x @ -FAgo过滤器(或等效过滤器)建议在保温瓶和真空源之间使用,例如o保护真空源免受污染。●将真空瓶连接到真空源的真空管●前肢●封闭剂,例如脱脂/低脂干奶(0.5%以下),酪蛋白,牛血清白蛋白(BSA)或其他市售的封闭剂,例如blok * -CH缓冲液(请参阅表5)抗体(单克隆和/或多克隆),检测试剂●洗涤缓冲液:Tris或磷酸盐缓冲盐溶液,pH 7.4,补充了Tween @ 20表面活性剂(TBST)或PBST)●转移蛋白的印迹吸笔座尺寸比较大印迹尺寸(厘米)多印迹4.5 x8.4小型的7.5 x 8.48.5 x 13.5。 一般准则●如果蛋白质已经转移到已经干燥的PVDF膜上,请用100%重新润湿印迹甲醇,然后在组装前用蒸馏水冲洗。如果蛋白质已转移至硝酸纤维素膜干燥后,用蒸馏水重新上海益启生物细胞计数器订购方便。黄浦区Merck细胞分析仪Merck仪器
PO缓冲液WBAVDP零零15零零毫升BLOT-QuickBlockerTM试剂WB57-175GM175克;Probumin@牛血清白蛋白8204731零零克5%碱溶性酪蛋白225毫升免疫组织化学(IHC)程序的组件SNAPi.d.@2.0免疫组织化学框架SNAP2FRIHC1个SNAPi.d.92.0IHC幻灯片固定器SNAP2SH2个配件过滤钳,钝端,不锈钢XX62零零零零6P31L真空过滤瓶XX10047051个SNAPi.d.@2.0墨粉辊SNAP2RL1个高输出泵,115伏,60赫兹WP621156零1个高输出泵,100伏,50/60HzWP62100601个高输出泵,220伏,50赫兹WP6222零5零1个真空管,内径6.4毫米x3m(内径4/4英寸x10英尺)MS黄浦区Merck细胞分析仪Merck仪器益启生物公司带您了解微流控细胞芯片分析仪详情。
关闭真空。同样,溶液将被吸收到印迹架中,并且表面可能看起来干燥。重要提示:孵育10分钟后,再抽真空。11.向下压框架并施加真空。等待5至8秒钟,直到框架完全空了。真空运行连续添加30 mL洗涤缓冲液(对于MultiBlot为15 mL)。重复洗涤步骤3次(共3次)4次洗涤)。12.关闭真空,然后从框架上取下吸墨架。从污点固定器中取出污点,并与适当的检测试剂。如果使用了MultiBlot孔空白,则卸下并清洗。 扩展一级抗体孵育:一小时至过夜1.执行《通用议定书》的步骤1至5。2.加入2.5 mL(对于MultiBlot),5 mL(对于Mini blot)或10 mL(对于Midi blot)1X一抗(浓缩液)通常在标准免疫检测过程中使用)。3.用盖子盖住吸墨纸固定架。如果需要的话,将其从底座
(1)消除印迹和印迹支架之间的气泡滚动垫(1)提供光滑的表面以用于组装印迹润湿托盘(2)用于润湿吸墨纸架和吸墨纸抗体收集盘(2)收集抗体以进行回收快速入门指南(未显示)SNAP i.d.o 2.0 MultiBlot持有接受MultiBlot支架进行印迹孵育SNAP2FRMB01框架和盖子SNAP ID。@ 2.0迷你印迹保存接受Mini吸盘架进行吸盘孵育SNAP2FRM***框架和盖子SNAP2FRMNO2SNAP i.d. @ 2.0 Midi印迹控股接受Midi印迹支架进行印迹孵育SNAP2FRMD01框架和盖子SNAP2FRMD02SNAP i.d.o 2.0 MultiBlot固定器接受多达4.5倍8.4厘米的污点SNAP2BHMB050(包括2个MultiBlot孔空白)只在运行买细胞计数器就找益启生物。
15分钟。图4.扩展孵化(过夜):SNAP i.d.8 2.0系统与标准免疫检测一种。 SNAP id.o 2.0蛋白检测b。标准系统Midi印迹免疫检测将A431细胞裂解液和大鼠肝裂解液(12至3 ug)转移至Immobilon9-P膜。两种印迹均用在TBST中制备的0.5%NFDM封闭。这SNAP i.d.c 2.0 Midi印迹被阻断20秒,标准印迹为分锁了1个小时。两种印迹均与相同稀释度的MAP激酶1/2(ErK1 / 2),但是,对于HRP偶联的二抗山羊抗兔(AP132P),将SNAP i.d.2.0印迹孵育10分钟在TBST中洗涤3次后,将标准印迹孵育1小时。 图5.扩展孵化(1小时):,SNAP i.d.o 2.0系统1小时协议与SNAP i.d.9 2.0系统标准协议与标准免上海益启生物的细胞分析仪询价公司电话。黄浦区Merck细胞分析仪Merck仪器
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Heathybran,Alheimer'sbrain健康大脑。_Azheimers bran___健康大脑。Aheimer'brain。 Heathybrin。来自阿尔茨海默氏症患者的人脑样本和来自健康供体的细胞裂解细胞凹蛋白提取试剂(目录号71009)。样品是连续的稀释并通过SDS凝胶电泳分离。 s喱被转移到Immobilone-p膜上。印迹是使用MultiBlot在SNAP i.d.e 2.0系统中进行处理,迷你和Midi镜架及其相应的吸墨纸支架。通过标准免疫检测处理对照印迹所有印迹均用0.5%NFDM封闭并用一级抗Taul(目录号MAB3420)和二级HRP-共轭山羊抗小鼠(AP124P)在以下条件下如上所示。印迹与Luminata“ m Forte一起孵育将HRP基板放在X射线胶片上黄浦区Merck细胞分析仪Merck仪器