现场快检应用场景。薄膜微流控PCR荧光探针法