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来源: 发布时间:2020年01月03日

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等待5至8秒钟,直到框架完全空了。真空运行连续添加30mL洗涤缓冲液(对于MultiBlot为15mL)。重复洗涤步骤3次(共3次)4次洗涤)。12.关闭真空,然后从框架上取下吸墨架。从污点固定器中取出污点,并与适当的检测试剂。如果使用了MultiBlot孔空白,则卸下并清洗。 扩展一级抗体孵育:一小时至过夜1.执行《通用议定书》的步骤1至5。2.加入2.5mL(对于MultiBlot),5mL(对于Miniblot)或10mL(对于Midiblot)1X一抗(浓缩液)通常在只在运行时将毛坯用于堵塞空腔印迹SNAPi.d.@2.0迷你吸盘座接受多达7.5倍8.4厘米墨迹SNAP2BHMN0100SNAPi.d.02.0Midi吸笔架接受多达8.5x13.5厘米的污点。

【操作步骤】 按厂商的使用指南用两块干净的玻璃,平板和 0.75 mm 垫片组装电泳装置中的玻璃平板夹层,并固定在灌胶支架上。 按表 1 配制分离胶液体并脱气,然后加入 10% 的 (NH4)2S2O8 和 TEMED,轻轻搅拌混匀。   按所需分离的蛋白质分子大小选择合适的 C3H5NO 百分比浓度,一般地,5% 的凝胶可用于 60~200kDa 的 SDS 变性蛋白质分子的分离,10% 用于 16~70kDa,15% 用于 12~45kDa。 用一根巴斯德吸管立即将分离胶液体沿夹层中一条垫片的边缘加入于玻璃平板夹层中,离胶,并被筛分而依各自的大小得到分离。Merck同时操作4个WB实验加速上海授权代理商。

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