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2psi），并需要15秒的时间来灌注电池。加载，然后以27.6kPa（4psi）流动8和6组井停留15秒以捕获细胞。然后在69kPa处流动6组井韦尔斯1-5（1psi）持续30秒以冲洗装载通道这些条件可能需要根据您的细胞类型进行优化所需的捕获密度。6.评估显微镜的负载密度。如果负载不足发生了，rcpeat加载协议7.要清理去除未捕获细胞的腔室，请流过一个或多个入口孔在34.5kPa（5psil的情况下持续5分钟）的解决方案。在手动模式选项卡上：单击“运行自定义序列”按钮或转到ProtocolEditor输入所需的参数。有关创建的更多信息压力[kPa）协议请参阅CellASICONIX2微流体系统程序图6.1-5井的流速指导。8.进入“细胞培养”或“溶液切换”部分。盘子存放存放在室温下。不要存放在益启生物是默克细胞计数器的代理商。上海Merck手持细胞计数器Merck仪器订购

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（1）消除印迹和印迹支架之间的气泡滚动垫（1）提供光滑的表面以用于组装印迹润湿托盘（2）用于润湿吸墨纸架和吸墨纸抗体收集盘（2）收集抗体以进行回收快速入门指南（未显示）SNAP i.d.o 2.0 MultiBlot持有接受MultiBlot支架进行印迹孵育SNAP2FRMB01框架和盖子SNAP ID。@ 2.0迷你印迹保存接受Mini吸盘架进行吸盘孵育SNAP2FRM***框架和盖子SNAP2FRMNO2SNAP i.d. @ 2.0 Midi印迹控股接受Midi印迹支架进行印迹孵育SNAP2FRMD01框架和盖子SNAP2FRMD02SNAP i.d.o 2.0 MultiBlot固定器接受多达4.5倍8.4厘米的污点SNAP2BHMB050（包括2个MultiBlot孔空白）只在运行

密封的平板/m歧管组件放在倒置显微镜。6.在扩展的灌注实验中，定期将7孔倒空至避免出口溢流到歧管和灌注系统中。在CellASICOONX2软件的“运行”选项卡上，单击“暂停”按钮。按下仪器上或“工具”下拉菜单中的“密封”按钮在下拉菜单中，单击开封板。从板，并抽吸良好。7.将歧管重新密封到板上，然后在在“运行”选项卡上，单击“恢复”以重新启动每个融合协议。解决方案切换1.从选定的进水口（1-5）吸出溶液。加至350μL所需的解决方案。如果少于四个单位（A-D）使用时，用缓冲液填充未使用的进口井，以防只托水。2.根据以下说明将微流体板密封到ONIX2歧管上：CellASIC@ONIX2微流体系统用户指南。3.打开CelIASICOONIX2软件，在下拉列表，然后单击ProtocolEditor选细胞跨膜电阻仪的直销公司。

IlASICONIX2微流体系统用户图4.细胞捕获机制设置说明指南。微型腔室将细胞轻轻地固定在玻璃上板底漆（可选）表面在基于灌注的分析过程中保持单个焦平面1.如果您的实验需要完全清理去除PBS，请更换实验BOA板的陷阱高度为o.7,0.9,1.1，1.3,2.3和溶液（1-5）和细胞入口（8）中的PBS与150uL您的4.5微米所需的底漆溶液歧管描述2.从6和7孔中吸出PBS溶液。CeIlASICDONK2加热（CAX2-MXT20）或碱性（CAX2-MBC20）3.根据以下说明，将微流体板密封到ONIX2歧管上歧管将微流控板连接到CellASICONX2CellASICONIX2微流体系统用户指南。微流体系统。4打开CellASICONX2软件，选择一种新的实验选项，然后在下拉列表中找到Bo4上海益启生物Merck仪器订购方便。长宁区MerckWB实验加速器Merck仪器商家

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A板。在“手动模式”选项卡上（图7），单击“运行液体灌注”序列按钮。或者，在“协议编辑器”选项卡上（图8）输入所需的步骤和条件。建议的压力1-5组井的流动时间为34.5kPa（5psi）和5分钟，分别。注意：对于倾向于黏附或聚集的细胞，请充分灌注第8组以及第1-5井组将使细胞在细胞中附着于通道的发生率装货有关创建协议的更多信息，请参考CelIASICD图5.CellASICONIX2微流体系统的生产线《ONIX2MicrofluidicSystem用户指南》。使用空气压力实现流量控制，使每一个中的液体都充满单元加载出色地。板上的多个孔被组合在一起，并通过使用CelASICDONIX2微流体系统的压力驱动方法通过油路的单个气动管线每套油井被称为“油井”。groupA真空管线用于将板密封到万用板上海Merck手持细胞计数器Merck仪器订购