8000rpm离心1分钟,上清DNA溶液转移至新的离心管中。 2)PCR扩增及电泳 PCR扩增使用Identifiler Plus试剂盒,10 μl扩增体系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,扩增程序为,95℃,11分钟;94℃,20 秒,59℃,3分钟,30个循环;60℃,10分钟;4℃保存;电泳在ABI 3500XL仪器中进行;电泳上样体系为,1 μl PCR产物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 实施例2 以硅胶膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表层土壤,烘干,取100-200 mg土壤样品,加入样品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震荡混匀后,75℃加热裂解15分钟;最大转速离心5分钟,将上清液转移至新的样品管中,加入800 ul结合液,混匀;混合液转移至装有硅胶膜的离心柱中,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,加入500 ul漂洗液,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,加入500 ul漂洗液,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,12000rpm离心3分钟,将离心柱转移至新的离心管中,70℃加热3分钟;加入20 ul洗脱液,70℃加热3分钟;12000rpm离心1分钟,丢弃离心柱,离心管中液体即为DNA溶液。 2)上海土壤DNA提取的供应商。浙江土壤基因组土壤DNA提取哪家好
保证提取浓度高;纯:独特的抑制物去除技术, 提高A260/230, 保障提取纯度好, 提取的DNA可直接应用于下游实验;多:完美配合自动化核酸提取仪,实现高通量提取;广:多种环境土壤均能有效提取,适用性广,与大多数核酸自动化提取仪和工作站相匹配;安:不使用酚、氯仿等有毒试剂,安全环保;【知识点】这些土壤基因组DNA提取问题,你遇到过吗?【知识点】这些土壤基因组DNA提取问题,你遇到过吗?问题汇总 | **试用 | 反馈有奖。大家在做上海土壤DNA提取实验室用的土壤DNA提取推荐购买什么品牌?
所述pH缓冲剂为Tris-HCl、Tris-醋酸、NaH2PO4-Na2HPO4、KH2PO4-K2HPO4、醋酸-醋酸钠、柠檬酸-柠檬酸钠,所述pH缓冲剂的pH值为7.0-11,推荐的pH缓冲剂为Tris-HCl,推荐的pH缓冲剂的pH值为7.5-8.5; (b)结合液,其组成成分包括表面活性剂、离液盐、pH缓冲剂; 所述表面活性剂为:聚乙二醇辛基苯基醚、TWEEN 20、TWEEN 40、TWEEN 60、TWEEN 80、NP 40中的一种或两种及以上的混合,所述表面活性剂的质量浓度为1-100g/L; 所述离液盐为异硫氰酸胍、盐酸胍、硫氰酸钾、高氯酸钠、碘化钾、碘化钠中的一种或两种及以上的混合,所述离液盐的浓度为3-5 mol/L; 所述pH缓冲剂为Tris-HCl、Tris-醋酸、NaH2PO4-Na2HPO4、KH2PO4-K2HPO4、醋酸-醋酸钠、柠檬酸-柠檬酸钠,所述pH缓冲剂的pH值为4.5-7.0;
1.0视为提取效果良好。土壤类型:有机营养土100mg、花坛土100mg、盐碱土250mg、沙漠土250mg。提取方法:自动化/手工、自动化/手工、自动化/手工、自动化/手工。DNA收率(ng/mg样本):130.25+4.95;196.08+3.92、19.92+0.95;24.43+0.74、11.75+0.37;13.43+0.39、2.47+0.13;2.97+0.13。A260/A280:1.84+0.00;1.98+0.02、1.86+0.01;1.85+0.02、1.87+0.02;1.90+0.01、1.85士0.00;1.91+0.03。A260/A230:1.23+0.02;1.08+0.01、1土壤DNA提取是良好的科学仪器。
取纯度。绝招四:***的硅胶柱膜及配套耗材,能特异性高效吸附核酸,比较大限度截留DNA分子,且柱容积大,可以减少结合时离心的次数。四大绝招傍身,各种类型土壤的样本统统搞定,再让我们看看TA在江湖上的表现吧。2.好不好用,数据来说话。1.提取不同类型土壤基因组DNA收率及纯度结果。含高腐殖酸有机营养土、水稻土、花坛土、盐碱土、沙漠土等土壤样本,DNA提取收率及纯度结果如下表:Sample Type:Organic soil、Paddy soil、Flower在线询价MP土壤DNA提取。金山区土壤基因组DNA提取土壤DNA提取联系人
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取100-200 mg土壤样品,加入样品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震荡混匀后,75℃加热裂解15分钟; b.最大转速离心5分钟,将上清液转移至新的样品管中,加入800 ul结合液,混匀; c.将上一步的混合液转移至硅基DNA吸附材料,分离液体和硅基DNA吸附材料; d.用漂洗液漂洗硅基DNA吸附材料; e.用洗脱液洗脱硅基吸附材料中的DNA; 2)PCR扩增及电泳 将上步纯化的DNA进行PCR扩增,在电泳仪中检测DNA。 本发明具有以下有益效果: 本发明的土壤尿液DNA提取试剂盒及方法,配制好土壤裂解液、结合液、漂洗液、洗脱液,利用特殊成分的土壤裂解液,在加入结合液之前,样品土壤来源的二氧化硅不与DNA结合,离心分离固体颗粒和溶解了DNA的上清液,上清液中加入结合液,混合后转入含有硅基DNA吸附材料中,分离液体和硅基DNA吸附材料,漂洗硅基DNA吸附材料,洗脱获得纯化DNA;浙江土壤基因组土壤DNA提取哪家好