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来源: 发布时间:2024年11月08日

Amicon® Pro纯化超滤管简明操作指南 亲和纯化 用于纯化GST•Tag,His•Tag等重组表达蛋白及抗体,适合~0.5 mL裂解液操作 6次低速离心,总耗时~100分钟(含65分钟孵育时间) 1. 在Amicon® Pro上样池中加入200μL亲和纯化树脂(50%悬浊液)和1.5 mL漂洗缓冲液。 1,000×g离心1 min。 2. 加入0.5 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h,其间可温和搅动促进结合。 3. 1,000×g离心1 min 以去除未结合杂质。 4. 加入1.5 mL漂洗缓冲液,1,000×g离心1 min。 外泌体用于细胞学或动物实验前的无菌处理 已经经过上述方法制备的外泌体在进行细胞或动物实验之前还需进行一步除菌过滤,这个时候考虑到得率,应该采用离心法处理,以减少过滤时的外泌体样品损失。 超滤方法纯化具体操作步骤举例 Amicon® Ultra-15 超滤管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip®真空抽滤对样品进行澄清[目录号SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜]上海超滤浓缩管哪家比较好?闵行区默克0.5ml超滤浓缩管哪家好

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用超滤对分子进行分级 通过选定截留分子量的超滤操作能精确地将混在大分子中的小分子去 除的想法常常不切实际。事实上,膜的规格描述是基于截留而非通过 的性质。一项实验中,采用 100k NMWL 滤膜,大于 100kDa 的分子截 留率 >90%,但这时比膜孔径小的分子并不是完全自由地通过滤膜, 75kDa 的分子截留率为 83%,30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的 溶液中的各 种成分通过膜并不像单一成分的溶液那么简单和容易。实 践中,如果要分离两种大分子,它们之间的分子量差异应该达到 10 倍 以上,或至少膜的 NMWL 规格在两种蛋白之间,则可达到比较理想的 分离。如果蛋白溶液较为稀释,低压下操作也有助于达到更好的效果。嘉定区默克15ml超滤浓缩管一级代理上海超滤浓缩管销售公司。

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特别推荐应用(提供实验报告作为参考) Microcon®超滤管: Microcon®PCR 级超滤管: • 法医鉴定分析的DNA样品制备 • 生物大分子样品浓缩、脱盐及缓冲液置换 • 体外合成mRNA的纯化 • 以人mRNA或总RNA制备荧光DNA探针 • 游离标记物的去除 • 纳克级核酸的定量回收及大片段DNA完整性研究 • 替代乙醇沉淀,离心法高效浓缩基因组DNA 应用指南 典型应用 肽及生长因子浓缩 蛋白浓缩与脱盐 电泳等操作前的蛋白样品浓缩 HPLC前去除蛋白 组织培养抽提物和细胞裂解液中大分子成分的纯化 生物样本浓缩(抗原,抗体,酶等) 从含有SDS(或无SDS)的缓冲液中浓缩gDNA 核酸浓缩与脱盐(单链或双链核酸) 去除标记核苷酸 去除标记氨基酸 从扩增的DNA产物中去除引物 克隆前去除连接序列(linker)

离心方式的超滤方法进行溶液置换也被称为“渗滤”,操作时样品首先被浓缩,继而加入新的溶液,再次浓缩时,原溶液已经被换成选定的溶液。 化学相容性与溶出 样品的化学背景有时很多样而复杂,过滤的过程中很重要的一点是操作过程不应给样品带来新的污染。所以滤膜和装置与样品接触的其它部分都不能与样品中的化学成分发生反应而产生溶出污染。关于默克密理博各种微滤、超滤产品的化学相容性请参考产品使用说明书或垂询技术支持专线 。回收率及其重要性超滤的**终目的常常是很大程度地回收目标溶质,但膜的很多特性会对这一目的产生影响。影响回收的因素包括:• 标称分子量限制(NMWL)/ 核酸截留分子量(NCO)• 截留 • 浓差极化 • 通量超滤浓缩管直销公司。

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截留 截留有时也称为排阻。水合程度、离子和空间位置效应会导致分子量相近 的分子表现非常不同的截留状态。许多生物大分子在不同的 pH 或离子强 度改变的情况下倾向于聚集或改变构象,因此其有效大小可能比 “天然” 分子大恨多,从而导致排阻增加。比如,有些蛋白质在某些缓冲液条件下 会发生多聚化,而另一些则发生解聚(如血红素蛋白)成亚基。这使选择 合适截留分子量的膜变得复杂。以默克密理博的经验,我们通常推荐选择 为目的分子大小一半的膜作为尝试的优先,再根据实际情况加以调整。超滤浓缩管的系列有很多。宝山区默克离心浓缩管咨询报价

益启生物公司主营超滤浓缩管销售。闵行区默克0.5ml超滤浓缩管哪家好

Minicon®浓缩器 Minicon® 浓缩器用于在电泳或免疫电泳分析前对尿液和脑脊液进行浓缩,以增强对不正常或病态的蛋白质(例如尿中的 Bence Jones 蛋白)的识别。B15型有 8 个浓缩单元,用于 5mL 样本的处理;CS15型有 10 个浓缩单元,适合 2.5mL 样品的处理。溶剂和盐分通过超滤被吸收剂吸收而样品被浓缩。 优点与应用 静态浓缩器,不需要其它辅助装置 浓缩倍数达到 100 倍,样品终体积小 同时浓缩多个临床样品 特别推荐用于尿液、脑脊液等的蛋白 富集分析闵行区默克0.5ml超滤浓缩管哪家好