NA Kit for Soil或FastDNA Spin Kit for Soil,按照土壤试剂盒提取protocol进行。有效裂解:采用介质E,介质E中研磨珠与菌体大小,可以有效裂解各种菌体细胞。去杂提纯:试剂根据微生物DNA提取而优化设计,裂解液、杂质去除剂及漂洗液能够针对菌体特性很好的去除影响DNA纯化及下游实验的抑制剂,能够提取更多的微生物DNA。省时简便:柱膜法提取操作简单省时。·很硬或韧性的样本,可以单独用介质A(1169**050)代替土壤试剂盒中的介质E来裂实验室用的土壤DNA提取推荐购买什么品牌?松江区土壤微生物DNA土壤DNA提取批发
les using SPINeasy DNA Kit for Soil:M: 1kb plus DNA ladder、Lane 1: Organic soil、Lane 2: Paddy soil、Lane 3: Flowerbed soil、Lane 4: Saline soil 、L ane 5: Desert soil。结论:采用SPINeasy DNA Kit for Soil提取多种类型土壤基因组DNA,电泳条带清晰,无弥散。3.提取不同类型土壤基因组DNA进行PCR结果。Figure 2: PCR amplification of 16S rRNA gene from different soil samples using SPINeasy DNA Kit for Soil:Lane 1: Organic soil、Lane 2: Paddy soil、M: 1kb plus DN松江区土壤微生物DNA土壤DNA提取批发上海益启,采购土壤DNA提取的放心之选。
实施例1 以二氧化硅纳米颗粒提取土壤尿液DNA。 1)DNA提取 刮取含有尿液的表层土壤,烘干,取100-200 mg土壤样品,加入样品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震荡混匀后,75℃加热裂解15分钟;最大转速离心5分钟,将上清液转移至新的样品管中,加入800 ul结合液,混匀;混合液转移至装有15 ul二氧化硅纳米颗粒的离心管中,混匀后静止15分钟;8000rpm离心1分钟去除上清液;加入500 ul漂洗液,混匀,8000rpm离心1分钟去除上清液;加入500 ul漂洗液,混匀,8000rpm离心1分钟去除上清液;70℃加热3分钟;加入20 ul洗脱液,震荡混匀,70℃加热3分钟;
12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,加入500 ul漂洗液,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,加入500 ul漂洗液,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,12000rpm离心3分钟,将离心柱转移至新的离心管中,70℃加热3分钟;加入20 ul洗脱液,70℃加热3分钟;12000rpm离心1分钟,丢弃离心柱,离心管中液体即为DNA溶液。 2)PCR扩增及电泳 PCR扩增使用Identifiler Plus试剂盒,10 μl扩增体系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,扩增程序为,95℃,11分钟;94℃,20 秒,59℃,3分钟,30个循环;60℃,10分钟;4℃保存;电泳在ABI 3500XL仪器中进行;电泳上样体系为,1 μl PCR产物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 实施例4 以石英膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表层土壤,烘干,益启生物的土壤DNA提取怎么样?
样本,5-6m/s,研磨20-40s,难裂解样本研磨2个循环,增加研磨力度,提取按土壤试剂盒提取protocol进行。·较软的样本,仍然可以采用介质E,提高裂解的剧烈程度,增加研磨速度和时间,增加研磨次数。不仅如此,我们还有文献支持。参考文献1:·样本类型:葡萄枝·样本粉碎:使用液氮和搅拌机将植物材料在无菌钢瓶中粉碎。·样本裂解:FastPrep-24TM 5G,介质E裂解。·样本DNA提取:FastDNA Spin Kit for Soil提取。·下游实验:细菌16S rD土壤DNA提取助力药物研发。杨浦区FastDNA Spin Kit土壤DNA提取批发
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94℃,20 秒,59℃,3分钟,30个循环;60℃,10分钟;4℃保存;电泳在ABI 3500XL仪器中进行;电泳上样体系为,1 μl PCR产物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 实施例5 以二氧化硅包裹的磁性纳米颗粒提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表层土壤,烘干,取100-200 mg土壤样品,加入样品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震荡混匀后,75℃加热裂解15分钟;最大转速离心5分钟,将上清液转移至新的样品管中,加入800 ul结合液,混匀;混合液转移至装有15 ul二氧化硅包裹的磁性纳米颗粒的离心管中,混匀后静止15分钟;上磁力架吸附2分钟,吸弃上清液;加入500 ul漂洗液,混匀,上磁力架吸附1分钟,吸弃上清;松江区土壤微生物DNA土壤DNA提取批发